Paulownia tomentosa'dan polifenol oksidaz enziminin saflaştırılması ve çeşitli bitki özütleri ile inhibisyonu
Purification of polyphenol oxidase enzyme from Paulownia tomentosa and inhibition by various plant extracts
- Tez No: 513588
- Danışmanlar: DOÇ. DR. GÜLNUR ARABACI
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2018
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Sakarya Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Biyokimya Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 136
Özet
Bu çalışmada, Paulownia tomentosa bitkisinden ekstrakte edilen polifenol oksidaz (PPO) enzimi Üçlü Faz Saflaştırma (ÜFS) yöntemine göre saflaştırılmış olup, PPO için uygun substratlar ve inhibitörlerle karakterize edilerek çeşitli bitki özütlerinin PPO enzimi üzerindeki inhibitör etkileri incelenmiştir. Enzimin substrat spesifikliğini belirlemek için monofenolik, difenolik ve trifenolik yapıdaki substratlardan başlıca pirokatekol, 4-metilkatekol, L-3,4-dihidroksifenilalanin (L-dopa), L-tirozin, guaikol, pirogallol ve o-dianisidin, pirokatekol, 4-metil katekol, pirogallol ve L-dopa substratları kullanılmıştır. PPO enziminin bu substratlar arasında 4-metil katekol substratına karşı etkinliği Km ve Vmaks değeri 2,17 mM ve 0,002 mM/dk olup optimum pH ve sıcaklık değerleri 7,0 ve 25°C ile en fazladır. Buna karşı enzim monofenollere herhangi bir aktivite göstermemiştir. İnhibitör olarak L-sistein, sodyum azide, L-askorbik asit ve tioüre kullanılmıştır. Yapılan çalışmalar sonucunda inhibitörler içerisinde en etkili inhibitör 0,567 mM'lık Ki değeriyle yarışmasız etkili inhibitör olarak L-sisteindir. İnhibitör çalışmalarına ilave olarak Kosova'dan temin edilen Cydonia oblogna, Punica granatum, Rosmarinus officinalis, Verbascum thapsus, Tanacetum vulgare, Momordica charantia, Solanum nigrum ve Datura stramonium bitkileri soxhlet cihazında metanol ile ekstrakte edilerek, bunların PPO enzimi üzerine etkileri 4-metil katekol substratı ile incelenmiştir. Bu bitkiler arasında Tanacetum vulgare ekstraktının 0,2 mg/ml'lık Ki değeriyle karışık inhibisyon şeklinde en etkili inhibitör etkisi gösterdiği tespit edilmiştir.
Özet (Çeviri)
In this study, the polyphenol oxidase (PPO) enzyme extracted from Paulownia tomentosa plant was purified by the Three-Phase Partitioning (TPP) method and the inhibitory effects on PPO enzyme activity of various plant extracts were investigated by characterizing the enzyme with suitable substrates and inhibitors of PPO. Substrates of monophenolic, difenolic and triphenolic substrates that are specific for the enzyme and substrates such as pyrocatechol, 4-methylcatechol, L-3,4-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA), L-tyrosine, guaicolol, pyrogallol and o-dianisidine have been used to determine the specificity of the enzyme. For each of these seven substrates, optimum conditions such as pH and temperature were determined and 4-methylcatechol was found to be one of the most suitable substrates with optimum pH 7,0 and temperature 250C respectively and Km and Vmax values for 4-methylcatechol were 2,17mM and 0,002mM/min. In contrast, the enzyme did not show any activity against monophenols. L-cysteine, sodium azide, L-ascorbic acid and thiourea were used as the inhibitors. The most effective was found to be L-cysteine which acted as a Non-competitive inhibitor with a Ki value of 0,567mM. In addition to the studies on inhibitors, the medical plants Verbascum thapsus, Tanacetum vulgare, Momordica charantia, Solanum nigrum and Datura stramonium harvested from Kosovo were extracted with methanol in a soxhlet apparatus and the effects of these extracts on the PPO enzyme were examined by 4-methyl catechol as a substrat. Among the plant extracts, the Tanacetum vulgare was found to be the most effective inhibitor in the form of mixed inhibition with Ki of 0.2 mg /ml.
Benzer Tezler
- Micropropagation of princess tree (Paulownia tomentosa steud)
Micropropagation of princess tree (Paulownia tomentosa steud)
GETALEW AYİZENGAW CHANA
Yüksek Lisans
İngilizce
2022
ZiraatEge ÜniversitesiTohumluk Bilimi ve Teknolojisi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. EFTAL DUZYAMAN
PROF. DR. ALİCİA AYERDI GOTOR
- Paulownia tomentosa Steud.'nın in vitro doku kültürü teknikleri kullanılarak çoğaltılması
Clonal propagation of Paulownia tomentosa Steud. by in vitro tissue culture techniques
TÜRKAN AYTEKİN
- Denizli'de yetişen Paulownia tomentosa Steud'nın fitokimyasal profilinin ve elektriksel iletkenliğinin belirlenmesi
Determination of the phytochemical profiles and electrical conductivity of Paulownia tomentosa Steud in Denizli
ÖZGE UĞUZ
- Paulownia doku kültürüne manyetik alanın etkisi
Effect of magnetic field on Paulownia tissue culture
ORKUN YAYCILI
Yüksek Lisans
Türkçe
2003
Biyolojiİstanbul ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. SEMA ALİKAMANOĞLU
- Paulownia ağacı odunundan ZnCl2 aktivasyonu ile aktifleştirilmiş karbon üretimi ve karakterizasyonu
Characterization of activated carbon prepared from Paulownia wood by ZnCl2 activation
NAİLE VURAL
Yüksek Lisans
Türkçe
2007
Kimya MühendisliğiEskişehir Osmangazi ÜniversitesiKimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
Y.DOÇ.DR. SAİT YORGUN