Geri Dön

Bir grup oksidatif stres biyogöstergesinin eş zamanlı tayini için izokratik ve gradient HPLC yöntemlerinin geliştirilmesi ve analitik yöntem geçerliliği çalışmaları

Isocratic and gradient HPLC method development and analytical method validation studies for the simultaneous determination of A group of oxidative stress biomarkers

PDF İndir

  1. Tez No: 531327
  2. Yazar: AYŞE ŞENGÜL
  3. Danışmanlar: PROF. DR. MUSTAFA EMRAH KILINÇ
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Kimya, Chemistry
  6. Anahtar Kelimeler: 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine (8OHdG), 2'-deoxyuridine (2dU), 2'-deoxyadenosine (2dA), 2'-deoxycytidine (2dC), 5-hydroxymethyluracil (5HMU), HPLC, LC-MS/MS, LC-MS
  7. Yıl: 2018
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Ege Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Analitik Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 142

Özet

Birçok patofizyolojik olgunun temelinde yatan önemli sebeplerden olan oksidatif stresin tespiti ve izlenmesi için uzun yıllardır çalışmalar sürmektedir. Bu bağlamda analitik olarak ölçülebilecek deneysel değişkenler olarak özellikle oksidatif stres biyogöstergelerinin keşfi ve düşük derişim aralıklarında ve matriks ortamlarda tayinlerinin yapılması son yılların önemli çalışma konularındandır. Tez çalışmamız esnasında bir grup oksidatif stres biyogöstergenin eş zamanlı sıvı kromatografik tayini için yöntem geliştirilmiş ve geliştirilen yöntemin analitik yöntem geçerliliği çalışmaları ICH Q2(R1) kılavuzuna göre gerçekleştirilmiştir. Tayini gerçekleştirilen 6 adet biyogösterge 8-hidroksi-2'-deoksiguanozin (8OHdG); 2'-deoksiuridin (2dU); 2'-deoksiadenozin (2dA); 2'-deoksisitidin (2dC); 5-hidroksimetilurasil (5HMU) ve 3-nitrotrozin (3NLT)'dir. Geliştirilen 5 farklı HPLC yöntemi HPLC-DAD yöntemleri olup, gradient koşullarda, 40OC kolon sıcaklığında, 0,3-0,7mL/dakikalık akış hızı aralığında, 200-450nm aralığında DAD spektrumu kaydedilerek, analitik kolon olarak C18 Thermo Hypersil Gold, 100x2,1mm, 3µm partikül büyüklüğüne sahip kolon kullanılarak, mobil faz (MF) olarak MFB: metanol ve MFA: 10mM H3PO4 (pH 2,5) varlığında, 20µL enjeksiyon hacmi ve otomatik örnekleyiciye ait 5OC tepsi sıcaklığında tayinler gerçekleştirilmiştir. Geliştirilen her yöntemin gradient programı farklı olup optimum koşullar ayrıca saptanmıştır. Çalışılan biyogöstergelere ait standartların ekimi ile hazırlanan yapay vücut sıvılarına ait örneklerde kullanılmak üzere bir katı faz özütlemesi (solid phase extraction – SPE) yöntemi de AccuBOND II ODS-C18 SPE kartuşları kullanılarak geliştirilmiştir. Anahtar sözcükler : 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine, 8-hidroksi-2'- deoksiguanozin (8OHdG); 2'-deoxyuridine, 2'-deoksiuridin (2dU); 2'- deoxyadenosine, 2'-deoksiadenozin (2dA); 2'-deoxycytidine, 2'-deoksisitidin (2dC); 5-hydroxymethyluracil, 5-hidroksimetilurasil (5HMU); 3-nitrotyrosine, 3-nitrotrozin (3NLT); HPLC-DAD; method validation, yöntem geçerliliği.

