Geri Dön

Bayır turpu (Armoracia rusticana) peroksidaz enziminin 3-aminobenzohidrazid türevleri kullanılarak afinitekromatografisi ile saflaştırılması

Purification of horseradish (Armoracia rusticana) peroxidase enzyme by afine chromatography using 3-amino benzohidrazide derivatives

  1. Tez No: 550529
  2. Yazar: NURGÜL ABUL
  3. Danışmanlar: PROF. DR. HASAN ÖZDEMİR
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Kimya, Chemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2019
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Atatürk Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Biyokimya Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: 85

Özet

Horseradish peroksidaz (HRP, E.C 1.11.1.7) sanayide, tıpta ve klinik tanılamada kullanılan önemli bir enzimdir. Bu tez kapsamında amino benzohidrazid molekülleri kullanılarak afinite kromatografisi tekniği ile bayır turpu (Armoracia rusticana) bitkisinden POD enziminin tek basamakta saflaştırılması için etkili ve yeni afinite ligantlarının belirlenmesi hedeflenmiştir. Bu amaçla 3-amino benzohidrazid türevi olan, 3-amino 5-kloro benzohidrazid, 3-amino 5-bromo benzohidrazid, 3-amino 4-metil benzohidrazid, 3-amino 4-nitro benzohidrazid moleküllerinin metilbenzoat formlarından hidrazin sentezleri yapıldı. Sentezlenen moleküllerin karekterizasyonu 1H-NMR ile doğrulandı. HRP enzimi üzerine inhibisyon etkileri incelendi. IC50 ve Ki değerleri belirlendi. Dönüşümlü inhibisyon gösteren moleküller Sepharose-4B-L-Tirozin jel materyaline bağlandı ve HRP enzimi %6,72 verimle ve 284,5 kat saflaştırıldı. Saflaştırma sonucunda elde edilen enzimler için SDS-PAGE yapıldı ve 47 kDa'da tek bant gözlendi. Kullanılma potansiyeli en yüksek olan Sepharose-4B-L-Tirozin-3-amino 4-nitro benzohidrazid afinite kolonu için pH:6, 20ºC, 0,4 M'da optimum bağlanma gözlendi.

Özet (Çeviri)

Horseradish peroxidase (HRP, E.C. 1.11.1.7) is an important enzyme used in industry, medicine and clinical diagnosis. In this thesis, it was aimed to determine the effective and novel affinity ligands for purifying the POD enzyme from the Horseradish (Armoracia rusticana) plant in a single step by affinity chromatography using amino benzohydrazide molecules. For this purpose, 3-amino 5-kloro benzohidrazide, 3-amino 5-bromo benzohidrazide, 3-amino 4-methyl benzohidrazide, 3-amino 4-nitro benzohidrazide, which are 3-amino benzohidrazide derivatives were synthesized from the mthylbenzoate forms. The characterization of the synthesized molecules was confirmed by 1H-NMR. The inhibition effects of these molecules on the HRP enzyme were investigated. IC50 and Ki values were determined. Molecules with reversible inhibition were bound to Sepharose-4B-L-Tyrosine material and the HRP enzyme was purified in %6,72 yield and 284,5 fold. SDS-PAGE was performed for enzymes obtained from purification step and single band was observed at 47 kDa. For the Sepharose-4B-L-Tyrosine-3-amino 4-nitro benzohydrazide affinity column, which had the highest potential, optimum binding at pH: 6, 20ºC, 0.4 M was observed.

Benzer Tezler

  1. 'Horseradish' peroksidaz (bayır turpu peroksidazı) (HRP) ve dekstran türevinin çevre kirletici boyalara etkisinin incelenmesi

    The effect of horseradish peroxidase (HRP) and its dextran derivative on environment pollutant dyes

    R. SELVA ÖNDER

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2008

    BiyokimyaYıldız Teknik Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HURİYE KUZU

  2. Armoracia rusticana G.Gaertn., B.Mey. & Scherb. (bayırturpu) bitkisinin çeşitli tarla ve depo mikrofunguslarına karşı antifungal etkinliğinin araştırılması

    Investigation of the antifungal effectiveness of Armoracia rusticana G.Gaertn., B.Mey. & Scherb. (horseradish) against various field and storage microfungi

    MOUSSA KIOURT

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    MikrobiyolojiTrakya Üniversitesi

    Biyoteknoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. HALİDE AYDOĞDU

  3. Preparation of multilayer capsules for enzymatic reactions

    Enzimatik tepklimeler için çok-katmanlı kapsüllerin hazırlanması

    CEMRE ALEMDAR

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2024

    KimyaOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. İREM EREL GÖKTEPE

  4. Farklı turp (Raphanus sativus L.) tiplerinin antioksidan kapasite ve biyoalınabilirliklerinin belirlenmesi

    Determination of antioxidant capacity and bioavailability ofdifferent types of radish

    MERVE SABUNCU

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    Gıda MühendisliğiBursa Uludağ Üniversitesi

    Gıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. YASEMİN ŞAHAN

  5. Lise öğrencilerinin sosyal medya bağımlılığının anksiyete, stres, depresif belirtilerle ilişkisinin çeşitli değişkenler açısından incelenmesi

    Investigation of the relationship between high school students' social media addiction and anxiety, stress and depressive symptoms in terms of various variables

    TOLGA BAYIR

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    Eğitim ve ÖğretimBayburt Üniversitesi

    Eğitim Bilimleri Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. GÜRKAN YILDIRIM