Use of tissue transglutaminase ( variant 2 )-transduced mesenchymal stem cells in cartilage tissue engineering
Doku transglutaminaz ( varyant 2 ) ile transdüklenmiş mezenkimal kök hücrelerin kıkırdak doku mühendisliğinde kullanılması
- Tez No: 514742
- Danışmanlar: PROF. DR. GAMZE KÖSE
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyomühendislik, Biyoteknoloji, Genetik, Bioengineering, Biotechnology, Genetics
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2018
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Yeditepe Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 163
Özet
Gelişmekte olan teknolojinin yan etkilerinden doğan obezite gibi hastalıklar yüzünden oluşan ciddi eklem kıkırdağı hasarları her geçen gün bireyler arasında artış göstermektedir. Kıkırdak dokusu, kan damarları ihtiva etmemesinden dolayı, kendi kendini yenileyememekte ve bu sebeple doku hasarlarının tedavisinde kıkırdak doku mühendisliğinin önemi gittikçe artmaktadır. Bu çalışmada, doku-transglutaminaz (varyant 2) ile transdüklenmiş sıçan kemik iliği kaynaklı mezenkimal kök hücreleri (sKİMKH) kullanılarak kıkırdak doku yenilenmesi amaçlanmıştır. Bunun için hücreler doku-transglutaminaz-varyant 2 (TGM2_v2) geni ile transdüklendikten sonra, poli(bütilen süksinat) (PBSu) ve poli-L-laktit (PLLA) karışımı iskeleler üzerinde büyütülüp, farklılaştırılmıştır. Oluşan yapılar taramalı elektron mikroskobu ve MTS analizi ile sırasıyla topografik ve hücre canlılığı bakımından karakterize edilmiş ve ardından üç hafta boyunca kondrojenik farklılaşma testlerine tabi tutulmuşlardır. Kondrojenik matriks depolanmasını gözlemlemek için Alsiyan mavisi boyaması ve immünboyama; kıkırdağa özgü genlerin ifadesini incelemek içinse eş zamanlı-polimeraz zincir reaksiyonu yapılmıştır. Sonuç olarak, transdüklenmiş hücrelerin TGM2_v2'yi hem gen hem protein düzeyinde başarılı bir şekilde ifade ettikleri ve iskeleler üzerinde depolayabildikleri gözlenmiştir. Bu hücreler aynı zamanda kıkırdağa özgü proteinleri, herhangi bir kondrojenik indüksiyon olmadan kendiliğinden üretebilmişlerdir. Benzer bir şekilde, eş zamanlı-polimeraz zincir reaksiyonu sonucunda TGM2_v2 transdüksiyonunun hücrelere kendiliğinden kıkırdağa farklılaşma potansiyeli sağladığı görülmüştür. Özetle, TGM2_v2 ile transdüklenmiş sKİMKHler ve PBSu:PLLA ile oluşturulmuş olan bu yapı, gelecekte yapılacak olan kıkırdak doku mühendisliği çalışmalarında kullanmak üzere göz önünde bulundurulmalıdır.
Özet (Çeviri)
Articular cartilage defects are increasing among the individuals because of the side-effects of the developing technology, such as obesity that causes serious joint degeneration. Since cartilage is incapable of self-healing upon severe degeneration due to the lack of blood vessels, cartilage tissue engineering is gaining importance in the treatment of cartilage defects. This study was designed to improve cartilage tissue regeneration by expressing tissue transglutaminase variant 2 (TGM2_v2) in mesenchymal stem cells (MSC) derived from bone marrow of rats (rBMSCs). For this purpose, MSCs transduced with TGM2_v2 were grown and differentiated on three-dimensional poly(butylene succinate) (PBSu) and poly-L-lactide (PLLA) blend scaffolds. The constructs were characterized by scanning electron microscopy and MTS assay for the topographical analysis and cell viability, respectively. Chondrogenic differentiation analyses were performed throughout 3 weeks. Alcian Blue staining and immunofluorescence assay were carried out to observe the chondrogenic matrix deposition, while real-time PCR was performed to examine the expression levels of cartilage specific genes. It was demonstrated that the transduced cells could not only successfully express the short form TG2 (TG2-S), but also deposited the protein onto the scaffolds. In addition, they could spontaneously produce cartilage specific proteins without any chondrogenic induction, as shown by Alcian Blue staining and collagen type 2 and aggrecan immunofluorescence. Similarly, real-time PCR results suggested that TGM2_v2 expression provided the cells the ability of chondrogenic differentiation without addition of any differentiation factors. In conclusion, the TGM2_v2 gene transfer to MSCs could be taken into consideration in the future cartilage tissue engineering applications using PBSu:PLLA scaffolds.
Benzer Tezler
- Çölyak hastalığı olan çocuk ve adelosanlarda kemik mineral yoğunluğu, marsh skoru ve doku transglutaminaz düzeylerinin karşılaştırılması
Comparison of bone mineral density, tissue transglutaminase and marsh staging in adolescents and children with celiac disease
HALİL KOCAMAZ
Tıpta Yan Dal Uzmanlık
Türkçe
2012
GastroenterolojiFırat ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. YAŞAR DOĞAN
- İzole boy kısalığı yakınması ile getirilen çocuklarda glüten duyarlı enteropati sıklığı ve serolojik markerların tanısal değeri
The prevalence of gluten sensitif enteropathy in short stature children and the diagnostic value of serolgical markers
ÖZLEM NALBANTOĞLU
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2007
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıYüzüncü Yıl ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. YAŞAR CESUR
- Serum demiri ve vitamin B12 eksikliği olan bireylerde çölyak hastalığı insidansı ve endoskopik fice tekniği ile değerlendirilmesi
Frequency of celiac disease in patients who have combined low plasma iron and vitamin B12 deficiency and evaluation with magnified upper gastorintestinal system endoscopy and magnified fice techniques
SEVAL AKAY
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2016
İç HastalıklarıSağlık Bilimleri Üniversitesiİç Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HARUN AKAR
DOÇ. DR. ÖMER BURCAK BİNİCİER
- Çölyak hastalığı tanılı çocuklarda diyete uyumun D vitamini düzeyi üzerine etkileri
The effects of dietary adherence on vitamin D levels in children diagnosed with celiac disease
AYŞENUR AYDIN
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2025
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıSağlık Bilimleri ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ÖZLEM BEKEM
- Asemptomatik karaciger enzim yuksekligi olan hastalarda colyak hastaligi sikligi
The frequency of celiac disease in patients with asymptomatic liver enzyme elevation
MUSTAFA EMRE KOLUKISA
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2007
GastroenterolojiKırıkkale Üniversitesiİç Hastalıkları Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. SEFA GULITER