Geri Dön

Ağrı Diyadin kaplıcasından izole edilen termofilik Brevibacillus sp. (Z1) bakterisinden lakkaz enziminin saflaştırılıp, karakterize edilmesi ve endüstride kullanılabilirliğinin araştırılması

Purification of laccase enzyme of thermophilic Brevibacillus sp. isolated from Agri Diyadin hot spring and determination of potential industrial usage of the enzyme

PDF İndir

  1. Tez No: 352173
  2. Yazar: CEYDA BOZOĞLU
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. AHMET ADIGÜZEL
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Mikrobiyoloji, Microbiology
  6. Anahtar Kelimeler: Lakkaz, Moleküler karakterizasyon, Brevibacllus sp, Dekolorizasyon, Saflaştırma, Karakterizasyon, Laccase, Molecular Characterization, Brevibacillus sp, Decolorization, Purification, Characterization
  7. Yıl: 2014
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Atatürk Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 128

Özet

Bu tezde, Ağrı/Diyadin kaplıcasından izole edilen, konvensiyonel ve moleküler yöntemler kullanılarak karakterize edilen Brevibacillus sp. (Z1) (Gen Bank No:KC292196.1) bakterisinden ekstraselüler lakkaz enzimi sırasıyla; amonyum sülfat çöktürmesi, DEAE sefadeks iyon değişim kromatografisi ve sephadeks G100 jel filtrasyon kromatografisi basamakları kullanılarak saflaştırıldı. Saflaştırılan enzimin optimum pH, optimum sıcaklık, Vmax-Km değerleri, ayrıca sıcaklık ve pH stabiliteleri belirlendi. Enzimin ABTS, 2,6-dimetoksifenol ve guaikol substratlarına karşı substrat spesifikliği belirlendi. Enzim üzerine Ca2+, Mg2+, Hg2+, Mn2+, Na+, Zn2+, Cu2+, Cd2+, Co2+ ve Fe2+ gibi bazı metal iyonlarının ve EDTA, sodyum azid, dithioeritritol ve SDS gibi bazı kimyasalların etkisi araştırıldı. Saflaştırılan lakkaz enziminin endüstriyel süreçlerde ve de çevresel atıkların biyolojik olarak yıkımında kullanılabilirliğinin araştırılması amacıyla ticari olarak satılan ve tekstilde kullanılan bazı boyaların enzimatik olarak dekolorizasyonu çalışıldı.Gerçekleştirilen deney sonucunda elde edilen verilere göre; lakkaz enziminin optimum pH'sı 4.0, optimum sıcaklığını 60oC, molekül ağırlığı 122.02, 93.756 ve 73.790 kDa büyüklüğünde, 3 alt birimden oluştuğu tespit edildi. ABTS ve 2,6-dimetoksifenol substratları için Vmax değerleri sırasıyla 14.08 EU/mL.dak., 16.12 EU/mL.dak., Km değerleri ise ABTS, 2,6-dimetoksifenol substratları için sırasıyla 5.34 mM ve 3.03 mM olarak hesaplandı. Brevibacillus sp. (Z1)'den ekstraselüler olarak üretilip saflaştırılan lakkaz enzimini kullanarak çevre kirliliğine sebep olan Reaktif Siyah 5, Fuksin, Allura Kırmızısı ve Asit Kırmızısı 37 gibi bazı tekstil boyalarının giderilmesinde kullanılabilirliği araştırıldı. Enzimin Reaktif Siyah 5, Fuksin, Allura Kırmızısı ve Asit Kırmızısı 37 boyalarının 3 saat sonunda %66.0, %50.8, %53.6 ve %47.3 oranında azalttığı belirlendi.

