Geri Dön

Farklı sıcaklıklarda in vitro olgunlaştırılan sığır oositlerinde ısı şok proteini 70'in belirlenmesi

Determination of heat shock protein 70 in bovine oocytes matured different culture temperatures in vitro

PDF İndir

  1. Tez No: 516651
  2. Yazar: LEYLA BENER
  3. Danışmanlar: PROF. DR. MEHMET KURAN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoteknoloji, Biotechnology
  6. Anahtar Kelimeler: Oosit Olgunlaştırma, Kültür Sıcaklığı, Isı Şok Proteini 70, Western Blot, Oocyte Maturation, Culture Temprature. Heat Shock Protein 70, Western Blott
  7. Yıl: 2018
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Ondokuz Mayıs Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Tarımsal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 84

Özet

Bu çalışma, sığır oositlerinin in vitro olgunlaştırılmasında (IVM) uygulanan 36,5 °C ve 38,5 °C kültür sıcaklıklarının ısı şok protein 70 üzerine etkisini belirlemek amacıyla yapılmıştır. Çalışmada sığır kumulus oosit kompleksleri (KOK), % 10 fetal calf serum eklenmiş bikarbonat tamponlu medyum-199'da 36,5 °C veya 38,5°C de ve % 5 CO2 içeren içeren nemlendirilmiş ortamda 24 saat IVM'na bırakılmıştır. IVM sonunda KOK'lerinin olgunlaşmaları tam kumulus genişlemesine göre belirlenmiştir. Olgunlaşan KOK'ların kumulus hücreleri % 0,1 hyrulinidaz enzimi içeren hepes tamponlu TCM-199'da 10 dakika vortekslenerek uzaklaştırıldıktan sonra % 9,6'lık fosfat tamponlu tuz çözeltisinde (PBS) yıkanıp protein izolasyonuna geçilmiştir. Protein örneklerinin konsantrasyonunu arttırmak için örnekler 24 saat -80 °C'de dondurulduktan sonra liyofilizatörde 0.140 hPA basınç altında lyofilize edilip –20 °C'de depolanmıştır. Oositlerin 70 kDa ağırlıktaki proteinlerin seviyesi SDS- PAGE yöntemi ile belirlenmiştir. IVM'de uygulanan 36,5 °C (% 81,11) veya 38,5°C (% 84,41) inkübasyon sıcaklıkları arasında kumulus genişlemesi bakımından bir farklılık tespit edilmemiştir. Western blot sonucunda farklı sıcaklıklarda olgunlaştırılan sığır oositlerinin ısı şok 70 proteini bant görüntüsü elde edilemediğinden dolayı farklı inkübasyon sıcaklıklarının sığır oositlerinin ısı şok proteinin 70 üzerine olabilecek etkileri tespit edilememiştir.

Özet (Çeviri)

This study was conducted to determine the effect of 36,5 or 38,5 °C culture temperatures during vitro maturation (IVM) on heat shock protein 70 in cattle oocytes. In the study, bovine cumulus oocyte complexes (COC) were subjected to IVM in bicarbonate-buffered TCM–199 supplemented with 10% FCS for 22 hours with a humidified 5% CO2 in air at either 36,5 or 38,5 °C. Maturation of COCs was determined according to fully cumulus expansion at the end of in vitro maturation period. The cumulus cells of matured COCs were removed by vortexing in TCM-199 with hepes buffered TCM-199 containing 0,1% hyaluronidase enzyme, following washing in 9,6 % phosphate buffered saline solution for protein isolation. To increase the concentration of isolated protein samples, the samples were frozen at -80 °C for 24 hours and lyophilized at 0,140 hPa in lyophilizer, and stored at -20 °C. The level of 70 kDa proteins in oocytes was determined by SDS-PAGE method. There were no significant differences between 36,5 ° C (81,11%) or 38,5 ° C (84,41%) incubation temperatures in IVM in terms of full cumulus expansion. Since the heat shock 70 protein band image of bovine oocytes maturated at different temperatures could not be obtained after Western blot analysis, the effects of different incubation temperatures on bovine oocytes of heat shock protein 70 could not be determined. June 2018, 83

Benzer Tezler

  1. Tez No

    635272

    +4 °C ve +38 °C taşıma ve depolama sıcaklıklarında köpek oositlerinin in vitro olgunlaştırılmasına BSA ve FCS'nin etkileri

    Effects of BSA and FCs on in vitro maturation of bitch oocytes at transportation and storage temperatures of +4 Cº and +38 Cº

    MEHMET ÇETİNKAYA

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2020

    Veteriner HekimliğiBursa Uludağ Üniversitesi

    Dölerme ve Suni Tohumlama Ana Bilim Dalı​

    PROF. DR. HAKAN SAĞIRKAYA

  2. Tez No

    876782

    Koyunlarda in vitro oosit maturasyonu sırasında uygulanan melatonin hormonunun sıcaklık stresi üzerine etkisinin tüm genom ekspresyonu düzeyinde araştırılması

    Investigation of the effect of melatonin hormone on heat stress during in vitro oocyte maturation in sheep at the whole genome expression level

    AHMET AKTAR

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    BiyoteknolojiBursa Uludağ Üniversitesi

    Dölerme ve Suni Tohumlama Ana Bilim Dalı​

    PROF. DR. SELİM ALÇAY

  3. Tez No

    750679

    İn vitro koşullarda Cyclamen coum'da sentetik tohum üretimi ve kısa süreli depolama

    Synthetic seed production and short-term storage under in vitro conditions in Cyclamen coum

    CANSU KUZĞUN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    ZiraatVan Yüzüncü Yıl Üniversitesi

    Tarımsal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MEHTAP YILDIZ

    DR. ÖĞR. ÜYESİ METİN KOÇAK

  4. Tez No

    786133

    Farklı sıcaklıklarda çözdürülen boğa spermasının çözüm sonrası farklı periyotlarda spermatolojik parametrelerinin değerlendirilmesi

    Evaluation of the spermatological parameters of the bull sperm through different temperatures at different periods after thawing

    FATMA NUR ULUNÇ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    Veteriner HekimliğiOndokuz Mayıs Üniversitesi

    Dölerme ve Suni Tohumlama Ana Bilim Dalı​

    DOÇ. DR. MURAT SELÇUK

  5. Tez No

    794682

    Propofol ve midazolamın acinetobacteri baumannii üzerine antibakteriyel etkinliğinin invitro araştırılması

    In vitro investigation of antibacterial efficacy of propofol and midazolam on acinetobacteri baumannii

    SAVAŞ KAVAK

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    Anestezi ve ReanimasyonFırat Üniversitesi

    Anesteziyoloji ve Reanimasyon Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AZİZE BEŞTAŞ

Geri Dön