Hücre kültürü-temelli ekstraselüler matriksin doğal niş ve doku mühendisliği iskelesinde biyomimetik bileşen olarak etkinliğinin karşılaştırmalı olarak incelenmesi
Comparative efficacy evaluation cell culture-derived extracellular matrix as native niche and as biomimetic component in tissue engineering scaffold
- Tez No: 518975
- Danışmanlar: PROF. DR. YAŞAR MURAT ELÇİN
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyokimya, Biyomühendislik, Kimya, Biochemistry, Bioengineering, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2018
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ankara Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Biyokimya Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 151
Özet
Bu tez çalışmasının ilk aşamasında, insan somatik dermal fibroblast hücreleri, insan multipotent kemik iliği mezenkimal kök hücreleri ve insan uyarılmış pluripotent kök hücreleri kültürde çoğaltılıp moleküler ve immünfenotipik yöntemlerle tanımlandı. Daha sonra, bu üç farklı potansiyele sahip hücre tipini in vitro koşullarda deselülerize ekstraselüler matriks (ECM) elde etmek amacıyla deselülerizasyon protokolleri optimize edildi. Protokollerin etkinliği histokimyasal ve spektrofotometrik DNA içeriği analizleri ile belirlendi. Elde edilen üç farklı tipteki deselülerize ECM'nin morfolojik özellikleri, büyüme faktörleri bileşimleri, glikozaminoglikan bileşimleri ve protein içerikleri ayrıntılı olarak incelendi. Dermal fibroblast hücrelerinin ECM'ler üzerine tohumlanması sonrasında morfolojik davranışları, canlılıkları ve çoğalma yeteneklerindeki değişimler ele alındı. Son aşamada, elde edilen farklı tipteki ECM'leri içeren üç-boyutlu (3B) doku iskeleleri elektroeğirme tekniği kullanılarak hazırlanıp karakterize edildi. Geliştirilen 3B nanofiberlerin hücreler üzerindeki etkileri in vitro koşullarda eş-zamanlı sitotoksisite ve elektron mikroskobu analizleri ile incelendi. Elde edilen sonuçlarda farklı potense sahip hücrelerden ECM eldesine yönelik NH4OH/Triton X-100'ün kullanılabileceği belirlendi. Bu sayede kültürde çoğaltılan hücrelerin çekirdeklerinin ve bulundurdukları DNA'nın önemli düzeyde uzaklaştırılabildiği ve aynı zamanda sGAG, büyüme faktörleri ve ECM proteinlerinin deselülerize hücre kültürü temelli ECM'lerde korunabildiği belirlendi. Farklı potensteki hücrelerden toplanan ECM'lerin in vitro kültür çalışmalarında ve 3B doku iskeleleri için biyoaktif bileşen olarak kullanılabileceği ve ayrıca somatik hücre davranışlarının deselülerize ECM'ler ile düzenlenebileceği bu tez çalışması ile belirlendi.
Özet (Çeviri)
In the first part of this thesis study, human somatic dermal fibroblasts, multipotent bone marrow mesenchymal stem cells and induced pluripotent stem cells were cultured and identified by molecular and immunophenotypical methods. Decellularization protocols were optimized in order to obtain the extracellular matrix (ECM) in vitro from these three different cell types with different potencies. The efficiencies of the protocols were determined by histochemistry and spectrophotometric DNA content analyses. The three different types of the decellularized ECMs were examined for their morphological characteristics, growth factor contents, glycosaminoglycan contents and protein contents. Changes in morphological behaviour, cell viability and the proliferation capacity of dermal fibroblasts seeded on different types of ECMs were determined. Finally, three-dimensional (3D) scaffolds containing three different types of ECMs were fabricated by the electrospinning technique and then were characterized. The in vitro effects of the 3D nanofibers on the cells were examined by simultaneous cytotoxicity and electron microscopy analyses in detail. Findings showed that NH4OH/Triton X-100 could be efficiently used for the isolation of ECMs from the cells with different potencies. It was found that the DNA content and cell nuclei could be removed from the cells, while at the same time preserving the sGAGs, growth factors and ECM proteins in the cell culture-derived ECMs to a significant extent by decellularization. This thesis study clearly showed that the ECMs collected from different types of cells could be used as a bioactive component in in vitro culture studies, as well as in 3D tissue scaffold applications, and that somatic cell behaviour could be regulated by decellularized ECMs.
Benzer Tezler
- Ekstraselüler matriksin hücre yaşlanması üzerindeki etkisinin hücre kültürü temelli modelle değerlendirilmesi
Evaluation of the effects of extracellular matrix on cellular aging using a cell culture-based model
DİLARA YAŞAROĞLU
Yüksek Lisans
Türkçe
2024
Tıbbi Biyolojiİstanbul Üniversitesi-CerrahpaşaTıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MÜJGAN CENGİZ
- Aktive trombositten zengin plazmanın testis organoidlerinde In Vitro spermatogeneze etkisi
The effect of activated platelet rich plasma on In Vitro spermatogenesis in testis organoids
MERVE BULUT
Yüksek Lisans
Türkçe
2024
Histoloji ve EmbriyolojiTokat Gaziosmanpaşa ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ NİLGÜN YERSAL
- Adipoz kök hücreden farklılaştırılmış kondrositlerin aljinat temelli mikrokürelerde enkapsülasyonu
Encapsulation of chondrogenically differentiated adipose derived stem cells in alginate based microspheres
MURAT PARLAK
Yüksek Lisans
Türkçe
2018
BiyomühendislikKırıkkale ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MUSTAFA TÜRK
- Hayvansal hücre/hücresel ürün üretimi için sıcaklık duyarlı mikrotaşıyıcıların sentezi ve karakterizasyonu
Synthesis and characterization of thermoresponsive microcarriers for the production of animal cells/cellular products
HEDİYE ÖZGEN TİMUÇİN
Yüksek Lisans
Türkçe
2011
Kimya MühendisliğiHacettepe ÜniversitesiKimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MENEMŞE GÜMÜŞDERELİOĞLU
- Poly(L-Lactic acid) (PLLA)-based meniscus tissue engineering
Poli(L-laktik asit) (PLLA)-temelli menisküs doku mühendisliği
GÖKHAN BAHÇECİOĞLU
Yüksek Lisans
İngilizce
2011
BiyoteknolojiOrta Doğu Teknik ÜniversitesiBiyoteknoloji Bölümü
PROF. DR. NESRİN HASIRCI
PROF. DR. VASIF HASIRCI