Özet (Çeviri)

Studies are ongoing for decades for the determination and monitoring of oxidative stress, as one of the basic reasons of various pathophysiological phenomenons. Detection and quantification of oxidative stress biomarkers, as measurable analytical parameters, in low quantities in matrix environments is an important topic of the recent years. During our thesis studies methods were developed for the simultaneous liquid chromatographic determination of a group of oxidative stress biomarkers and analytical method validation studies of the developed methods were performed in accordance to the ICH Q2(R1) validation guidance. The biomarkers determined were 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine (8OHdG); 2'-deoksiuridin (2dU); 2'-deoxyadenosine (2dA); 2'-deoxycytidine (2dC); 5-hydroxymethyluracil (5HMU) and 3-nitrotyrosine (3NLT). The 5 different developed HPLC methods were HPLC-DAD methods in gradient conditions, assays were performed at 40OC coulumn temperature, in 0.3-0.7 mL/min flow rate range, by recording DAD spectrum in the range 200-450nm, by using C18 Thermo Hypersil Gold, 100x2,1mm, 3µm as the analytical column, mobile phases (MP) as; MPA: methanol and MPB: 10mM H3PO4 (pH 2.5), at 20µL loop volume and at 5OC rack temperature of the autosampler. Each developed method has its unique and optimized gradient programme. A solid phase extraction (SPE) method was also developed by using AccuBOND II ODS-C18 SPE cartidges for the quantifications done in the artificial body fluids prepared by spking desired amount of standards of the studied biomarkers.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    538805

    Talasemi hastalarında oksidatif stres ve eser element düzeylerinin araştırılması

    Effects of trace elements and oxidative stress levels in thalassemia patients

    ÇİĞDEM ÖZTÜRK

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    HematolojiMustafa Kemal Üniversitesi

    İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. EDİP UÇAR

  2. Tez No

    683428

    Bir grup Türk tip II diyabet hastalarında bazı gen varyasyonlarının (IL-1β, KCNJ11, TCF7L2) hastalık gelişimi üzerine olası etkilerinin irdelenmesi

    Ingestigation of possible effects of some gene variations (IL-1β, KCNJ11, TCF7L2) ) on disease development in A group of Turkish TYPE ii diabetes patients

    SAFİYE ARAZİ ERDEM

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    Eczacılık ve FarmakolojiAnkara Üniversitesi

    Toksikoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. İLKER ATEŞ

  3. Tez No

    683467

    Bir grup Türk tip II diyabet hastalarında bazı gen varyasyonlarının (TNF-α, PPARG, Calpain 10) hastalık gelişimi üzerine olası etkilerinin irdelenmesi

    Investigation of possible effects of some gene variations (TNF-α, PPARG, Calpain 10) on disease development in A group of Turkish type II diabetes patients

    CEREN ALBİNA KUŞ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    Eczacılık ve FarmakolojiAnkara Üniversitesi

    Toksikoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. İLKER ATEŞ

  4. Tez No

    857083

    Evaluation of the effect of hypothyroidism on inflammatory cytokines stimulation associated with oxidative stress in Iraqi patients

    Iraklı hastalarda hipotiroidizmin oksidatif stres ile ilişkili inflamatuar sitokin stimülasyonu üzerindeki etkisinin değerlendirilmesi

    MURTADHA HADI JAWAD ALBAYATI

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2024

    BiyokimyaÇankırı Karatekin Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. VOLKAN EYÜPOĞLU

    DR. ÖĞR. ÜYESİ NAWAL KHINTEEL JABBAR

  5. Tez No

    577798

    Yeni bir grup potansiyel anti-alzheimer etkili takrin-donepezil hibritleri üzerinde çalışmalar

    Studies on A group of novel tacrine-donepezil hybrids as anti-alzheimer compounds

    GÜLŞAH BAYRAKTAR

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    Eczacılık ve FarmakolojiEge Üniversitesi

    Farmasötik Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. VİLDAN ALPTÜZÜN

Geri Dön