Enterococcus faecalis KT11'in probiyotik potansiyelinin belirlenmesi ve bakteriyosin üretimi üzerine çalışmalar
Determination of probiotic potential of enterococcus faecalis KT11 and studies on its bacteriocin production
- Tez No: 343645
- Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. BUKET KUNDUHOĞLU
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoloji, Biology
- Anahtar Kelimeler: bakteriyosin, probiyotik, laktik asit bakterileri, Enterococcus faecalis, bacteriocin, probiotics lactic acid bacteria, Enterococcus faecalis
- Yıl: 2014
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Eskişehir Osmangazi Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 149
Özet
Bu çalışmada E. faecalis KT11'in ürettiği bakteriyosinin kısmi karakterizasyonu yapılmış ve üretim için optimum koşullar belirlenmiştir. E. faecalis KT11'den elde edilen kültür supernatanların pH'ı 6,5 ayarlanmış ve katalaz enzimi ile muamele edilmiştir, bu işlemler sonrasında aktivitesinde bir değişiklik olmamıştır. Daha sonra süpernatanlar bazı proteolitik enzimlerle (Tripsin, Pepsin, α-Kimotripsin, Proteaz, Proteinaz K) muamele edilmiş ve pepsin dışındaki tüm proteolitik enzimler, süpernatanların antimikrobiyal aktivitesini yitirmesine neden olmuştur. Bakteriyosinin yüksek sıcaklığa (121 °C'de 30 dk) oldukça dirençli olduğu belirlenmiştir. Ayrıca bakteriyosinin aktivitesi, pH'sı 2-11 olan ortamlarda değişmeden kalmıştır. Triton-X, Tween 80, üre, EDTA ve SDS gibi deterjanlar ve kloroform, propanol, metanol, etanol, hekzan, eter ve aseton gibi organik çözücülerle muamele sonrasında da aktivitesi değişmemiştir. Liyofilize süpernatandaki, amonyum sülfat çöktürmesi sonrasındaki ve diyalizattaki protein miktarı sırasıyla 328,7, 507,4 ve 498,8 µg/ml dir. Bakteriyosinin molekül ağırlığı 3,5-6,5 kDa arasındadır. Diyalizatın HPLC profili belirlenmiş ve 18, 20, 22, 26, 28 ve 30. dakikalarda toplanan fraksiyonlar antimikrobiyal aktivite göstermiştir. E. faecalis KT11'in bakteriyosin üretmesi için optimum koşullar; 40 °C (aerobik), pH=6, %4 inokulum ve 18 saattir. Ayrıca E. faecalis KT11 hücreleri, pH 2 ve 3' te; %0,3, %0,5 ve %1 safra tuzları varlığında; pH'ı 3 ve 4 olan yapay mide sıvısında (3 mg/ml pepsin, 5 mg/ml NaCl) canlı kalabilmiştir. Buna ek olarak, E. faecalis KT11 kültür süpernatanlarının ve liyofilize süpernatanın oldukça yüksek bir antioksidan etkiye (DPPH inhibisyonu= %94-96) sahip olduğu da belirlenmiştir. Bu veriler E. faecalis KT11'in probiyotik olarak kullanım potansiyelinin olduğunu göstermektedir.
Özet (Çeviri)
In this study, partial characterization of bacteriocin produced by E. faecalis KT11 was done and optimum conditions for bacteriocin production were determined. The pH of culture supernatants were adjusted to 6,5 and treated with catalase enzyme, after these treatments their activity did not change. When supernatants were treated with some proteolytic enzymes (trypsin, pepsin, α-chemotrypsin, protease, Proteinase K), all enzymes except pepsin led to the loss of antimicrobial activity of supernatants. Bacteriocin was very heat stable (121 °C for 30 min). Activity of the bacteriocin did not change in the pH=2-11. Detergents such as Triton-X, Tween 80, urea, EDTA and SDS, and organic solvents such as chloroform, propanol, methanol, ethanol, hexane, ether, and acetone did not change the activity of the supernatants. Protein content of lyophilized supernatant, ammonium sulphate precipitate and dialysate were 328,7, 507,4 and 498,8 µg/ml, respectively. Molecular size of bacteriocin was between 3,5-6,5 kDa. HPLC fractions collected at 18, 20, 22, 26, 28 and 30 minutes showed antimicrobial activity. Optimum conditions were determined as; 40 °C (aerobic), pH=6, 4% inoculum and 18 hours, for the bacteriocin production by E. faecalis KT11. E. faecalis KT11 cells survived in pH 2 and 3; 0,3%, 0,5% and 1% bile salt; artificial gastric fluid at pH 3 and 4 (3 mg/ml pepsin, 5 mg/ml NaCl). In addition, it was determined that E. faecalis KT11 culture supernatants and lyophilized supernatant possess high antioxidant effect (inhibition of DPPH %=94-96). These data indicated that E. faecalis KT11 also has potential to be used as a probiotic.
Benzer Tezler
- Enterococcus faecalis ile enfekte edilmiş kök kanallarında farklı fotosensitizerler ile yapılan fotodinamik terapinin antibakteriyel etkinliğinin değerlendirilmesi
Evaluation of antibacterial activity of photodynamic theraphy with different photosensitizers in enterococcus faecalis-infected root canals
ELİF TEKİN
Diş Hekimliği Uzmanlık
Türkçe
2017
Diş HekimliğiGaziosmanpaşa ÜniversitesiEndodonti Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. HAKAN GÖKTÜRK
YRD. DOÇ. DR. İSMAİL ÖZKOÇAK
- Tavukların deneysel amiloid artropatisinde enterokok virulens faktörlerinin rolü
The role of enterococcal virulence factors on experimental amyloid arthropathy in chickens
ALPER ÇİFTCİ
- Yöresel peynirden izole edilen gram pozitif bir bakterinin ürettiği bakteriyosinin karakterizasyonu
Characterization of bacteriocin produced by a gram positive bacteria isolated from traditional cheese
HİLAL İŞLEROĞLU
Yüksek Lisans
Türkçe
2006
Gıda MühendisliğiGaziosmanpaşa ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DOÇ.DR. ZELİHA YILDIRIM
- Üriner sistemden izole edilen enterococcus faecalis türündeki bakterilerin virülans faktörlerinin saptanması ve antibiyotik direncinin araştırılması
Investigation of virulence factors and antibiotic resistance of enterococcus faecalis bacteria isolated from urinary tract
DENİZ TURAN
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2010
Mikrobiyolojiİstanbul ÜniversitesiMikrobiyoloji ve Klinik Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. BÜLENT GÜRLER
- Enterococcus faecalıs biyofilm yapısında eDNA'nın rolü vebiyofilm ile mücadelede enzim ve antibiyotik uygulamasıyoluyla biyofilm yapılarının zayıflatılması
The role of eDNA on biofilm structures of enterococcus faecalis and combat with biofilm structure via enzyme and antibiotic treatment to weakening of the biofilm structure
BURAK GÜNEŞ
Yüksek Lisans
Türkçe
2018
BiyoteknolojiAnkara ÜniversitesiTemel Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. NEFİSE AKÇELİK