Geri Dön

Normozoospermik infertil hastalardan farklı seçim yöntemleri ile elde edilen spermlerin immünohistokimyasal ve elektron mikroskobik incelenmesi

Immunohistochemical and Electron Microscopic Analysis of The Normozoospermic İnfertile Patients' Sperms Obtained By Different Selection Methods

PDF İndir

  1. Tez No: 482823
  2. Yazar: SEVİLAY ERİMŞAH
  3. Danışmanlar: PROF. DR. SÜHEYLA GONCA, PROF. DR. AYSEL KÜKNER
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Histoloji ve Embriyoloji, Histology and Embryology
  6. Anahtar Kelimeler: DNA, Kısırlık, Kısırlık-erkek, Mikroskopi-elektron, Serbest radikaller, Sperm, İmmünohistokimya, DNA, Infertility, Infertility-male, Microscopy-electron, Free radicals, Spermatozoa, Immunohistochemistry
  7. Yıl: 2017
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Kocaeli Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Amaç: Normozoospermik infertil hastalardan, swim up, density gradient ve mikro akışkan çip yıkama yöntemleri ile elde edilen spermlerin immünohistokimyasal ve elektron mikroskobik olarak incelemesi ve uygun yıkama yöntemin belirlenmesi amaçlandı. Yöntem: 20 normozoospermik infertil hastaya ait semen parametreleri değerlendirildi. Semen örnekleri, density gradient, swim up ve mikro akışkan çip yöntemleri için 4 eşit hacime ayrılarak gruplandı. Gruplara ait spermlere kromatin kondensasyon defektlerinin belirlenmesi için anilin ve toluidin mavisi boyamaları, sperm DNA fragmantasyonunun (SDF) belirlenmesi için TUNEL boyaması uygulandı. Hücre içi ROS seviyeleri flow sitometri ile ince yapı değerlendirmesi ise elektron mikroskobik olarak yapıldı. Bulgular: Konsantrasyon değerlendirmelerinde, swim up (45,65M/ml) ve mikro akışkan çip (46,90M/ml) yöntemleri ile benzer sayıda sperm elde edilirken, density gradient (55,55M/ml) yöntemi ile anlamlı olarak yüksek sayıda sperm elde edildi (P<0.0001). Mikro akışkan çip ile normal morfolojili (%19,45) ve ileri hareketli sperm oranı (%83,55) diğer yöntemlere göre anlamlı olarak yüksek bulundu (P<0.0001). Bununla beraber a sınıfı hareketteki artış da diğer yöntemlere göre mikro akışkan çip ile anlamlı olarak daha yüksek belirlendi (P<0.0001). Sperm kromatin kondensasyon defekti ve SDF yüzde oranı mikro akışkan çip yönteminde anlamlı olarak düşük bulundu (P<0.0001). Hücre içi ROS analizlerinde DCFH ile boyanan sperm sayısı mikro akışkan çip yönteminde anlamlı olarak en düşük (%7,45) hesaplandı (P<0.0001). Elektron mikroskobik olarak tüm yıkama yöntemlerinde, granüler kromatinin ve apopitozun azaldığı ayrıca density gradient yönteminde akrozomal düzensizliklerin daha sık olduğu görüldü. Sonuç: Bu çalışmanın sonuçları; aşılama tedavisinde mikro akışkan çip yönteminin, density gradient ve swim up yıkama yöntemlerine göre daha etkili bir yöntem olduğunu göstermektedir.

Özet (Çeviri)

Objective: In normozoospermic infertile patients, we aimed to investigate immunohistochemical and electron microscopic examination of sperm obtained by swim up, density gradient and microfluidic chip methods as well as to determine the ideal method. Method: Semen parameters of 20 normozoospermic infertile patients were evaluated. Each patient's semen was grouped into four equal volume, for density gradient, swim up and microfluidic chip method. Aniline and toluidine blue staining were used to identify chromatin condensation defects and TUNEL staining was used for sperm DNA fragmentation (SDF). ROS levels were determined by flow cytometry and fine structure evaluation by electron microscopy. Results: Evaluation of concentration, swim up (45.65M/ml) and micro fluid chip (46,90 M/mL) was achieved with a small number of similar and sperm density gradient (55,55M/mL) significantly higher number of sperm was obtained (P<0.0001). Microfluidic chip method was found to be significantly higher in normal morphology and motion evaluations (P<0.0001). However, the rate of increase of class a movement was significantly higher after microfluidic chip method (P<0.0001). Sperm chromatin condensation defect and SDF were found to be significantly lower in the microfluidic chip method (P<0.0001). In ROS analysis, the number of sperm stained with DCFH was calculated to be the lowest (7.45%) in the microfluidic chip method (P <0.0001). When the methods were examined by electron microscopy, it was seen that granular chromatin and apoptosis decreased and acrosomal irregularities were more frequent in the density gradient method. Conclusions: The results of this study show that sperm obtained by microfluidic chip method may be more effective at insemination treatment than density gradient and swim up methods.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    468899

    İnsan infertil erkek vakaların semen örneklerinde iyon kanal ekspresyonlarının araştırılması

    The investigation of ion channel expressions in semen samples of human infertile male cases

    SEDA ÖZAYDIN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2017

    ÜrolojiFırat Üniversitesi

    Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. EBRU ÖNALAN

  2. Tez No

    236718

    Erkek infertilitesinde semen parametreleri ile sperm kromozom anöploidi sıklığı ilişkisinin araştırılması

    Investigation of the association between semen parameters and sperm chromosome aneuploidy frequency in male infertility

    İLHUN ARAS

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2009

    ÜrolojiEskişehir Osmangazi Üniversitesi

    Üroloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. CAVİT CAN

  3. Tez No

    873276

    Astenozoospermik hastalarda sperm proteomik yapısı ve bu olgularda antioksidan gıda desteğinin spermin proteomik yapısına ve semen parametrelerine etkisi: plasebo kontrollü çift kör randomize çalışma

    Sperm proteomic profile in asthenozoospermic patients and the effect of antioxidant dietary support on sperm proteomic profile and semen parameters: a placebo-controlled double-blind randomized study

    NACİ BURAK ÇINAR

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    ÜrolojiKocaeli Üniversitesi

    Üroloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MUSTAFA MELİH ÇULHA

  4. Tez No

    508840

    Testiküler shear wave elastografinin sperm profilini değerlendirmedeki geçerliliği: infertilite şikayetli erkek popülasyondaki sperm analiz sonuçları ile testiküler arfı elastografi bulgularının karşılaştırılması

    The feasibility of testicular shear wave elastography in predicting sperm profile: the comparison of sperm analysis results with testicular arfi elastography findings in males with complaint of infertility

    ADEM YOKUŞ

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    Radyoloji ve Nükleer TıpYüzüncü Yıl Üniversitesi

    Radyoloji Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. ALPASLAN YAVUZ

  5. Tez No

    499231

    İdiyopatik ve idiyopatik olmayan astenozoospermik infertil hastalarda sperm DNA bütünlüğü ve oksidatif hasarın incelenmesi

    Examination of sperm dna integrity and oxidative damage in infertile patients with idiopathic and non-idiopathic asthenozoospermia

    ESRA FİDAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    Histoloji ve EmbriyolojiAbant İzzet Baysal Üniversitesi

    Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AYSEL KÜKNER

Geri Dön