Geri Dön

İnsan protein disülfit izomeraz (hPD) enzim aktivitesinin in vitro mutasyon çalışmaları ile araştırılması

Başlık çevirisi mevcut değil.

  1. Tez No: 55374
  2. Yazar: GÜLİN GÜLER
  3. Danışmanlar: PROF.DR. EROL AKÖZ
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Biyoloji, Biology
  6. Anahtar Kelimeler: Enzimler, İn vitro, İzomerazlar, Enzymes, In vitro, Isomerases
  7. Yıl: 1996
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Hacettepe Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

IV ÖZET Bu tez çalışmasında hücrede protein katlanımını katalizleyen temel faktörlerden biri olan protein disülfit izomeraz (PDI) enziminin aktivitesi ve aktif merkezi arasındaki bağlantı in vitro mutasyon çalışmaları ile araştırıldı. In vitro mutasyon çalışmaları oligonükleotid ile yönlendirilen nokta mutasyonları şeklinde gerçekleştirildi. Enzimin aktif merkezlerinde (a/a' domeyinleri) bulunan ve diğer tüm oksidoredüktazlarda da mayadan insana kadar korunmuş CXXC motifindeki Histidin amino asiti, yine küçük bir oksidoredüktaz olan tiyoredoksin model alınarak Prolin amino asitine çevrildi. Sonuçda a domeyinin aktivite değeri 0.728 U/ mi, yabanıl tip aktivite değeri 1.424 U/ml olarak ölçüldü. Böylece a domeyinin aktivite değerinin yabanıl tipe oranla %50 düşüş gösterdiği bulundu. Bu değerler mutant a' domeyini için 0.285 U/ml ve yabanıl tip için 1.402 U/ml olarak ölçüldü, a' domeyininin ise yabanıl tipe oranla %80 aktivite düşüşü gösterdiği bulundu. Böylece aktif merkezdeki CXXC motifinde yer alan Histidin amino asitinin enzim aktivitesi üzerinde direkt etkili olduğu saptandı.

Özet (Çeviri)

ABSTRACT In this thesis, relationship between the activity and active site structure of protein disulfide isomerase which is one of the basic factor that catalyses protein folding in the cell was investigated by in vitro mutagenesis studies. For this porpose, in vitro mutagenesis studies was carried out as oligonucleotide directed point mutations. CXXC motif which is found not only in the active sites (a/a' domains) of this enzyme but also in all oxidoreductases is highly conserved in many organisms from yeast to human. Histidine amino acid of this sequence was converted to proline amino acid which is found in thioredoxin that is one of the small oxidoreductase as a model system. Mutant and wild type activities were measured by sRNAase assay. Consequently, mutant a domain and wild type a domain activities were measured and detected as 0.738 U/ml and 1.424 U/ml respectively. This result indicates to a 50 % decrease in a domain activity compared to wild type. On the other hand, a' domain activities of the mutant and wild type were also determined and was found that a' domain activity in this case decreased 80% accordingly to the wild type. As a result, it is a conclusion that histidine amino acid which is found in CXXC motif has a direct effect on the enzyme activity.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    767213

    Amiloid beta ile PDIA3 arasındaki ilişkinin nörona farklılaştırılmış SH-SY5Y hücrelerinde incelenmesi

    Investigation of the association between amyloid beta and PDIA3 in neuron differentiated SH-SY5Y cells

    İDİL YÜKSEKEL

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    Nörolojiİstanbul Üniversitesi-Cerrahpaşa

    Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ERDİNÇ DURSUN

  2. Tez No

    521377

    The ubiquitin/proteasome system related role of Bag-1L in breast cancer

    Bag-1L'in ubikuitin/proteazom sisteminde rolünün meme kanserinde incelenmesi

    SEVİLAY ACAR

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2018

    Genetikİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)

    DOÇ. DR. GİZEM DİNLER DOĞANAY

  3. Tez No

    834010

    Nitrosatif stres kökenli nörodejeneratif hastalıkların hücresel sinyal yolaklarının Arabidopsis thaliana kullanılarak araştırılması

    Investigation of cellular signaling pathways of nitrosative stress-induced neurodegenerative diseases by using of Arabidopsis thaliana

    AZİME GÖKÇE

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    BiyolojiEge Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AŞKIM HEDİYE ÇETİNEL

  4. Tez No

    316435

    Sarı pas enfeksiyonuna dirençli buğday (Triticum aestivum L.)'da proteomik analizler

    Proteomic analyses in yellow rust-resistant wheat (Triticum aestivum L.)

    CİHAN İNAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2012

    Biyolojiİstanbul Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    DR. SEMRA HASANÇEBİ

    PROF. DR. NAZLI ARDA

  5. Tez No

    623489

    Çocukluk çağı kronik böbrek hastalarının serumlarında YKL-40/kitinaz 3 benzeri protein 1 ile tiyol-disülfit homeostazının araştırılması

    Investigation of YKL-40/kitinase 3 similar protein 1 and thyol-disulphite homeostasis in the serums of childhood chronic kidney patients

    MELEK SENA TARAKÇIOĞLU

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2020

    BiyokimyaGaziantep Üniversitesi

    Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. SEYİTHAN TAYSI

Geri Dön