Keçi ve manda sütü laktoperoksidaz enziminin bazı sülfanilamid türevleri kullanılarak afinite tekniği ile saflaştırılması
Purification of lactoperoxidase enzyme from goat and buffalo milk by using affinity technique
- Tez No: 415305
- Danışmanlar: PROF. DR. HASAN ÖZDEMİR
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Kimya, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2015
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Atatürk Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Biyokimya Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 75
Özet
Laktoperoksidaz (LPO) enziminin inhibitörü olan 2-kloro-4-sülfamoyilanilin, 5-amino-1-naftalinsülfonamid, 4-amino-3-metil sülfonamid, 3-amino-4-kloro benzensülfonamid, 4-amino-6-kloro-1,3-benzendisülfonamid, 3,4-diamino-benzensulfonamid, 6-aminopiridin-3-sulfonamid, 4'-amino[1,1'-bifenil]-4-sulfonamid molekülleri enzimin saflaştırılmasında afinite kromatografisi ligandı olarak kullanıldı. Ligand moleküller ile CNBr ile aktive edilmiş Sepharose-4B-L-tirozin afinite jelleri sentezlendi. 2-kloro-4- sülfamoyilanilin afinite kolonundan keçi sütü LPO enzimi %35,24 verimle 417,7 kat saflaştırılırken manda sütü LPO enzimi %20,34 verimle 151,86 kat saflaştırıldı. 5-amino-1-naftalin sülfonamid kolonundan ise keçi sütü %5,45 verimle 350,18 kat saflaştırılırken, manda sütü %3,48 verimle 388,80 kat saflaştırıldı. Enzimlerin saflığı SDS-PAGE ile kontrol edildi ve tek bant bulundu (80 kDa). 5-amino-1-naftalin sülfonamid kolonundan saflaştırılan keçi sütü LPO için optimum pH: 5,5, optimum sıcaklık 70°C, Km değeri 1,44 mM ve Vmax değeri 0,09 EÜ/ml iken manda sütü LPO için optimum pH: 5,5, optimum sıcaklık 70°C, Km değeri 0,08 mM ve Vmax değeri 0,52 EÜ/ml olarak tespid edildi. 5-amino-1-naftalin sülfonamid kolunu için LPO'nun bağlanma kapasitesi 10°C'de pH:8,5 ve 0,35 M iyonik şiddet konsantrasyonunda 0,05 mg/g jel olarak belirlendi.
Özet (Çeviri)
Molecules which were 2-chloro-4-sulfamoilaniline, 5-amino-1-naphthalenesulfonamide, 3-amino-4-chlorobenzenesulfanilamide, 4-amino-3-methyl benzenesulfanilamide, 4-amino-6-chloro-1,3-benzenedisulfanilamide, 3,4-diamino-benzenesulfonamide, 6-aminopyridine-3-sulfonamide and 4'-amino [1,1'-biphenyl]-4-sulfonamide inhibitors of the Lactoperoxidase (LPO) enzyme using as affinity chromatography ligands to purification of enzyme. CNBr activated Sepharose 4B-L-tyrosine affinity columns were synthesized with these ligand molecules. As a result of purification steps through a column of 2-chloro-4-sülfamoilaniline LPO enzyme from goat and buffalo milk was purified respectively 417.7 fold with a yield of 35.24% and 151.86 fold with a yield of 20.34%. Using with 5-amino-1-naphthalenesulfonamide column goat and buffalo milk LPO enzyme was purified respectively 350.18 fold with a yield of 5.45% and 388.80 fold with a yield of 3.48%. The purities of the purified enzymes were checked by SDS-PAGE and one band was found (80 kDa). Goat milk LPO that purified from 5-amino-1-naphthalenesulfonamide column, optimum pH: 5.5, optimum temperature 70°C, Km value 1.44 mM and Vmax value 0.09 EU/ml while for buffalo milk LPO optimum pH: 5.5, optimum temperature 70°C, Km value 0.08 mM and Vmax value 0.52 EU/ml were determined. Binding capacity of LPO by 5-amino-1-naphthalenesulfonamide column was determined 0.05 mg/g gel at 10°C pH: 8.5 and at a concentration of 0.35 M ionic strength.
Benzer Tezler
- Sülfanilamid türevleri kullanılarak memeli sütlerinden laktoperoksidaz enziminin saflaştırılması
Purification of the lactoperoxidase enzyme with using sulfanilamide derivatives from mammalian milk
ZEYNEP KÖKSAL
- Manda ve keçi sütü ve ürünlerinde staphylococcus aureus izolasyonu ve enterotoksin genlerinin belirlenmesi
Isolation of staphylococcus aureus and determination of enterotoxin genes in buffalo and GOAT milk and products
MUSTAFA BİLGİN
Doktora
Türkçe
2022
Veteriner HekimliğiAtatürk ÜniversitesiGıda Hijyeni ve Teknolojisi (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MUSTAFA ATASEVER
- Farklı hayvan sütlerinde alfa s1-kazein, beta laktoglobulin ile bazı biyokimyasal ve mineral değerlerinin araştırılması
The investigation of alpha s1-casein, beta lactoglobulins, some biochemical and mineral levels in milks of different animals
TUĞÇE AYŞEN ŞENSOY
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
Beslenme ve DiyetetikOndokuz Mayıs ÜniversitesiVeteriner Biyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GÜLAY ÇİFTCİ
- Farklı sütlerden (inek, manda, keçi, deve) yapılan kefirlerin bazı kimyasal ve mikrobiyolojik özelliklerinin belirlenmesi
Determination of some chemical and microbiological properties of kefirs made from different milk (cow, water buffalo, goat, camel)
SEYEDYASHAR KHAZE HAGH
Yüksek Lisans
Türkçe
2018
Gıda Mühendisliğiİstanbul Aydın ÜniversitesiGıda Güvenliği Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ AYLA ÜNVER ALÇAY
- Manda sütü ve diğer süt karışımlarıyla üretilen kefirlerin bazı özelliklerinin belirlenmesi
Determination of some properties of kefir produced with buffalo milk and other milk mixtures
CANSU AKDAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2020
Gıda MühendisliğiEge ÜniversitesiSüt Teknolojisi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ÖZER KINIK