Lung microsomal p-nitrophenol hydroxylase-characterization and reconstitution of its activity
Başlık çevirisi mevcut değil.
- Tez No: 3961
- Danışmanlar: DOÇ. DR. EMEL ARINÇ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 1988
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Orta Doğu Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 57
Özet
ÖZET AKCİ?ER MICROZOMAL p-NITROFENOL HIDROKSİLAZ ENZİMİNİN KARAKTERİ ZASYONÜ VE AKTiViTESiNiN YENİDEN OLUŞTURULMASI AYDO?MUS, Aydan Yüksek Lisans Tezi, Biyokimya Tez Yöneticisi: Doç. Dr. Emel Arınç Eylül 1988 Benzen ve nitrobenzenden katekol oluşumu bu maddelerin karsinojenik aktivitelerine bağlandı. Karaciğerde, p- nitrobenzenin bir ara ürünü olan p-nitrofenol, ensimatik yoldan 4-nitrokatekole dönüşür. Bu çalışmada ilk olarak p-nitrofenolün, 4- nitrokatekole dönüşümünü katalize eden ve aktivitesi oldukça yüksek olan enzimin varlığı koyun akciğerinde tesbit edildi ve maksimum aktivite için optimum koşullar incelendi. Enzimin pH optimumu 6.8 olarak bulundu. p-Nitrofenol hidroksilasyon hızının 1 mi inkübasyon ortaminda 2 mg'a kadar çıkan protein miktarı ile doğru orantı vererek arttığı saptandı. Maksimum 4-nitrokatekol oluşum hızı, 0.25 roM p-nitrofenol konsantrasyonunda gözlendi. p-Nitrofenol hidroksilaz enziminin özgül aktivitesi akciğer mikrozomlarında 0.494 nmol 4-nitrökatekol/mg protein/dakika olarak bulundu. Lineweaver-Burk ve Eadie-Hofstee grafiklerinin eğri hatlı olduğu saptandı. Lineweaver-Burk grafiğinden K değerleri 11.6 mve 71.4 nM ve Eadie-Hofstee graf ilinden ise K değerleri 10.7 m ve 74.5 mM olmak üzere akciğer p-nitrofenol hidroksilaz enzimi için iki K değeri hesaplanmıştır.Bu grafiklerden elde m edilen eğriler, akciğer mikrozomlarmda, p-nitrofenolün orto hidroksilasyonunda rol oynayan iki ayrı enzimin veya iki ayrı konformasyonda bulunan bir enzimin varlığını düşündürmektedir Koyun akciğer p-nitrofenol hidroksilas aktivitesinin, çözünürleştirilmiş akciğer sitokrom P-450, MDPH-sitokrom P- 450 redüktaz ve sentetik lipit fosfatidil kolin dilauroyl bulunan bir ortamda yeniden oluşturulması ile, akciğer p- nitrofenol hidroksilaz enziminin karışık fonksiyonlu oksidazlar veya sitokrom P-450'ye bağımlı roonooksijenazlar olarak tanınan enzim sisteminin bir üyesi olduğu gösterildi. vi
Özet (Çeviri)
ABSTBACT LUNG MICROSOMAL p-NITROPHENOL HYDROXYLASE - CHARACTERIZATION AND RECONSTITDTION OF ITS ACTIVITY AYDO?MÜŞ, Aydan M. S in Biochemistry Supervisor: Assoc. Prof. Dr. Emel Armç September 1988 Formation of catechols from benzene and nitrobenzene have been implicated in the carcinogenic activity of these chemicals. In liver, p-nitrophenol, intermediate of p- nitrobenzene, is enzymatically converted to 4-nitrocatechol. First time in this study, the presence of a highly active enzyme catalyzing the formation of 4-nitrocatechol from p-nitrophenol was detected in lung microsomes. In addition the optimum conditions for sheep lung microsomal p- nitrophenol hydroxylase were established. The maximal activity was noted at pH 6.8. The rate of p-nitrophenol hydroxylation was linear up to 2 rog protein/ml of incubation mixture. The maximal rate of 4-nitrocatechol formation was observed with 0.25 mM p-nitrophenol. The average specific activity of lung p-nitrophenol hydroxylase was 0.494 nmoles 4-nitrocatechol formed/mg protein/min. The Lineweaver-Burk and Eadie-Hofstee plots were found to be curvilinear. Two different K values were calculated as 11.6 and 71.4 iaM from m Lineweaver-Burk plot and as 10.7 and 74.5 nM from Eadie- iiiHofstee plots. This suggested that there were either two forms of enzyme or two different enzymes participitating in ortho hydroxylation of p-nitrophenol in lung microsomes. Lung microsomal p-nitrophenol hydroxylase activity of sheep was reconstituted in the presence of purified lung microsomal cytochrome P-450, NADPH-cytochrome P-450 reductase and synthetic lipid, phosphatidylcholine dilauroyl, suggesting that lung p-nitrophenol hydroxylase is a member of the enzyme system known as microsomal mixed-function oxidases or cytochrome P-450 dependent microsomal monooxygenases. iv
Benzer Tezler
- Effects of pyridine on rabbit liver, kidney and lung microsomal cytochrome P450 dependent drug metabolizing enzymes
Piridinin tavşan karaciğer, böbrek ve akciğeri sitokrom p450'ye bağımlı, ilaçları metabolize eden mikrozomal enzimler üzerine etkileri
AYŞE MİNE GENÇLER
Yüksek Lisans
İngilizce
1995
BiyokimyaOrta Doğu Teknik ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
DOÇ.DR. ORHAN ADALI
PROF.DR. EMEL ARINÇ
- Effects of benzene on liver, kidney and lung CYP1A, CYP2B4, CYP2E1 and CYP3A6 mRNA, protein level, and drug metabolizing enzyme activities and toxicity in diabetic rabbits
Diyabetli tavşanlarda benzen?in karaciğer, böbrek ve akciğer CYP1A, CYP2B4, CYP2E1 ve CYP3A6 mRNA, protein seviyesi ve ilaç metabolize eden enzim aktiviteleri ve toksisite üzerine etkileri
ŞEVKİ ARSLAN
Doktora
İngilizce
2008
BiyokimyaOrta Doğu Teknik ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. EMEL ARINÇ
PROF. DR. ORHAN ADALI
- Cytochrome P450 dependent drug metabolism in diabetic rabbits
Diyabetik tavşanlarda sitokrom P450'ye bağımlı ilaç metebolizması
ŞEVKİ ARSLAN
Yüksek Lisans
İngilizce
2003
BiyokimyaOrta Doğu Teknik ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
PROF.DR. EMEL ARINÇ
PROF.DR. ORHAN ADALI
- In vivo interaction of carcinogenic acrylamide with Cytochrome P450 ısozymes and Phase II enzymes in rabbit liver, kidney and lung
Karsinojen akrilamidin tavşan karaciğer, böbrek ve akciğerinde Sitokrom P450 ve Faz 2 enzimleri ile in vivo etkileşimi
MİNE NUYAN
Yüksek Lisans
İngilizce
2008
BiyokimyaOrta Doğu Teknik ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. EMEL ARINÇ