Determination of Saccharomyces cerevisiae resistant to PCM obtained by inverse metabolic strategy and trans-effect of its metabolites on PC3
Ters metabolizma yöntemi ile PCM'e dirençli Saccharomyces cerevisiae elde edilmesi ve metabolitlerinin PC3 üzerindeki etkisi
- Tez No: 492684
- Danışmanlar: PROF. DR. MEHMET ÇİFTCİ
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyoloji, Biyoteknoloji, Genetik, Biology, Biotechnology, Genetics
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2018
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Bingöl Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 84
Özet
Kanser, kaotik bir rahatsızlıktır, çünkü hücre çeşitliliği ve hücre içindeki yolakların çokluğu, basit ve kesin bir çözüm bulmayı zorlaştırır. Dahası, kansere karşı kesin bir çare bulmak için, metabolizmanın tamamını ayrıntılı olarak bilmek gerekiyor, ancak mevcut bilgi ve teknoloji seviyesi bunun için yeterli değil. Bu nedenle kanser benzeri hastalıklarla mücadele için alternatif yaklaşımlar gereklidir. Bu çalışmada amacımız doğal bir strateji olan evrimsel mühendislik yöntemi ile prostat kanser hücrelerinin kültürlendiği ortamda, kolayca büyüyebilen S. cerevisiae mutant suşu elde etmektir. Buna ek olarak, elde edilen mutant ve WT (doğal şuş) mayalar, DMEM ortamında kültürlenerek fermente besiyerileri elde edildi. Böylece bu fermente DMEM'lerin PC3 hücreleri üzerindeki karşı etkileri oksidatif hasar, hücre göçü, gen ifadesi ve hücre büyümesi gibi birkaç moleküler yöntemle değerlendirildi. Evrimsel mühendislik yaklaşımı, PCM ortamında (PC3 hücreleriyle kültürlenmiş DMEM) iyi büyüyemeyen WT maya popülasyonuna uygulanmıştır. Başlangıç popülasyonunda çeşitlilik oluşturmak için bir kimyasal mutajen olan EMS (Etil metansülfonat) rastgele mutasyon oluşturmak için kullanıldı. Genetik kararlık testleri kullanılarak, PCM'ye dirençli fenotip gösteren en iyi bireysel mutantlar belirlendi. Daha sonra, seçilen mutantlar ve WT, mayalanmış bir ortam elde etmek için logaritmik faza kadar ayrı ayrı DMEM'de büyütüldü. MY2, MP2 ve WT ile mayalanmış DMEM'lerin (WT-DM, MP-DM and MY-DM), PC3 hücreleri üzerindeki etkisini anlamak için oksidatif hasar, apoptotik indeks, hücre göçü ve gen ekspresyon testleri uygulandı. Mevcut çalışmaya göre, evrimsel mühendislikle elde edilen mutant mayaların PCM içindeki büyüme becerisi, WT'ye kıyasla, bariz olarak arttı. Bu çalışma ayrıca, WT-DM, MP-DM ve MY-DM'nin PC3 hücre kültüründe apoptozu indükleyerek hücre büyümesini önemli ölçüde azalttığını göstermiştir. Bununla birlikte, MY-DM; WT-DM ve MP-DM'den farklı olarak, PC3 hücrelerinde apoptozu teşvik etmek için birçok moleküler yolu aynı anda aktive etti. Örneğin artan ROS üretimi, azalan hücre göçü ve apoptotik gen ifadelerinin artan regülasyonu. Diğer yandan ise, MP-DM apoptotik indeksi artırırken, apoptotik gen ekspresyonunu azaltmıştır. Sonuç olarak, mevcut çalışmada PCM'de kısıtlı büyüyen WT yerine, MY2 ve MP2 mutantları başarılı bir şekilde elde edilmiştir. Ayrıca, WT-DM ve MP-DM, MY-DM'nin PC3 hücrelerinde apoptozu uyaran çeşitli etkili metabolitleri içerdiğini de gösterdi.
