Geri Dön

Hepatit B virüsü 'e' antijeni gen bölgesinin mayada ekspresyonu

Expression of Hepatitis B virus 'e' antigen gene region in yeast

PDF İndir

  1. Tez No: 324885
  2. Yazar: BERKSAN ŞİMŞEK
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. KENAN ŞENER
  4. Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
  5. Konular: Mikrobiyoloji, Microbiology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2012
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: GATA
  10. Enstitü: Tıp Fakültesi
  11. Ana Bilim Dalı: Tıbbi Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 68

Özet

Bu çalışmada, hepatit B virüsü (HBV) enfeksiyonlarının tanı ve izleminde önemli serolojik belirleyicilerden biri olan hepatit B ?e? antijeni (HBeAg)'ne ait gen bölgesinin rekombinant DNA teknolojisi ile ökaryotik maya hücrelerine aktarılması ve bu hücrelerde ekspresyonu amaçlandı. Çalışmada HBV DNA'sı pozitif hasta serumları kullanıldı ve HBeAg'yi kodlayan genin primerleri dizayn edilerek HBeAg gen bölgesi polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) ile çoğaltıldı. Daha sonra saflaştırılan amplikonlar ekspresyon vektörüne (pYES2.1 plazmidi) klonlandı ve vektör CaCl2 yöntemiyle kompetan bakteriye (TOP 10F' Escherichia coli) transforme edildi. HBeAg gen bölgesi içeren ekspresyon vektörü kompetan bakteri yardımıyla çoğaltıldıktan sonra Saccharomyces cerevisiae'ya transforme edildi. Son aşamada, HBeAg'nin maya tarafından eksprese edilip edilmediği mikropartiküllü kemiluminesens immünoassay yöntemiyle kontrol edildi. Bu çalışmada elde edilen maya hücreleri sonraki çalışmalarda HBeAg proteininin saf olarak izole edilmesinde kullanılabilir. Ülkemizde HBV enfeksiyonunun serolojik tanısında kullanılan kitlerin büyük çoğunluğunun ithal ürünler olduğu ve bu durumun ülke ekonomisine getirdiği yük dikkate alındığında, bu ve benzeri çalışmalarla elde edilen deneyim ve bilgi birikiminin, kendi öz kaynaklarımızla elde edilecek ürünlere dönüşmesine önemli katkılar sağlayacağı düşünülmektedir.

Özet (Çeviri)

In this study it was aimed to transform the hepatitis B ?e? antigen (HBeAg) gene region, one of the most important serological markers in the diagnosis and follow-up of hepatitis B virus (HBV) infections, into eukaryotic yeast cells by recombinant DNA technology and observe the expression within the cells. For this purpose, HBV DNA positive patient sera were used and by designing the primers of the gene coding HBeAg, HBeAg gene region was amplified by polymerase chain reaction (PCR). After the amplicons were purified and cloned to expression vector (pYES2.1 plasmid) and the vector was transformed to competent bacteria (TOP 10F? Escherichia coli) by CaCl2 method. Expression vector including HBeAg gene region was grown with the support of competent bacteria and then transformed to Saccharomyces cerevisiae. Finally, whether HBeAg was expressed by the yeast was checked through a microparticule chemiluminescence system. Yeast cells obtained from this study may be used to isolate purified HBeAg protein in latter studies. The diagnostic kits used in our country for HBV serology are usually imported products, which have been creating a great economical burden, should this reality be taken into consideration, it is concluded that the experience and knowledge gained with such studies will help to produce our own diagnostic products using our own resources.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    389407

    The effect of HLA DPB1 alleles on the immune response in chronic Hepatitis B

    Kronik Hepatit B hastalığında HLA DPB1 allelerin hastalığın immun yanıta etkisi

    NİLAY GURBET KARATAŞ

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2014

    Tıbbi Biyolojiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. GİZEM DİNLER DOĞANAY

  2. Tez No

    248448

    Hepatit B virusu (HBV) ile kronik enfekte hastalarda HBV bazal kor promoter/prekor gen mutasyonları ve genotip değerlendirilmesi

    Basal core promoter/precore gene mutations in chronically infected patients with hepatitis B virus and genotype evaluation

    SEDA TEZCAN

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2009

    MikrobiyolojiMersin Üniversitesi

    Tıbbi Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. GÜROL EMEKDAŞ

  3. Tez No

    107773

    Hepatit B virüsü HBcAg geninin klonlanması ve ökaryotik hücrelerde açıklanması

    Cloning and expression HBcAg gene of hepatitis B virus in eukaryotic cells

    YASEMİN BULUT

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2001

    MikrobiyolojiFırat Üniversitesi

    Mikrobiyoloji ve Klinik Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. MEHMET ZİYA DOYMAZ

  4. Tez No

    384937

    Design of inorganic peptide bonded fusion biomolecules for tracking disease related proteins

    Hastalıkla ilişkili proteinlerin izlenmesinde anorganik peptit bağlarla füzyon biyomoleküllerin tasarımı

    BERTAN KORAY BALCIOĞLU

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2014

    Biyomühendislikİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. CANDAN TAMERLER

    DOÇ. DR. BERRİN ERDAĞ

  5. Tez No

    904115

    İnterferon gama ilişkili Protein-10 (IP-10) genindeki promoter bölge polimorfizmlerinin kronik Hepatit B hastalarında Hepatit B yüzey antijen kaybı üzerine etkisi

    Effect of promoter region polymorphisms in the interferon gamma-i̇nducible Protein-10 (IP-10) gene on Hepatitis B surface antigen loss in chronic Hepatitis b patients

    MELEK TUTKU KAÇAR ŞAHİN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    Enfeksiyon Hastalıkları ve Klinik MikrobiyolojiÇukurova Üniversitesi

    Enfeksiyon Hastalıkları ve Klinik Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ASLIHAN CANDEVİR

    DOÇ. DR. YASEMİN SAYGIDEĞER

Geri Dön