Bazı flavonoid ve fenolik bileşiklerin antioksidan kapasitelerinin belirlenmesi ve insan eritrositlerinden saflaştırılan karbonik anhidraz ı ve ıı izoenzimleri üzerine in vitro, rat eritrositleri karbonik anhidraz enzimi üzerine in vivo etkilerinin araştırılması
Determination of antioxidant capacities of some flavonoids and phenolic compounds and investigation of effect in vitro on human erythrocytes carbonic anhydrase i and ii isoenzymes, their in vivo on rat erythrocytes carbonic anhydrase enzyme
- Tez No: 376289
- Danışmanlar: PROF. DR. ŞÜKRÜ BEYDEMİR
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2014
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Atatürk Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Biyokimya Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 241
Özet
Bu çalışmanın ilk bölümünde ticari olarak satın alınan bazı flavonoid ve fenolik yapıdaki bileşiklerden Malvin, Callistephin, Oenin, Pelargonin, Araşidonoil dopamin, ID-8, Silikristin, 3,4-Dihidroksi-5-metoksibenzoik asit ve 2,4,6-Trihidroksibenzaldehit maddelerinin antioksidan kapasitelerini belirlemek amacıyla Fe3+-TPTZ metodu ile Fe3+-Fe2+ indirgeme, kuprik iyonlarını (Cu2+) indirgeme, N-N'-Dimetil-fenilendiamin (DMPD) radikali giderme, 1,1-Difenil 2-pikril hidrazil (DPPH) serbest radikali giderme, 2-2'-Azino-bis(3-etilbenztiyazolin-6-sülfonik asit) (ABTS) radikali giderme, O2.- radikali giderme, ferrozin ve bipiridil reaktifi ile ferröz iyonlarını (Fe2+) şelatlama aktiviteleri ile birlikte ferrik tiyosiyanat metoduna göre total antioksidan aktivitesi çalışıldı. Metal şelatlama, indirgeme ve radikal giderme aktivitelerinin tamamında pozitif kontrol olarak standart antioksidanlar olarak bilinen BHA, BHT, α-Tokoferol ve Troloks kullanıldı. Çalışmanın ikinci bölümünde çalışılan maddelerin insan eritrositlerinden izole edilen hCA I ve II izoenzimleri üzerine in vitro inhibisyon etkileri araştırıldı. Bu amaçla önce Sepharose-4B-L-Trozin afinite kolon kromatografisi ile insan eritrositlerinden hCA I ve II izoenzimleri saflaştırıldı. Enzim saflığını kontrol etmek için SDS-PAGE yapıldı ve tek bant gözlendi. Çalışma kapsamındaki bütün maddelerin hCA I ve II izoenzimleri CO2-hidrataz ve esteraz aktiviteleri üzerine inhibisyon etkileri araştırıldı. Elde edilen Aktivite (%)-Konsantrasyon grafiklerinden her bir maddenin ayrı ayrı IC50 değerleri ile birlikte esteraz aktivitesi Ki değerleri hesaplandı. Son olarak fenolik bileşikler olan Araşidonoil dopamin, 3,4-Dihidroksi-5-metoksibenzoik asit ve 2,4,6-Trihidroksibenzaldehit maddelerinin rat eritrositleri total CA enzimi CO2-hidrataz aktivitesi üzerine inhibisyon etkisi araştırıldı ve elde edilen grafiklerden faydalanılarak yarılanma ömürleri (t50) hesaplandı. Bu çalışmada kullanılan bileşikler hCA I ve II izoenzimlerini in vitro olarak 2,23.10-3 ile 1055,00 µM aralığında IC50 değerleri ile inhibe etmiştir. Ayrıca çalıştığımız maddelerin birçoğu pozitif kontrol olarak kullandığımız BHA, BHT, α-Tokoferol ve Troloks'dan daha iyi antioksidan aktivite göstermiştir.
