Geri Dön

Bir grup oksidatif stres biyogöstergesinin eş zamanlı tayini için izokratik ve gradient HPLC yöntemlerinin geliştirilmesi ve analitik yöntem geçerliliği çalışmaları

Isocratic and gradient HPLC method development and analytical method validation studies for the simultaneous determination of A group of oxidative stress biomarkers

PDF İndir

  1. Tez No: 531327
  2. Yazar: AYŞE ŞENGÜL
  3. Danışmanlar: PROF. DR. MUSTAFA EMRAH KILINÇ
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Kimya, Chemistry
  6. Anahtar Kelimeler: 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine, 8-hidroksi-2'- deoksiguanozin (8OHdG), 2'-deoxyuridine, 2'-deoksiuridin (2dU), 2'- deoxyadenosine, 2'-deoksiadenozin (2dA), 2'-deoxycytidine, 2'-deoksisitidin (2dC), 5-hydroxymethyluracil, 5-hidroksimetilurasil (5HMU), 3-nitrotyrosine, 3-nitrotrozin (3NLT), HPLC-DAD, method validation, yöntem geçerliliği, 8-hidroksi deoksiguanozin, Analitik kimya, Analitik yöntem, Biyobelirteçler, Deoksiadenosinler, Hidroksimetil, Kromatografi-yüksek basınçlı-sıvı, Nitrotirozin, Oksidatif stres, Urasil kompleksleri, 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine (8OHdG), 2'-deoxyuridine (2dU), 2'-deoxyadenosine (2dA), 2'-deoxycytidine (2dC), 5-hydroxymethyluracil (5HMU), HPLC, LC-MS/MS, LC-MS, 8-hydroxy deoxyguanosine, Analytical chemistry, Analytical method, Biomarkers, Deoxyadenosines, Hydroxymethyl, Chromatography-high pressure-liquid, Nitrotyrosine, Oxidative stress, Uracil complexes
  7. Yıl: 2018
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Ege Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Analitik Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Birçok patofizyolojik olgunun temelinde yatan önemli sebeplerden olan oksidatif stresin tespiti ve izlenmesi için uzun yıllardır çalışmalar sürmektedir. Bu bağlamda analitik olarak ölçülebilecek deneysel değişkenler olarak özellikle oksidatif stres biyogöstergelerinin keşfi ve düşük derişim aralıklarında ve matriks ortamlarda tayinlerinin yapılması son yılların önemli çalışma konularındandır. Tez çalışmamız esnasında bir grup oksidatif stres biyogöstergenin eş zamanlı sıvı kromatografik tayini için yöntem geliştirilmiş ve geliştirilen yöntemin analitik yöntem geçerliliği çalışmaları ICH Q2(R1) kılavuzuna göre gerçekleştirilmiştir. Tayini gerçekleştirilen 6 adet biyogösterge 8-hidroksi-2'-deoksiguanozin (8OHdG); 2'-deoksiuridin (2dU); 2'-deoksiadenozin (2dA); 2'-deoksisitidin (2dC); 5-hidroksimetilurasil (5HMU) ve 3-nitrotrozin (3NLT)'dir. Geliştirilen 5 farklı HPLC yöntemi HPLC-DAD yöntemleri olup, gradient koşullarda, 40OC kolon sıcaklığında, 0,3-0,7mL/dakikalık akış hızı aralığında, 200-450nm aralığında DAD spektrumu kaydedilerek, analitik kolon olarak C18 Thermo Hypersil Gold, 100x2,1mm, 3µm partikül büyüklüğüne sahip kolon kullanılarak, mobil faz (MF) olarak MFB: metanol ve MFA: 10mM H3PO4 (pH 2,5) varlığında, 20µL enjeksiyon hacmi ve otomatik örnekleyiciye ait 5OC tepsi sıcaklığında tayinler gerçekleştirilmiştir. Geliştirilen her yöntemin gradient programı farklı olup optimum koşullar ayrıca saptanmıştır. Çalışılan biyogöstergelere ait standartların ekimi ile hazırlanan yapay vücut sıvılarına ait örneklerde kullanılmak üzere bir katı faz özütlemesi (solid phase extraction – SPE) yöntemi de AccuBOND II ODS-C18 SPE kartuşları kullanılarak geliştirilmiştir.

