Geri Dön

Dihidropirimidin dehidrogenaz enziminin afinite kromatografisi ile koyun karaciğerinden saflaştırılması, bazı kimyasal moleküller ve metal iyonlarının etkisinin incelenmesi

Purification of dihydropyrimidine dehydrogenase enzyme from sheep liver by affinity chromatography and investigation of the effect of some chemical molecule and metal ions

PDF İndir

  1. Tez No: 361155
  2. Yazar: YASEMİN CAMADAN
  3. Danışmanlar: PROF. DR. HASAN ÖZDEMİR
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2014
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Atatürk Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Biyokimya Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: 125

Özet

Bu çalışmada dihidroprimidin dehidrogenaz (DPD) enzimi ilk defa koyun karaciğerinden %16,7 verimle 402,7 kat saflaştırıldı. Saflaştırma prosedüründe DEAE iyon değişim ve 2′,5′-ADP Sepharose 4B afinite kromatografisi kullanıldı. Enzimin saflığını kontrol etmek ve molekül kütlesini belirlemek için SDS-poliakrilamid jel elektroforezi yapıldı ve tek bant gözlendi. Molekül kütlesi koyun karaciğer DPD enzimi için 111 kDa bulundu. Enzim üzerinde yapılan kinetik çalışmalar çerçevesinde optimum pH, optimum iyonik şiddet, optimum sıcaklık, stabil pH sırasıyla 8,0, 0,9 mM, 50°C, 7,5 olarak hesaplandı. Enzimin NADPH substratı için KM değeri 22,97 µM, Vmax değeri 0,17 EÜ/ml ve urasil substratı için KM değeri 17,46 µM, Vmax değeri 0,14 EÜ/ml olarak bulundu. Ayrıca essitalopram, fluoksetin, mirtazapin, haloperidal antidepresan ve propofol, 2,6-di-tert-bütilfenol, 2,6-dimetilfenol, lidokain anestezik moleküllerin enzim üzerine in vitro etkileri araştırıldı. Buna ilaveten enzim aktivitesi üzerine Ag+, Cu+2, Ni+2, Zn+2, Co+2, Fe+3, Cr+2, Cd+2 ve Pb+2 gibi metal iyonlarının in vitro etkileri incelendi. Bütün etken molekülleri ve metal iyonları için IC50 değerleri hesaplandı.

Özet (Çeviri)

In this study, dihydropyrimidine dehydrogenase enzyme (DPD) was in first purified from sheep liver with a yield of 16.7% and 402.7 purification fold. DEAE ion exchange and 2′,5′-ADP Sepharose 4B affinity chromatography were used for purification procedures. In order to check the purity of moleculer mass of DPD, SDS-polyacrylamide gel electrophoresis was performed and a single band was observed. Molecular mass the enzyme was 111 kDa for sheep liver DPD. Within the framework of kinetic studies on the enzymes; optimum pH, ionic strength, optimum temprature and stable pH were performed and calculated as 8.0, 0.9 mM, 50°C, 7,5 respectively. Km and Vmax values for the NADPH substrat for enzyme were found as 22,97 µM, 0,17 EÜ/mL respectively. 17,46 µM, 0,14 EÜ/mL for the uracil substrat of the enzyme. Also, in vitro effects of antidepressant molecules including of escitalopram, fluoxetine, mirtazapine, haloperidal antidepressant molecules and anesthetic molecules including of propofol, 2,6-di-tert-butylphenol, 2,6-dimethylphenol, lidocaine on the enzyme were investiged. In addition, in vitro effects of Ag+, Cu2+, Ni2+, Zn2+, Co2+, Fe3+, Cr2+, Cd2+ ve Pb2+ ions on the enzyme activity were determined. Also, IC50 values for each active molecule and metal ion were calculated.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    238045

    Bazı ilaçların sığır karaciğerinden saflaştırılan dihidropirimidin dehidrogenaz enzimi üzerine etkilerinin incelenmesi

    Investigation of some drugs effects on dihydropyrimidine dehydrogenase enzyme purified from bovin liver

    İMDAT AYGÜL

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2009

    BiyokimyaAtatürk Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MEHMET ÇİFTCİ

  2. Tez No

    80935

    5-fluorourasil tedavisi alan hastalarda dihidropirimidin dehidrogenaz eksikliği; klinik ve genetik olarak prevalans saptama çalışması

    Dihydropyrimidine dehydrogenase enzyme deficiency in patients receiving 5-fluorouracil treatment; clinical and genetic assessment of prevalence

    İSMAİL ÇELİK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1999

    OnkolojiHacettepe Üniversitesi

    Onkoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ŞEVKET RUACAN

  3. Tez No

    622404

    Dihidropirimidin dehidrogenaz gen polimorfizminin 5-fluorourasil kemoterapi ajanı alan kanser tanılı hastalarda gelişebilecek toksisiteler ile ilişkisi

    The relationship between dihydropyrimidine dehydrogenase gene polymorphism and toxicities in cancer patients receiving 5-fluorouracil

    TAHSİM YÜKSEL

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    GenetikHarran Üniversitesi

    İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ ÇİĞDEM CİNDOĞLU

  4. Tez No

    158244

    5-fluorourasil toksisitesinin farmakogenetik yönden araştırılması

    Investigation of 5-fluorouracil toxicity in respect of pharmacogenetics

    NAZAN YÜCE

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2004

    Eczacılık ve FarmakolojiAnkara Üniversitesi

    Farmasötik Toksikoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ.DR. SİNAN SÜZEN

  5. Tez No

    730430

    Kolorektal adenokarsinom hastalarında metastaz oluşumu ve terapiye yanıt farklılıklarındaki moleküler alt yapının araştırılması

    Investigation of molecular background differences in metastasis formation and therapeutic response in patients with colorectal adenocarcinoma

    MEHTAP ÇEVİK

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    BiyolojiMarmara Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. BELGİN SÜSLEYİCİ DUMAN

Geri Dön