Özet (Çeviri)
In first part of study, the antioxidant activities of agents of Malvine, Callistephin, Oenin, Pelargonin, Arachidonoyl Dopamine, ID-8, Silychristine, 3,4-Dihydroxy-5-methoxybenzoic acid and 2,4,6-Trihydroxybenzaldehyde from compounds flavonoid and phenolic structure were using by antioxidant assays including ferrous ions (Fe3+) reducing capacity with Fe3+-TPTZ, Fe3+-Fe2+ reducing capacity, cupric ions (Cu2+) reduction capacity, N-N'-Dimethyl-phenylenediamine (DMPD) radical scavenging, 1,1-diphenyl 2-picryl hydrazyl (DPPH·) radical scavenging, 2,2'-azino-bis (3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) radical scavenging, O2•- radical scavenging, ferrous ions (Fe2+) chelating activities using by ferrozine and bipyridyl reagents and lastly total antioxidant activity by ferric thiocyanate method. İn all studies of metal chelating, reduction and radical scavenging activities as a positive control was used BHA, BHT, α-Tocopherol and Trolox that are known as standard antioxidants. The obtained results were compared with standard antioxidants. In second part of this study, studied substances were investigated in vitro inhibitory effects on hCA I and II isozymes isolated from human erythrocytes. For that purpose, the first was purified hCA I and II isoenzymes from human erythrocytes by using L-tyrosine-Sepharose-4B affinity column chromatography. To check the purity of the enzyme was performed SDS-PAGE and only one band was observed. The effects on CO2-hydratase and esterase activities of hCA I and II isozymes were investigated we tried in all the materials. Separately of each agent were calculated values of IC50 with levels of esterase activity Ki by using the obtained Activity (%) - Concentration graphics. Finally we use in this study and from sunbstances observing the in vitro inhibitory effect on hCA I and II isoenzymes activities were investigated of inhibitory effects on CO2-hydratase activity of rat erythrocytes total CA enzyme of Arachidonoyl Dopamine, 3,4-Dihydroxy-5-Methoxybenzoic Acid and 2,4,6-Trihydroxybenzaldehyde and benefiting from obtained graphics were calculated their in vivo half-lives (t50). The phenolic compounds, which used in this study inhibited hCA I and CA II isoenzymes at the range of 2,23.10-3-1055,00 µM as in vitro. Also, most of these compounds demostrated antioxidant activity more than that used positive controls such as BHA, BHT, α-Tokoferol and Trolox.
Benzer Tezler
- Characterization of Turkish bee products such as propolis, pollen and royal jelly in terms of bioactive components, health effects and encapsulation
Türkiye'ye ait arı sütü, propolis ve polen gibi arı ürünlerinin biyoaktif bileşenler, sağlık etkileri ve enkapsülasyonu açısından karakterizasyonu
ÜMİT ALTUNTAŞ
Doktora
İngilizce
2023
Gıda Mühendisliğiİstanbul Teknik ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. BERAAT ÖZÇELİK
- Endemik Salvia siirtica türünün sekonder metabolitlerinin izolasyonu ve biyolojik aktivitelerinin belirlenmesi
Isolation of secondary metabolites of the endemic Salvia siirtica species and determination of the biological activities
HİLAL SARUHAN FİDAN
- Bazı soya ürünlerinin antioksidan kapasitelerinin ve protein içeriklerinin belirlenmesi
Determination of antioxidant capacity and protein contents of some soy products
DİDEM TEKGEZER
- Bazı Achillea türleri üzerinde farmakognozik araştırmalar
Pharmacognosical studies on Achillea species
HANDAN GÖKBEN SEVİNDİK
Doktora
Türkçe
2015
Eczacılık ve FarmakolojiAtatürk ÜniversitesiFarmakognozi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ZÜHAL GÜVENALP
- Bazı abiyotik elisitörlerin nar (Punica granatum L.) kallus kültüründe fenolik biyosentezi ve antioksidan kapasite üzerine etkilerinin araştırılması
The investigation of effectiveness of some abiotic elicitors on phenolic biosynthesis and antioxidant capacity in pomegranate (Punica granatum L.) callus culture
ASLI NESLİHAN ÖZDEN