Özet (Çeviri)

In this thesis, thermophilic bacterial isolates were obtained from Ağrı/Diyadin hot spring. Then, the laccase activities of these isolates were inestigated to find the isolate, which has has the highest laccase activity. The isolate with the highest laccase activity was identified as Brevibacillus sp. (GEN BANK NO: KC292196.1) by using conventional and molecular methods. The extracellular laccase enzyme of Brevibacillus sp. was purified by using respectively ammonium sulfate precipitation, DEAE cellulose ion exchange chromatography and Sephadex G100 gel filtration chromatography steps. Optimum pH, optimum temperature, Vmax-Km values and separately temperature and pH stabilities of the purified enzyme were determined. The substrate specificity of the enzyme was determined against to the substrates of ABTS, 2,6-dimethoxyphenol and guaicols. The influence of some metal ions Ca2+, Mg2+, Hg2+, Mn2+, Na+, Zn2+, Cu2+, Cd2+, Co2+ and Fe2+ some chemicals such as EDTA, sodium azide, dithioeritritol, SDS on the enzyme was studied. With the purpose of the investigation of the purified laccase enzyme in industrial processes and also in the biological breakdown of environmental waste, decolourising enzymatically of some dyes which are available in textile and commercially was studied. According to the data obtained as a result of the performed experiments, it has been detected that the optimum pH of laccase enzyme is 4.0, its optimum temperature is 60'C and its molecular weight is 122.02, 93.756 ve 73.790 kDa. It has been calculated that V-max values for ABTS and 2,6-dimethoxyphenol substrates are respectively 14.08 EU/mL.dak., 16.12 EU/mL.dak. ; Km values for those substrates are respectively 5.34 mM, 3.03 mM. It was researched whether the purified enzyme which has been produced as extracellular may be used for the removing of some textile dyes such as Reactive Black 5, fuchsin, Allura red and Acid Red 37 which has caused environment contamination or not. It was determined that the enzyme reduces Reactive Black 5 enzyme, Fuchsin, Allura Red and Acid Red 37 dye to %66.0, %50.8, %53.6 and %47.3 at the end of 3 hours.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    139245

    Gönen, Kestanbol ve Diyadin kaplıcalarından termofilik bakterilerin izolasyonu, moleküler yöntemlerle karakterizasyonu ve tanımlanması

    Isolation, characterization with molecular methods and description of thermophilic bacteria from Çönen, Kestanbol and Diyadin hot springs

    SABRİYE ÇANAKÇI DÜLGER

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2003

    BiyolojiKaradeniz Teknik Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ALİ OSMAN BELDÜZ

  2. Tez No

    236684

    Ağrı-Diyadin bölgesinde Mycoplasma agalactiae'nın koyunlarda seroprevalansının araştırılması

    Investigation on the seroprevalance of Mycoplasma agalactiae in sheep in the region of Ağrı-Diyadin

    RÜŞTÜ YAŞAR

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2008

    Veteriner HekimliğiYüzüncü Yıl Üniversitesi

    İç Hastalıkları (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. İHSAN KELEŞ

  3. Tez No

    901737

    Selülaz enziminin Ağrı Diyadin termal kaplıcalarından izole edilen bakteriden elde edilmesi, kısmi saflaştırılması ve karakterizasyonu

    Obtaining, partial purification and characterisation of cellulase enzyme from bacteria isolated from Ağri Diyadin thermal hot springs

    OSMAN EREN

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    BiyokimyaAğrı İbrahim Çeçen Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. HALİS ŞAKİROĞLU

  4. Tez No

    762647

    Jeotermal enerjinin Ağrı ili ekonomisi için önemi: Diyadinilçesi swot analizi

    The importance of geothermal energy for the economy of Ağrı: Diyadin district swot analysis

    REMZİYE SOLMAZ ASLAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    EkonomiAğrı İbrahim Çeçen Üniversitesi

    İktisat Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. NAZİFE ÖZGE BEŞER

  5. Tez No

    513873

    Enterococcus faecium A2'den lakkaz enziminin üçlü faz ayırma sistemi ile saflaştırılması, karakterizasyonu ve biyoteknolojik uygulanabilirliğinin araştırılması

    Purification, characterization and biotechnologi̇cal feasi̇bi̇li̇ty of the enzyme laccase by the three phase partitioning system, from Enterococcus faecium A2

    AYBÜKE EROL

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    BiyoteknolojiAtatürk Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MELDA ŞİŞECİOĞLU

Geri Dön