Tavşan karaciğerinde GST enziminin saflaştırılması GST enzimi ile nitrozolu bleşiklerden dimetilnitrozaminle etkileşiminin in-vitro olarak incelenmesi
Purification of GST enzyme from rabbit liver and in vitro assay of GST enzyme with nitrosol compaund dimetilnitrozamine
- Tez No: 48430
- Danışmanlar: DOÇ.DR. SEVTAP BAKIR
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 1996
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Cumhuriyet Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 45
Özet
6. ÖZET Bu çalışmada detoksifikasyon işlemlerinde görev alan GST, tavşan karaciğerinden saflaştınlıp, enzim kinetikleri çalışıldı. Ayrıca doğayı kirletici bir kimyasal olan DMNA'nin GST enzimiyle etkileşimi incelendi. Enzim saflaştırma işlemlerinde tavşandan karaciğer dokusu alınıp, sırasıyla şu basamaklar uygulandı: 1- DEAE-selluloz kromatografi 2- Amonyum sülfat çöktürmesi 3- Dializ 1 4- CM-sellüloz kromatografi 5- Dializ 11 6- Hidroksiapatit kromatografi Buradan elde edilen numune, saf enzim kaynağı olarak kullanıldı. GST enzim aktivitesinin ölçülmesi için enzimin katalizlediği gultatyon ile 1-kloro 2,4-dinitrobenzen etkileşme tepkimesi spektrofbtometrik olarak incelendi. Saflaştırma işlemlerinin sonucunda başlangıçtaki spesifik aktiviteyi 29 kez artırıldı. GST enziminin Km değeri 600 uM, Vmax değerini 4.0 U/mg protein olarak bulundu.GST enzimini ile DMNA etkileşimi sonucunda Km ve Vmax değerleri sırasıyla: 2.5 mM DMNA ile Km değeri 600 uM, Vmax değeri 3.45 U/mg protein. 5.0 mM DMNA ile Km değeri 600 uM, Vmax değeri 2.86 U/mg protein. 10.0 mM DMNA ile Km değeri 600 uM, Vmax Değeri 2.04 U/mg protein Bu çalışmaların sonucunda DMNA'nin GST enzimini nonkompatatif olarak inhibe ettiği görüldü. 37
Özet (Çeviri)
7. ABSTRACT In this study, Glutathione S-transferase (GST) which plays major role in detoxification, was purified. Enzyme kinetics and interaction between GST and di- methyl-nitrozamine (DMNA) were investigated in rabbit liver. Rabbit liver has taken and followed processes were applied; 1- DEAE- cellulose chromatography 2- NH4S04 precipitation 3- Dialysis I 4- CM- cellulose chromatography 5- Dialysis II 6- Hydroxylapatite chromatography The sample was used as a pure GST source. GST activity was measured as an interaction reaction of GST with l-chloro-2-4-dinitrobenzene that catalyzed by GST using spectrophotometer specific activity of GST was improved by 29 fold with purification process. Km of GST enzyme's was 600 uM, while Vmax was 4 U/mg protein. Interaction experiments of GST with DMNA gave values that were; 600uM and 3.45 U/mg protein with 2.5mM DMNA, 600uM and 2.86 U/mg protein with 5mM DMNA, 600uM and 2.04 U/mg protein with lOmM DMNA, respectively. These experiments showed that GST was inhibited as a non-competitively by DMNA 38
Benzer Tezler
- Effects of acrylamide and resveratrol on rabbit liver and kidney antioxidant enzymes
Akrilamid ve resveratrolün tavşan karaciğer ve böbrek antioksidan enzimleri üzerine etkisi
ÇİĞDEM KALIN
Yüksek Lisans
İngilizce
2009
BiyolojiOrta Doğu Teknik ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. EMEL ARINÇ
YRD. DOÇ. DR. TÜLİN YANIK
- In vivo interaction of carcinogenic acrylamide with Cytochrome P450 ısozymes and Phase II enzymes in rabbit liver, kidney and lung
Karsinojen akrilamidin tavşan karaciğer, böbrek ve akciğerinde Sitokrom P450 ve Faz 2 enzimleri ile in vivo etkileşimi
MİNE NUYAN
Yüksek Lisans
İngilizce
2008
BiyokimyaOrta Doğu Teknik ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. EMEL ARINÇ
- Taurinin ateroskleroz oluşturulan tavşanların plazma ve dokularında lipit düzeyleri ve oksidatif stres üzerine etkisi
Başlık çevirisi yok
JALE BALKAN
- Aterosklerotik tavşanlarda fındık yağının lipit peroksidasyonu ve antioksidan sistem üzerine etkisi
The effect of hazelnut oil lipid peroxidation and antioxidant system in atherosclerotic rabbits
AYDAN HATİPOĞLU
- Effects of benzene on liver, kidney and lung CYP1A, CYP2B4, CYP2E1 and CYP3A6 mRNA, protein level, and drug metabolizing enzyme activities and toxicity in diabetic rabbits
Diyabetli tavşanlarda benzen?in karaciğer, böbrek ve akciğer CYP1A, CYP2B4, CYP2E1 ve CYP3A6 mRNA, protein seviyesi ve ilaç metabolize eden enzim aktiviteleri ve toksisite üzerine etkileri
ŞEVKİ ARSLAN
Doktora
İngilizce
2008
BiyokimyaOrta Doğu Teknik ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. EMEL ARINÇ
PROF. DR. ORHAN ADALI
