Gökkuşağı alabalık solungacından 6- fosfoglukonat dehidrogenaz enziminin saflaştırılması, karakterizasyonu ve bazı metal iyonlarının enzim aktivitesi üzerine etkilerinin incelenmesi
Investigatiuons on purification and characterization of 6 - phosphogluconate dehydrogenase from rainbow trout gills and inhibition effects of some metal ions on the enzyme activity
- Tez No: 415306
- Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. ALİ ATASEVER
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2015
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Atatürk Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Biyokimya Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 81
Özet
6-fosfoglukonat dehidrogenaz (6-PGD) (6-PGD; E.C. 1.1.1.44) enzimi Gökkuşağı Alabalığı solungacından saflaştırıldı. Saflaştırma işlemi homojenatın hazırlanması ve 2',5'ADP Sepharose 4B afinite kolon kromatografisi olmak üzere 2 basamakta gerçekleştirildi. 10,268 EÜ/mg spesifik aktivitesine sahip olan 6-PGD enzimi %40 verimle 401 kat saflaştırıldı. Enzim aktivitesi spektrofotometrik olarak 340 nm'de ölçüldü. Enzim için optimum pH değeri pH 8,0, optimum iyonik şiddet değeri 0,4 M, optimum sıcaklık değeri 50°C ve stabil pH değeri pH 8,0 bulunmuştur. NADP+ için KM değeri 0,89 µM ve Vmax değeri 0,331 EÜ/mL olarak; 6-PGA (6-fosfoglukonat) için KM değeri 0,16 mM ve Vmax değeri 1,52 EÜ/mL bulunmuştur. Ayrıca 6-PGD enzimi üzerine bazı metallerin inhibisyon etkileri incelendi ve Ki sabitleri hesaplandı. Metaller ve Ki sabitleri; Ag1 iyonu için 0,082±0,017, Fe3+ için 0,071±0,012, Hg2+ metali 0,0095±0,0007, Cu2+ için 0,028±0,004, Mn2+ 0,25±0,06, Mg2+ için 0,0037±0,00089, Zn2+ için 0,0031±0,0013, Ta1 için 0,023±0,005, Ni2+ için 0,019±0,003 ve Co2+ metal iyonu için 0,015±0,0019 olarak bulundu. En yüksek Ki değeri Fe3+ için 0,71±0,012 mM, en düşük Ki değeri ise 0,0031±0,0013 mM ile Zn2+ için bulunmuştur.
Özet (Çeviri)
The enzyme 6- phosphogluconate dehydrogenase (6-PGD) (6-PGD; E.C. 1.1.1.44) was purified from rainbow trout gills. Purification was performed in 2 steps: homogenate preparation and 2',5' ADP Sepharose 4B affinity chromatography. The enzyme 6-PGD with 10,268 EU/mg specific activity was purified at 401-fold with a yield of 40%. Enzyme activity was measured spectrophotometrically at 340 nm. The optimum pH, optimum ionic intensity, optimum temperature and stable pH for the enzyme were 8,0, 0,4 M, 50°C and 8,0, respectively. KM and Vmax values were determined as 0,89 µM and Vmax 0,331EÜ/mL for NADP+ and as 0,16 mM Vmax and 1,52 EU/mL for 6-PGA, respectively. Also, inhibition effects of some metals on 6-PGA and Ki values were determined. Ki values for the metals were determined as to be: Ag1 0,082±0,017 Hg2+ 0,071±0,012, Fe3+ 0,0095±0,0007, Mn2+ 0,028±0,004, Cu2+ 0,0037±0,00089, Mg2+ 0,25±0,06, Zn2+ 0,023±0,005, Ta1 0,0031±0,0013, Ni2+ 0,015±0,019, Co2+ 0,003±0,0019 respectively.
Benzer Tezler
- Gökkuşağı alabalık eti katkılı galeta
Rainbow trout meat added grissini
ÖMER KURNAZ
Yüksek Lisans
Türkçe
2022
Balıkçılık TeknolojisiKaradeniz Teknik ÜniversitesiBalıkçılık Teknolojisi Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SEVİM KÖSE
- Gökkuşağı alabalık (Oncorhynchus mykiss) eritrositlerinden 6-fosfoglukonat dehidrogenaz enziminin saflastırılması, karakterizasyonu ve bazı metallerin enzim aktivitesi üzerine etkilerinin incelenmesi
Purification and characterization of 6-phosphogluconate dehydrogenase (E.C. 1.1.1.44) enzyme from rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) erytrocyte and investigation of the effects of some metals on enzyme activity
AYŞEGÜL TARANCI
- Gökkuşağı alabalık (Oncorhynchus mykiss) filetosunda Listeria monocytogenes'in gelişimi üzerine vakum ve modifiye atmosferde ambalajlamanın etkisi
The effects of vacuum and modified atmosphere packaging on growth of Listeria monocytogenes in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) fillets
MEHTAP YILMAZ
Doktora
Türkçe
2004
Su ÜrünleriAtatürk ÜniversitesiSu Ürünleri Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. MAHMUT KOCAMAN
- Gökkuşağı alabalık (Oncorhynchus mykiss) karaciğer dokusundan glutatyon redüktaz enziminin saflaştırılması, karakterizasyonu ve bazı metallerin enzim aktivitesi üzerine inhibisyon etkilerinin incelenmesi
Purification and characterization of glutathione reductase enzyme from rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) liver tissue and investigation of the inhibition effects of some metals on enzyme activity
BİLGE TEKMAN
- Gökkuşağı alabalık (Oncorhynchus mykiss)'larının spesifik olmayan immun sistemi üzerine bazı geofit bitki ekstraktlarının etkilerinin incelenmesi
A research on effects of geophyte plant extracts on non-spesific immune systems of rainbow trout(Oncorhynchus mykiss)
TUBA KABAK
Yüksek Lisans
Türkçe
2009
Su ÜrünleriSüleyman Demirel ÜniversitesiSu Ürünleri Yetiştiriciliği Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. AYŞEGÜL KUBİLAY