Genç ve yaşlı deri fibroblast hücrelerarası kuvvetlerinin, HP (high throughput) bioforce sistem ile, biyofiziksel ve ultrastrüktürel düzeyde değerlendirilmesi ve CTGF, colLA1, MMP1 gen ifadelerinin karşılaştırılması
Biophysical and ultrastructural evaluation of cellular forces between young and old dermal fibroblast using HP (high throughput) bioforce system and the comparision of gene expression of CTGF, COl1a1, MMP1
- Tez No: 427122
- Danışmanlar: DOÇ. DR. SEFA KIZILDAĞ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Genetik, Genetics
- Anahtar Kelimeler: Deri, Deri yaşlanması, Fibroblastlar, Gen ifadesi, Hücre yaşlanması, Hücreler, Skin, Skin aging, Fibroblasts, Gene expression, Cellular senescence, Cells
- Yıl: 2014
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Dokuz Eylül Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Tıbbi Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Mekanik tansiyon hücrelerde gen ifadesi, hücre metabolizması, hücresel tansiyon ve hücreler arasında tansiyon aktarımı gibi bir çok hücresel süreci etkilemektedir. HP Bioforce sistemi in vitro hücre kuvvetlerinin ölçümü için geliştirilen yeni bir teknolojidir. Bu sistem silikon ince membran üzerindeki hücre ya da doku tabakalarını mikrometre garalığında indükleyen küçük miktarlarda kuvvetler oluşturur. Thrombin endotelyal hücreler ve stres fiberlerinde tansiyonu, endotelyal hücre bariyer geçirgenliğini arttırdığı iyi bilinen bir enzimdir. Hücresel kuvvetlerin ölçümleri ile ilgili önceki çalışmalarda thrombin, hücre kontraktil tansiyonunu arttırıcı bir faktör olması sebebi ile bu çalışmalarda pozitif kontrol olarak kullanılmıştır. TGF-β ise doku yenilenmesi ve matriks formasyonundaki önemi sebebiyle sıklıkla çalışılan bir sitokinindir. TGF-β'nın ayrıca fibroblast kontraktilisini arttırdığı bilinen α-smooth muscle aktin (α-SMA) ifadesini de düzenlediği düşünülmektedir. Bu çalışmada HP Bioforce sistemi kullanılarak monolayer olarak kültive edilen yaşlı ve genç dermal fibroblastlar arasında thrombin, TGF β ve içeriği bilinmeyen beş farklı substansın uygulandığı monolayer yaşlı ve genç dermal fibroblast hücre grupları arasındaki hücresel kuvvetler ölçüldü. Çalışmanın ikinci aşamasında ise genç (18, 29 yaş) ve yaşlı (59, 73 yaş) dermal fibroblast hücre gruplarında ekspresyonu farklı olacağı düşünülen kollagenaz enzimi geni MMP1, kollajen tip 1 alfa proteinini sentezleyen COL1A1, bağ doku faktörü olan CTFG gen ekspresyonları gerçek zamanlı PCR tekniği ile incelenmiştir. Sonuçlara göre thrombin genç hücrelerde hücresel kuvvetleri TGF beta'nın ise yaşlı hücrelerde hücresel kuvvetleri önemli ölçüde arttırdığı sonucuna ulaşılmıştır. Yapılan gen ifadeleri çalışmalarında ΔΔCt formülü kullanılarak yapılan hesaplama sonucunda ise yaşlı hücrelere göre genç hücrelerde MMP1 gen ifadesinin 1,71 kat azaldığı, COL1A1 gen ifadesinin 1,89 kat arttığı ve CTGF gen ifadesinin 1,53 oranında azaldığı gözlenmiştir.
Özet (Çeviri)
Mechanical tension impacts a multitude of cellular processes including signal transduction, gene expression, cellular tension and cell tension transmission between cells, and cell metabolism. The HP Bioforce System is an innovative instrument used for measurement of the in vitro cell forces in thin film tissue constructs. This system creates the quantification of small forces and induces thin cell or tissue layers in μm – range. Thrombin is well-known to increase tension in endothelial cells and stress fibers, and increase endothelial cell barrier permeability. Thrombin is used as a positive control in previous studies since it is a biological factor known to stimulate cell contractile tension. TGF-β is an extensively studied cytokineon the basis of its importance in wound healing and matrix formation and possibly in regulating a-SMA expression. The first aim of this project was to find the differences in cellular forces between human young and old dermal fibroblasts without any application of substances and between human young and old dermal fibroblasts following application of thrombin (1U/mL), TGF beta (20 ng/mL) and five different substances, using HP-Bioforce screening system. The second aim of this project was to find the differences in the expression of MMP1, CTFG and COL1A1 genes which were considered to have different expressions between human dermal fibroblasts derived from young (18,29 years old) and elderly (59, 73 years old) donors, using Real Time PCR analysis system. Thrombin increases significantly the cell forces in young cells than old cells. On the contrary, TGF beta increases significantly the cell forces in old cells than young cells. The relative gene expressions were calculated by ΔΔCt formula and the results gained from the comparison of the young dermal skin cell lines and the old dermal skin cell lines demonstrated that there has been 1,71 -fold decrease in MMP1, 1,89-fold increase in COL1A1, 1,53-fold decrease in CTGF, respectively.
Benzer Tezler
- Deri yaşlanmasını önleyici biyoaktif ajanların verilmesinde organojelatörlerin kullanılması
Using organogelators as a delivery vehi̇cle for anti- skin aging bi̇oacti̇ve compounds
GÜLBAHAR AKGÜLER
- The role of oxidative stress factors in the pathophysiology of Ocular Rosacea, analysis of tears and other materials
Oküler Rosacea patofizyolojisinde oksidatif stres faktörlerinin rolü, gözyaşı ve diğer materyallerin analizi
NİLÜFER YEŞİLIRMAK
Doktora
İngilizce
2023
BiyokimyaGazi ÜniversitesiTıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. NESLİHAN BUKAN
PROF. DR. JEAN-LOUIS BOURGES
- İstanbul yöresinde kedi ve köpeklerde deri hastalıklarının insidansı
Incidence of skin diseases in cats and dogs around İstanbul
CENGİZ AKTAŞ
Yüksek Lisans
Türkçe
2013
Veteriner HekimliğiFırat ÜniversitesiVeterinerlik Cerrahisi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. İBRAHİM CANPOLAT
- Deri eki tümörü olgularının retrospektif analizi
Retrospective analysis of skin appendage tumor cases
SEÇKİN İLMAZ
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2023
Plastik ve Rekonstrüktif CerrahiManisa Celal Bayar ÜniversitesiPlastik Rekonstrüktif ve Estetik Cerrahi Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. MUSTAFA KÜRŞAT EVRENOS
- Bayramhacı, Tekgöz ve Yeşilhisar (Kayseri) sıcak ve mineralli sularının su kimyası ve izotopik yöntemlerle karşılaştırılması, tıbbi ve biyoiklimsel değerlendirilmesi
Comparision of Bayramhacı, Tekgöz and Yeşilhisar (Kayseri) thermal-mineral waters by using hydrochemical and isotopic methods, and medical and bioclimatical evaluation of the waters
YALÇIN ÖZEL
Yüksek Lisans
Türkçe
2007
Jeoloji MühendisliğiNiğde ÜniversitesiJeoloji Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MUSTAFA AFŞİN