Geri Dön

İnsan akciğer kanser LC-3 hücre hatlarında TRPM5 iyon kanalının otofajik hücre ölümündeki rolünün araştırılması

The study of TRPM5 ion channel in the line of autofacial cell in lung cancer cell lines

PDF İndir

  1. Tez No: 489889
  2. Yazar: SİYAMİ AYDIN
  3. Danışmanlar: PROF. DR. AKIN ERASLAN BALCI
  4. Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
  5. Konular: Göğüs Kalp ve Damar Cerrahisi, Thoracic and Cardiovascular Surgery
  6. Anahtar Kelimeler: Akciğer kanseri, otofaji, TRPM5 iyon kanalları, Hücre kültürü, qRT-PCR, Lung cancer, Authophagy, TRPM5 ion channel, Cell Culture, qRT-PCR
  7. Yıl: 2017
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Fırat Üniversitesi
  10. Enstitü: Tıp Fakültesi
  11. Ana Bilim Dalı: Göğüs Cerrahisi Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 40

Özet

ÖZET Otofajik yollar, akciğer kanseri (LC) etiyopatojenezisine katkıda bulunurlar. Otofajinin anahtar düzenleyicisi olarak tanımlanan hücre içi kalsiyum seviyeleri, kalsiyum kanalları tarafından kontrol edilir. Geçici potansiyel metastatin 5'in (TRPM5) otofajik yollarda rolünün olup olmadığı bilinmemektedir. Bu çalışmada, akciğer kanseri A459 hücre hattındaki otofajik yol üzerinde, bir kalsiyum kanalı olan TRPM5'in rolünün araştırılması amaçlanmıştır. A459 %5 CO2, % 95 hava ile 37°C'de nemlendirilmiş bir inkubatörde % 5 fetal bovin serumu içeren RPMI-1640 ortamında oluşturuldu. A459 hücre dizisindeki TRPM5, siRNA aracılığıyla bloke edildi. A459 hücrelerinden RNA izolasyonu ise üçlü reaktif ile yürütüldü. Otofaji ile ilişkili genlerin mRNA ifade şekilleri kantitatif RT-PCR (qRT-PCR) ile gösterildi. Transient Receptor Potential Melastanin 5-siRNA grubundaki TRPM5 mRNA expresyon düzeyinin, kontrol grubuna göre anlamlı derecede azalmış olduğu görüldü. siRNA verimliliği ise qRT-PCR verileri kullanılarak % 83 olarak hesaplandı. Ayrıca, qRT-PCR sonuçları kontrol grubu ile karşılaştırıldığında TRPM5-siRNA grubunda, otofaji ile ilgili genler olan ATG3, ATG5, ATG10, ATG12, LC3A, LC3B, LAMP3BECLIN1, AMBRA1, ULKE3 seviyelerinde belirgin bir artış olduğu gösterildi. Transient Receptor Potential Melastanin 5-siRNA uygulaması, otofajik yollardaki genlerin ekspresyonunu açıkça arttırmaktadır. Bu veriler, TRPM5 supresyonunun, otofajik mekanizmaları harekete geçirebileceğini göstermiştir. Kanserde, otofajinin, hücrelerin hem sağkalımına hem de ölümüne yol açabilen iki farklı fonksiyon gösterebileceği tespit edilmiştir. TRPM5 ile ilişikili otofajın tespit edilmesi ile TRPM5 otofajisi hedef alınarak inhibisyon ya da aktivasyon yapılabilir. Bu durum, hücrelerin otofajik ölümüne yol açan kanser tedavilerinin geliştirilmesine katkıda bulunabilir.

