TGF-β1 ile transfekte edilmiş pulpal kök hücre ve PRP uygulamasının kondrojenik diferensiasyon üzerine etkileri
Effects of TGF-β1 transfected pulpal stem cell and PRP application on chondrogenic differentiation
- Tez No: 408434
- Danışmanlar: DOÇ. DR. NÜKHET KÜTÜK
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoloji, Biyoteknoloji, Diş Hekimliği, Biology, Biotechnology, Dentistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2015
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Erciyes Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kök Hücre Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 100
Özet
Amaç: Bu çalışmanın amacı, TGF- β1 ve PRP' nin kök hücrelerin kondrogenezinde etkili bir kaynak olabileceği hipotezinden yola çıkılarak TGF-β1 geni ile transfekte edilmiş tavşan dental pulpa kök hücrelerinin ve normal/kondrojenik medyum üzerinde PRP uygulamasının kondrojenik farklılaşma üzerindeki etkilerini araştırmaktır. Gereç ve Yöntem: Tavşan diş pulpasından elde edilen MKH'ler akım sitometri, immün boyama, kantitatif Real Time PCR ve Farklılaşma testleri gibi analizlere tabi tutularak karakterize edildi. Hücreleri karakterize etmek için CD29, CD44 ve CD45 mezenkimal kök hücre belirteçleri kullanıldı. Çalışmamızda, tavşan diş pulpasından elde edilen kök hücrelere elektroporasyon yöntemi ile TGF-β1 geninin transfeksiyonu yapıldı. %10 konsantrasyonda inaktif PRP eklenmiş normal medyum, kondrojenik medyum ve normal+kondrojenik medyum ile oluşturulan deney gruplarında dental pulpa kök hücrelerinin kondrojenik farklılaşması incelendi. Deney grupları arasında kondrojenik farklılaşma açısından PCR verileri, transfeksiyon etkinliği ve hücre canlılığı istatistiksel olarak karşılaştırıldı. Bulgular: Dental pulpadan elde edilen kök hücrelerin CD29+, CD44+ ve CD45- oldukları akım sitometri, immünofloresan boyama, real time PCR ile tespit edildi. Ayrıca bu hücrelerin adipojenik ve osteojenik olarak farklılaştırıldıkları adipo red, alizarin red ve alkalen fosfataz pozitif boyanmaları ile gösterildi. TGF- β1 transfeksiyonu yapılan hücrelerde ve normal+kondrojenik medyuma PRP eklenen deney gruplarında SOX9, MM13, Aggrecan gen ekspresyonlarının çok erken günlerde arttığı ve kondrojenik farklılaşmada etkili olduğu tespit edildi. Deney gruplarında TGF- β1 transfekte hücreler ve PRP uygulanan hücrelerin safranin-O ve toludine blue ile ekstraselüler matrikslerinin pozitif boyandıkları tespit edildi. Gruplar arasında istatistiksel analizler sonucu anlamlı fark bulundu (p
Özet (Çeviri)
Aim: The aim of this study was to evaluate the effects of normal and chondrogenic medium with PRP on chondrogenic differantiation of dental pulp stem cells (DPSCs) that are transfected with TGF-β1 gene, based on the hypothesis of TGF- β1 and PRP can be effective on the chondrogenesis of stem cells. Materials and Methods: MSCs that were derived from rabbit dental pulp were characterized by using flow cytometry, immunofleurosan staining, cantitative Real Time PCR, and differantiation tests. For the characterization, CD29, CD44 and CD45 mesenchymal cell markers were used. Stem cells from the rabbit dental pulp were transfected with TGF-β1 gene using electroporation technique. Chondrogenic differantiation of dental pulp stem cells were evaluated in experimental groups in which normal medium with 10% inactive PRP, chondrogenic medium, and normal+chondrogenic medium were used. PCR data, transfection efficiency, and cell viability of different groups were analyzed statistically. Results: CD29+,CD44+ ve CD45- dental pulp stem cells were confirmed by using flow cytometry, immunofleurosan staining, and cantitative Real Time PCR. Adipgenic and osteogenic differantiation of these cells were shown with adipo red, alizin red, and alkalyn phosphatase positive staining. The expression of SOX9, MM13 and Aggrecan genes increased earlier in TGF-β1 transfected cells, and in normal+chondrogenic medium with PRP, and these groups were effective in chondrogenic differantiation. The extracellular matrix of the cells which were transfected with TGF-β1, and which were subjected to PRP were positively stained with saphranin O and toluidine blue. Statistically significant difference was found between groups (p
Benzer Tezler
- İn vivo kıkırdak onarımı üzerine TGF-β1 transfekte edilmiş dental pulpa kaynaklı mezenkimal kök hücrenin etkisi
Effect of TGF- β1 transfected dental pulpa derived mesenshymal stem cells on in vivo cartilage regeneration
BETÜL TEKİN
Yüksek Lisans
Türkçe
2018
Histoloji ve EmbriyolojiErciyes ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SAİM ÖZDAMAR
- Kolon kanseri hücreleri üzerine timokinon ve 5-fluorouracilin terapotik etkisinin in vitro ve in vivo araştırılması
In vitro and in vivo investigation of the therapeutic effect of thymoquinone and 5-fluorouracil on colon cancer cells
ERAY METİN GÜLER
Doktora
Türkçe
2019
BiyokimyaBezm-i Alem Vakıf ÜniversitesiTıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ABDÜRRAHİM KOÇYİĞİT
- SARS cov 2 spike protein mrna'sının farklı hücre hatlarında oluşturacağı immün yanıtın genomik ve proteomik olarak araştırılması
Genomic and proteomic investigation of the immune response of sars COV 2 spike protein mrna in different cell lines
HALE ÖKSÜZ
Doktora
Türkçe
2023
Tıbbi BiyolojiÇukurova ÜniversitesiTıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MEHMET BERTAN YILMAZ
- Meme kanseri olan hastalarda serum endokan düzeyi ile prognostik belirteçler arasındaki ilişki
The relationship between serum endocan level and prognostic indicators in patients with breast cancer
PINAR KOÇ GÜNASLAN
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2017
OnkolojiÇanakkale Onsekiz Mart Üniversitesiİç Hastalıkları Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. LOKMAN KORAL
- Association of single nucleotide polymorphisms with type 2 diabetes mellitus
Tek nükleotid polimorfizmlerinin tip 2 diyabet ile ilişkilendirilmesi
GİZEM DOĞAN
Yüksek Lisans
İngilizce
2020
BiyomühendislikYıldız Teknik ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. DİLEK BALIK