Özet (Çeviri)

Studies are ongoing for decades for the determination and monitoring of oxidative stress, as one of the basic reasons of various pathophysiological phenomenons. Detection and quantification of oxidative stress biomarkers, as measurable analytical parameters, in low quantities in matrix environments is an important topic of the recent years. During our thesis studies methods were developed for the simultaneous liquid chromatographic determination of a group of oxidative stress biomarkers and analytical method validation studies of the developed methods were performed in accordance to the ICH Q2(R1) validation guidance. The biomarkers determined were 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine (8OHdG); 2'-deoksiuridin (2dU); 2'-deoxyadenosine (2dA); 2'-deoxycytidine (2dC); 5-hydroxymethyluracil (5HMU) and 3-nitrotyrosine (3NLT). The 5 different developed HPLC methods were HPLC-DAD methods in gradient conditions, assays were performed at 40OC coulumn temperature, in 0.3-0.7 mL/min flow rate range, by recording DAD spectrum in the range 200-450nm, by using C18 Thermo Hypersil Gold, 100x2,1mm, 3µm as the analytical column, mobile phases (MP) as; MPA: methanol and MPB: 10mM H3PO4 (pH 2.5), at 20µL loop volume and at 5OC rack temperature of the autosampler. Each developed method has its unique and optimized gradient programme. A solid phase extraction (SPE) method was also developed by using AccuBOND II ODS-C18 SPE cartidges for the quantifications done in the artificial body fluids prepared by spking desired amount of standards of the studied biomarkers.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    591279

    İnsan mide adenokarsinoma hücrelerinde Helicobacter pylori'nin neden olduğu DNA çift sarmal kırıkları ve oksidatif strein değerlendirilmesi

    İnsan mide adenokarsinoma hücrelerinde Helicobacter pylori'nin neden olduğu DNA çift sarmal kiriklari ve oksidatif stresin değerlendirilmesi

    DİDEM ORAL

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    Eczacılık ve FarmakolojiHacettepe Üniversitesi

    Farmasötik Toksikoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ÜLFET PINAR ERKEKOĞLU

  2. Tez No

    619503

    Yaygın anksiyete bozukluğu olan hastalarda serum 8-0HDG, S100B, total oksidan ve total antioksidan düzeylerinin değerlendirilmesi

    Evaluation of serum 8-OHDG, s100b, total oxidant and total antioxidant parameters in patients with generalized anxiety disorder

    MELTEM GÖBELEK

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2020

    PsikiyatriHarran Üniversitesi

    Ruh Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MEHMET ASOĞLU

  3. Tez No

    771882

    Akut böbrek hasarında bir oksidatif stres biyomarkerı: Eritrosit içi glutatyon

    An oxidative stress biomarker in acute tissue injury: Intra-erythrocyte glutathione

    AHMET CANER KAHRAMAN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    Acil TıpAnkara Yıldırım Beyazıt Üniversitesi

    Acil Tıp Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ FATİH AHMET KAHRAMAN

    DR. ÖĞR. ÜYESİ MELİH ÇAMCI

  4. Tez No

    1011067

    ANDROGENETİK ALOPESİ HASTALARINDA SERUM 8-OH-DG DÜZEYLERİNİN OKSİDATİF STRES BİYOBELİRTECİ OLARAK DEĞERLENDİRİLMESİ: KLİNİK ŞİDDETLE VE KONTROLLERLE KARŞILAŞTIRMALI BİR ÇALIŞMA

    EVALUATION OF SERUM 8-OHDG LEVELS AS AN OXIDATIVE STRESS BIOMARKER IN PATIENTS WITH ANDROGENETIC ALOPECIA: A COMPARATIVE STUDY WITH CLINICAL SEVERITY AND CONTROLS

    İKRAM KEVSER ATİLLA

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2026

    DermatolojiSağlık Bilimleri Üniversitesi

    Deri ve Zührevi Hastalıklar Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ZAFER TÜRKOĞLU

  5. Tez No

    522553

    Bir sentetik kannabinoid olan JWH-018'in sıçanlarda hemodinami ve davranış üzerine etkisi

    Effect of a synthetic cannabinoid JWH-018 on hemodynamics and behavior in rats

    GİZEM ŞEN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    FizyolojiCelal Bayar Üniversitesi

    Fizyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NURAN EKERBİÇER

Geri Dön