Geri Dön

Bitkisel kaynaklardan peroksidaz enziminin saflaştırılması ve rasemik hidroperoksidin enantiyo seçimli indirgenmesi

Purification of peroxidase enzyme from plant sources and enantioselective reduction of racemic hydroperoxide

  1. Tez No: 513889
  2. Yazar: RAMAZAN KALIN
  3. Danışmanlar: PROF. DR. HASAN ÖZDEMİR
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2018
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Atatürk Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Biyokimya Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: 110

Özet

Çalışmanın birinci bölümünde çeşitli bitki kaynaklarından (beyaz turp, kırmızı turp, alabaş turp, tatlı turp, japon turpu, kara lahana, mor lahana, kırmızı pancar, yer elması ve zencefil) hazırlanan peroksidaz homojenatları ile guaiakol varlığında rac-(1-hidroperoksietil)benzenin kinetik rezolüsyonu gerçekleştirildi. Reaksiyonların stereokimyasal sonuçları kiral OD kolunu kullanılarak HPLC ile belirlendi. Elde edilen sonuçlara göre oluşan (R)-alkollerin %60-92 ve (S)-hidroperoksidin ise %76-99 aralığında değişen ee değerlerine sahip oldukları tespit edildi. Çalışmanın ikinci kısmında peroksidaz enzimi alabaş turp (Brassica oleracea L. Var. Gongylodes) ve kara lahana kökünden (Brassica oleracea L. Var. Acephala) 4-aminobenzohidrazit molekülünün ligant olarak kullanıldığı afinite kromatografisi tekniği ile ilk kez saflaştırıldı. Saflaştırılan enzimlerin saflıkları ve molekül kütleleri SDS-PAGE yöntemiyle belirlendi. Alabaş turp ve kara lahana kökünden saflaştırılan peroksidaz enzimlerinin saflaştırma sonuçları ve molekül kütleleri sırasıyla alabaş turp için %35,7 verimle 257,4 kat ve 58,2 kDa, kara lahana kökü için ise %37,2 verimle 313,4 kat ve 73,4 kDa olarak bulundu. Saflaştırılan alabaş turp ve kara lahana kökü POD'lar için optimum pH, optimum iyonik şiddet, optimum sıcaklık, guaiakol ve H2O2 substratlarının Km ve Vmax değerleri tespit edildi. Son olarak saflaştırılan POD'lar üzerine ligant olarak kullanılan 4-aminobenzohidrazit molekülünün inhibisyon parametreleri belirlendi. Elde edilen sonuçlara göre IC50 değerleri alabaş turp POD için 507,1 µM kara lahana kökü POD için ise 476,7 µM olarak bulundu. Ki değerleri alabaş turp için 741,3±83 µM, kara lahana kökü için ise 342,3±74 µM olarak hesaplandı.

Özet (Çeviri)

In the first part of the work, kinetic resolution of rac-(1-hydroperoxideethyl)benzene in the presence of guaiacol was performed with peroxidase homogenates prepared from various plant sources (white radish, red radish, kohlrabi radish, sweet radish, japanese radish, black cabbage, purple cabbage, red beet, ground apple and ginger). The stereochemical results of the reactions were determined by HPLC using chiral OD column. According to the results, it was determined that (R)-alcohols have ee values ranging between 60-92% and also the same values ranges between 76-99% in (S)-hydroperoxide. In the second part of the study, the peroxidase enzyme was purified for the first time by affinity chromatography using the 4-aminobenzohydrazide molecule as a ligand from kohlrabi radish (Brassica oleracea L. Var Gongylodes) and black cabbage root (Brassica oleracea L. var Acephala). The purity of purified enzymes and molecular masses were determined by SDS-PAGE. The purification results and molecular masses of the peroxidase enzymes purified from kohlrabi radis and black cabbage root were found to be 257.4 times with a yield of 35.7% and 58.2 kDa for alabaş and 313.4 times with a yield of 37.2% and 73.4 kDa for black cabbage, respectively. Optimum pH, optimum ionic strength, optimum temperature, Km and Vmax values of guaiacol and H2O2 substrates were determined for purified kohlrabi radish and black cabbage root PODs. Finally, the inhibition parameters of the 4-aminobenzohydrazide molecule used as a ligand on purified PODs were determined. IC50 values were found to be 507.1 μM for kohlrabi radis POD and 476.7 μM for black cabbage root POD. Ki values were calculated as 741.3±83 μM for kohlrabi radish and 342.3±74 μM for black cabbage root.

Benzer Tezler

  1. Peroksidaz enziminin afinite kromatografisi ile bitkisel kaynaklardan saflaştırılması ve karakterizasyonu

    Purification and characterization of peroxidase enzyme from vegetable source by affinity chromatography

    BURCU SOMTÜRK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2013

    KimyaErciyes Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. NALAN ÖZDEMİR

  2. Bentonit ve bitkisel hammaddeler kullanılarak detoks formülasyonlarının geliştirilmesi

    Development of detox formulations using bentonite and herbal raw materials

    RANA TURGUT

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    Beslenme ve DiyetetikBezm-i Alem Vakıf Üniversitesi

    Farmakognozi ve Doğal Ürünler Kimyası Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MURAT KARTAL

  3. Polilaktik asit - soya yağı türevli polimer blendlerinin biyobozunurluk özelliklerinin incelenmesi

    Investigation of bi̇odegradability properties of pla- soybean oi̇l derivatives polymer blends

    ELVAN AKYOL

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    KimyaBülent Ecevit Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. BAKİ HAZER

  4. Ordu ilinden toplanan yabani ve yenilebilir mantar türlerinin antioksidan aktivitelerinin ve kolinesteraz, tirosinaz ve üreaz inhibisyon potansiyellerinin belirlenmesi

    Determination of antioxidant activities and cholinesterase, tyrosinase and urease inhibition potentials of wild and edible mushroom species from Ordu province

    FİGEN AKSU

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    KimyaOrdu Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ MELEK ÇOL AYVAZ

  5. Önemli zeytin (Olea europaea L.) çeşitlerinin izoenzim polimorfizmleri ve genetik özellikleri

    Isoenzyme polymorphisms and genetic characteristics of important olive (Olea europaea L.) cultivars and types

    SEVDA DÜLGER

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2004

    ZiraatÇanakkale Onsekiz Mart Üniversitesi

    Bahçe Bitkileri Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. MURAT ŞEKER