Geri Dön

Kitin deasetilaz enziminin kısmi saflaştırılması ve karakterizasyonu

The partial purification and characterization of chitin deasetilase enzyme

PDF İndir

  1. Tez No: 415363
  2. Yazar: RAMAZAN KARAYILAN
  3. Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. HATİCE AYSUN MERCİMEK
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoloji, Biyoteknoloji, Mikrobiyoloji, Biology, Biotechnology, Microbiology
  6. Anahtar Kelimeler: Bacillus cereus, kitin deasetilaz, kısmi saflaştırma, karakterizasyon, Bacillus cereus, chitin deacetylase, partial purification, characterization
  7. Yıl: 2015
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Kilis 7 Aralık Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 73

Özet

Bu çalışmada, kitin polisakkaritinin kitosana biyodönüşümünü katalizleyen ekstraselüler kitin deasetilaz enziminin, Bacillus cereus suşundan kısmi saflaştırılması ve karakterizasyonu analiz edilmiştir. Kolloidal kitin içeren katı besiyerinde 30ºC'de bir hafta inkübasyonu takiben kolonisinin etrafında sarı zon gözlenerek seçilen bu izolat, VITEK identifikasyon sistemi ile tanımlanmıştır. Sıvı fermantasyon ortamında geliştirilen hücre kültürlerinin santrifujlenmesi ile elde edilen ham enzim preparatının spesifik aktivitesi 0,274 U/mg olarak belirlenmiştir. Kitin deasetilaz enziminin optimum aktivitesini 50°C ve pH 7.0'da gösterdiği ortaya konmuştur. Enzimin 50°C sıcaklıkta 20 dakika ön inkübasyonu sonrası aktivitenin %115'e kadar arttığı saptanmıştır. 5 mM konsantrasyonda asetik asit (%105), gliserol (%123), CoCl2 (%113), NaCl (%137) ve CaCl2 (%102)'ün enzim aktivitesini stimule ettiği, fakat EDTA (%81.12) ve TritonX-100 (%75.5)'ün ise inhibitör ajan olarak davrandığı gözlenmiştir. SDS, 2-merkaptaetanol, MgCl2 ve MnCl2 varlığında ise aktivitenin sırasıyla %97, %89, %64 ve %83 korunduğu belirlenmiştir. SDS-PAGE analizlerinde, kısmi saflaştırılmış ekstraselüler kitin deasetilaz enzimine ait 39 kDa moleküler ağırlığında tek protein bandı elde edilmiştir.

Özet (Çeviri)

In this study, the partial purification from Bacillus cereus strain and characterization of the extracellular chitin deacetylase enzyme, catalyzes the bioconversion of chitin polysaccharide to chitosan, were analyzed. Following the incubation period on solid media containing colloidal chitin at 30ºC for one week, this selected isolate by observing the yellow zone around the colony was identified by VITEK identification system. The specific activity of the obtained crude enzyme preparation by centrifugation of cell cultures were developed in the liquid fermentation medium was determined as 0,274 U/mg. The optimum activity of chitin deacetylase enzyme was emerged at 50°C and pH 7.0. After the pre-incubation of enzyme at 50°C for 20 min, its activity was detected to increase up to 115%. It was observed that acetic acid (%105), glycerol (%123), CoCl2 (%113), NaCl (%137) and CaCl2 (%102) in 5 mM concentrations stimulated its activity but EDTA (%81.12) and TritonX-100 (%75.5) behaved as the inhibitory agent. In the presence of SDS, 2-mercaptoethanol, MgCl2 and MnCl2, the activity was determined to protect %97, %89, %64 and %83, respectively. In SDS-PAGE analysis, single protein band in 39 kDa molecular weight belonging to the partially purified extracellular chitin deacetylase enzyme was obtained.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    387351

    Farklı yöntemlerle kitosan eldesi ve karakterizasyonu

    Synthesis and characterization of chitosan by different methods

    İLKAY KOÇER

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    Kimya MühendisliğiHacettepe Üniversitesi

    Kimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HÜLYA YAVUZ ERSAN

    YRD. DOÇ. DR. EDA ÇELİK AKDUR

  2. Tez No

    316234

    Anoxybacillus flavithermus WK1 AfCDA geninin klonlanması, ekspresyonu, saflaştırılması ve biyokimyasal karakteriasyonu

    Cloning, expression, purification and enzymatic characterization of AfCDA gene from Anoxybacillus flavitheermus WK1

    AYŞENUR EMİNOĞLU

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2012

    BiyokimyaRecep Tayyip Erdoğan Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. CEMAL SANDALLI

  3. Tez No

    768477

    Marmara denizi ve İzmit körfezi'nden alınan izolat örnekleriyle karides kabuğu atıklarından enzimatik kitosan eldesi ve hidrojel olarak kullanımı

    Enzymatic chitosan production from shrimp shells wastes with isolate samples from the sea of Marmara and Izmit gulf and its use as hydrogel

    ÇİSEL DİKKULAK BAYRAM

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    BiyoteknolojiGebze Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyokimya ve Genetik Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ YOSUN MATER

  4. Tez No

    481858

    Mikrobiyal kaynaklardan antimikrobiyal özellikte kitosan üretimi ve karakterizasyonun araştırılması

    Production and characterization of chitosan in antimicrobial properties from microbial sources

    İBRAHİM HALİL ÇELİK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2017

    BiyolojiKilis 7 Aralık Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. HATİCE AYSUN MERCİMEK TAKCI

  5. Tez No

    465058

    Patates böceği, leptinotarsa decemlineata, (Coleoptera: Chrysomelidae)'nın larva döneminde peritrofik matriks proteinlerinin belirlenmesi

    Identification of larval peritrophic matrix proteins of colorado potato beetle, leptinotarsa decemlineata, (Coleoptera: chrysomelidae)

    EMRE CANER

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2017

    ZiraatAnkara Üniversitesi

    Bitki Koruma Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. UMUT TOPRAK

Geri Dön