Özet (Çeviri)
Kanser, kaotik bir rahatsızlıktır, çünkü hücre çeşitliliği ve hücre içindeki yolakların çokluğu, basit ve kesin bir çözüm bulmayı zorlaştırır. Dahası, kansere karşı kesin bir çare bulmak için, metabolizmanın tamamını ayrıntılı olarak bilmek gerekiyor, ancak mevcut bilgi ve teknoloji seviyesi bunun için yeterli değil. Bu nedenle kanser benzeri hastalıklarla mücadele için alternatif yaklaşımlar gereklidir. Bu çalışmada amacımız doğal bir strateji olan evrimsel mühendislik yöntemi ile prostat kanser hücrelerinin kültürlendiği ortamda, kolayca büyüyebilen S. cerevisiae mutant suşu elde etmektir. Buna ek olarak, elde edilen mutant ve WT (doğal şuş) mayalar, DMEM ortamında kültürlenerek fermente besiyerileri elde edildi. Böylece bu fermente DMEM'lerin PC3 hücreleri üzerindeki karşı etkileri oksidatif hasar, hücre göçü, gen ifadesi ve hücre büyümesi gibi birkaç moleküler yöntemle değerlendirildi. Evrimsel mühendislik yaklaşımı, PCM ortamında (PC3 hücreleriyle kültürlenmiş DMEM) iyi büyüyemeyen WT maya popülasyonuna uygulanmıştır. Başlangıç popülasyonunda çeşitlilik oluşturmak için bir kimyasal mutajen olan EMS (Etil metansülfonat) rastgele mutasyon oluşturmak için kullanıldı. Genetik kararlık testleri kullanılarak, PCM'ye dirençli fenotip gösteren en iyi bireysel mutantlar belirlendi. Daha sonra, seçilen mutantlar ve WT, mayalanmış bir ortam elde etmek için logaritmik faza kadar ayrı ayrı DMEM'de büyütüldü. MY2, MP2 ve WT ile mayalanmış DMEM'lerin (WT-DM, MP-DM and MY-DM), PC3 hücreleri üzerindeki etkisini anlamak için oksidatif hasar, apoptotik indeks, hücre göçü ve gen ekspresyon testleri uygulandı. Mevcut çalışmaya göre, evrimsel mühendislikle elde edilen mutant mayaların PCM içindeki büyüme becerisi, WT'ye kıyasla, bariz olarak arttı. Bu çalışma ayrıca, WT-DM, MP-DM ve MY-DM'nin PC3 hücre kültüründe apoptozu indükleyerek hücre büyümesini önemli ölçüde azalttığını göstermiştir. Bununla birlikte, MY-DM; WT-DM ve MP-DM'den farklı olarak, PC3 hücrelerinde apoptozu teşvik etmek için birçok moleküler yolu aynı anda aktive etti. Örneğin artan ROS üretimi, azalan hücre göçü ve apoptotik gen ifadelerinin artan regülasyonu. Diğer yandan ise, MP-DM apoptotik indeksi artırırken, apoptotik gen ekspresyonunu azaltmıştır. Sonuç olarak, mevcut çalışmada PCM'de kısıtlı büyüyen WT yerine, MY2 ve MP2 mutantları başarılı bir şekilde elde edilmiştir. Ayrıca, WT-DM ve MP-DM, MY-DM'nin PC3 hücrelerinde apoptozu uyaran çeşitli etkili metabolitleri içerdiğini de gösterdi.
Benzer Tezler
- Çeşitli ticari kaynaklardan izole edilen saccharomyces cerevisiae var. boulardii'nin probiyotik özelliklerinin belirlenmesi ve dondurma üretiminde kullanımı
Determination of probiotic properties of saccharomyces cerevisiae var. boulardii isolated from various commercial sources and its use in ice cream production
HAMZA GÖKTAŞ
Doktora
Türkçe
2021
Gıda MühendisliğiYıldız Teknik ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. OSMAN SAĞDIÇ
DOÇ. DR. ENES DERTLİ
- Genomic analysis of freeze-thaw stress-resistant Saccharomyces cerevisiae
Donma-erime stresine dirençli Saccharomyces cerevisiae'nin genomik analizi
ÇAĞLA GÜNEY
Yüksek Lisans
İngilizce
2024
Biyolojiİstanbul Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ZEYNEP PETEK ÇAKAR
- Üzüm posasından biyoetanol üretiminin araştırılması
Investigation of bioethanol production from grape pomace
TUĞBA YAVUZ
Yüksek Lisans
Türkçe
2018
BiyomühendislikFırat ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ MEHMET KALENDER
- Probiyotik özellik gösteren bazı maya suşları ve laktik asit bakterilerinin etkileşimlerinin araştırılması
Investigation of the interaction between probiotic yeasts and lactic acid bacteria
HATİCE YILDIRAN
Doktora
Türkçe
2017
Gıda MühendisliğiSüleyman Demirel ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. AYNUR GÜL KARAHAN
DOÇ. DR. GÜLDEN BAŞYİĞİT KILIÇ
- Senecio vernalis Waldst. & Kit. bitkisinin doğal bileşenlerinin ekstraksiyonu ve biyolojik aktivitelerinin saptanması
Determination of the biological activities and extraction of natural components of Senecio vernalis Waldst. & Kit.
HAVVA KURT
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
BiyolojiMuş Alparslan ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. SEDAT BOZARI