Özet (Çeviri)

ABSTRACT THE STUDY OF TRPM5 ION CHANNEL IN THE LINE OF AUTOFACIAL CELL IN LUNG CANCER CELL LINES Autophagic pathways are contribute to lung cancer (LC) ethiopathogenesis. Intracellular calcium levels described as key regulator of autophagy are regulated by calcium channels. It is not known whether transient potential melastatin 5 (TRPM5) has a role in autophagic pathways. In this study, it is aimed to investigate the role of TRPM5, a calcium channel, on autophagic pathways in lung cancer A459 cell line. A459 cells were grown in RPMI-1640 medium containing 5% fetal bovine serum in a humidified incubator with 5% CO2 and 95% air at 37 °C. In A459 cell line, TRPM5 was blocked through siRNA. RNA isolation from A459 cells was conducted with Tri Reagent. mRNA expression profiles of genes related with autophagy was demonstrated by quantitative RT-PCR (qRT-PCR). Transient Receptor Potential Melastanin 5 mRNA expression level in TRPM5-siRNA group was demonstrate significiant decrease against to control group. siRNA efficiency was calculated as %83 using qRT-PCR data. In addition, qRT-PCR results demonstrated that compared with the control group there was a significant increase in autophagy related genes ATG3,ATG5, ATG10, ATG12, LC3A, LC3B, LAMP3 BECLIN1, AMBRA1, ULKE3 expression levels in TRPM5-siRNA group. Transient Receptor Potential Melastanin 5-siRNA application clearly increases the expression of genes involved in autophagic pathways. This data shows that TRPM5 suppression can activate autophagic mechanisms. In cancer it has also been determined that autophagy may show two different function in the way leading to both the survival and the death of the cell. Determining that autophagy is associated with TRPM5, by targeting TRPM5 autophagy can be inhibited or excessively increased so it may contribute to the development of cancer treatments leading to autophagic death of the cell.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    372037

    Determination of cytotoxic activities and biological features of osajin and pomiferin on the lung cancer cell lines A549 and H1299

    Osajin ve pomiferinin A549 ve H1299 insan akciğer kanseri hücre hatlarında sitotoksik aktivitelerin belirlenmesi ve biyolojik özellikleri

    SUHAIL BAYATI

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2014

    BiyolojiGaziantep Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MEHMET ÖZASLAN

    DOÇ. DR. İBRAHİM HALİL KILIÇ

  2. Tez No

    471620

    2-alkil/alkiloksi köprülü sübstitüebenzimidazol türevi bileşiklerin sentezi, yapılarının tayini ve antiproliferatif etkilerinin belirlenmesi çalışması

    Synthesis, structure characterization and investigation of antiproliferative activity of 2-ALKYL/alkyloxy linked substituted benzimidazole derivatives

    BÜŞRA GÜL ERTÜRK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2017

    Eczacılık ve FarmakolojiMersin Üniversitesi

    Farmasötik Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ÖZTEKİN ALGÜL

  3. Tez No

    648503

    Resveratrolün akciğer kanseri hücre hattında ısı şok proteini-90 ve asimetrik dimetil arjinin düzeylerine etkisi

    Effect of resveratrol on heat shock protein-90 and asymmetric dimethyl arginine levels in lung cancer cell line

    FATMA AKAT

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2020

    BiyokimyaSelçuk Üniversitesi

    Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HÜSAMETTİN VATANSEV

  4. Tez No

    285210

    Manyetik nanoparçacıklara bağlı 125I/131I işaretli dietilstilbestrol (DES) glukuronid'in sentezlenmesi, biyolojik etkinliğinin incelenmesi

    Synthesis of 125I/131I labeled diethylstilbestrol (DES) glucuronide conjugated magnetic nanoparticles, investigation of biological affinities

    TAYFUN YILMAZ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2010

    Radyoloji ve Nükleer TıpEge Üniversitesi

    Nükleer Bilimler Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. PERİHAN ÜNAK

  5. Tez No

    617420

    Ceratonia siliqua L. yaprak ekstresinin ve çeşitli biyoaktif bileşiklerinin insan akciğer kanseri (A549) hücre hattında otofaji ve apoptoz üzerinden antitümör aktivitelerinin araştırılması

    Investigation of antitumor activities of leaf extract and various bioactive compounds of Ceratonia siliqua L. through autophagy and apoptosis in human lung cancer(A549)cell line

    RUKİYE NUR ÜNSAL

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    Tıbbi BiyolojiErciyes Üniversitesi

    Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NEFİSE NALAN İMAMOĞLU ŞİRVANLI

Geri Dön