Kan-testis bariyerinin bozulduğu fare modelinde kromatin helikaz/atpaz DNA bağlanma protein 1 benzeri (CHD1L) proteininin ekspresyonunun değerlendirilmesi
Evaluation of expression of chromatin helicase/atpase DNA binding protein 1-like (CHD1L) protein in mouse model of disrupted blood-testis barrier
- Tez No: 571548
- Danışmanlar: PROF. DR. ÇİLER ÇELİK ÖZENCİ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Histoloji ve Embriyoloji, Histology and Embryology
- Anahtar Kelimeler: fare, testis, CHD1L, Sertoli hücresi, kan testis bariyeri, DNA bağlayıcı proteinler, Fareler, Gen ifadesi, Hayvan deneyleri, Kan, Kapiler geçirgenlik, Kromatin, Sertoli hücreleri, Spermatogenez, mouse, testis, CHD1L, Sertoli cell, blood testis barrier, DNA-binding proteins, Mice, Gene expression, Animal experimentation, Blood, Capillary permeability, Chromatin, Sertoli cells, Spermatogenesis
- Yıl: 2019
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Akdeniz Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Amaç: Kanser hücrelerinin, CHD1L aracılı MMP'lerin aktivasyonu ile invazyon sağladığı gösterilmiştir. Erkek üreme sisteminde ise; CHD1L'nin spermatogonyal kök hücrelerin hayatta kalmasını sağladığı bildirilmiştir. Amacımız, bozulmuş kan testis bariyerinde CHD1L ekspresyonunun araştırılmasıdır. Yöntem: Çalışmada 48 adet BALB/c ırkı yetişkin (5 haftalık) erkek fare kullanıldı. Kan testis bariyerinin (KTB) bozulması için farelere oral gavaj yolu ile MEHP (Mono-(2-Etilheksil Fitalat) 30mg/ml uygulandı. Taşıyıcı (mısır yağı) ve MEHP uygulanan gruplardan; 6., 12. ve 24. saatlerde testis dokuları elde edildi. Testis dokularına histopatolojik değerlendirme için PAS-H boyanması ve Johnsen skor değerlendirmesi yapıldı. β1-integrin protein ekspresyonu KTB bozulduğunu göstermek amacıyla western blot analiziyle değerlendirildi. İmmünohistokimya tekniği ile CHD1L, MMP-2, MMP-9 ve TIMP-2 protein ekspresyonu değerlendirildi. CHD1L protein ekspresyonu western blot analizi ile de değerlendirildi. 15P-1 fare Sertoli hücre hattında CHD1L ekspresyonu western blot analizi ile değerlendirildi. Verilerin dağılımına göre parametrik ya da parametrik olmayan testlerle uygun istatistiksel analizler yapıldı. Bulgular: MEHP uygulanan grupta histopatolojik değerlendirmeler ve β1-integrin protein ekspresyonu azalmasıyla KTB'nin bozulduğu gösterildi. KTB'nin bozulduğu modelde fare testisinde 6. ve 24. saatte CHD1L ekspresyonunun gruplar arasında benzer olduğu, 12. saatte MEHP grubunda ekspresyonunun anlamlı olarak arttığı gösterildi (p<0.05). KTB'nin bozulduğu testis dokusunda, 6., 12., ve 24. saatlerde MMP-2 ve MMP-9 ekspresyonlarının arttığı ve TIMP-2'nin ise azaldığı gösterildi. CHD1L ekspresyonunun sıçan ve insan testisinde; Sertoli ve germ hücrelerinde de olduğu ortaya kondu. Sadece Sertoli hücrelerindeki CHD1L ekspresyonu kültüre edilen Sertoli hücrelerinde ayrıca gösterildi. Sonuç: Çalışmamız; KTB'nin bozulduğu modelde CHD1L ekspresyonunu değerlendirmiştir ve bu durumda oluşan germ hücre kaybı ve neticesinde oluşan erkek infertilitesinin moleküler sebeplerini anlamak için temel bir çalışma niteliğindedir.
Özet (Çeviri)
Objective: Cancer cells have been shown to invade tissues by activation of MMPs after activation of the CHD1L-mediated signaling pathway. In the male reproductive system; CHD1L has been reported to promote the survival of spermatogonial stem cells. Our aim was to investigate the expression of CHD1L in the impaired blood testis barrier in mice. Method: 48 BALB/c adult male (5-week-old) mice were used in the study. 30mg/ml MEHP (Mono-(2-Ethylhexyl phthalate) was administered via oral gavage to induce blood testis barrier (BTB) distruption. Two groups were performed, vehicle and MEHP, to evaluate testis tissues at 6h, 12h, and 24h. PAS-H staining and Johnsen score were done for histopathological evaluations. β1-integrin protein expression was evaluated by western blot technique to confirm BTB distruption. CHD1L, MMP-2, MMP-9, and TIMP-2 protein expression was evaluated by immunohistochemistry. CHD1L protein expression was evaluated by western blot analysis in all groups. Expression of CHD1L in Sertoli cell line was also evaluated. Statistical analyses for parametric and non-parametric data were performed where appropriate. Results: Histopathological evaluations showed that BTB was impaired in MEHP group. CHD1L expression increased significantly in 12h group after BTB distruption (p<0.05). Expression of MMP-2 and MMP-9 increased whereas TIMP-2 expression decreased after BTB distruption. CHD1L protein expression was also confirmed in Sertoli and germ cells of rat and human testes. Expression of CHD1L was confirmed in cultured Sertoli cells only. Conclusion: In this study, expression of CHD1L was evaluated with in distrupted BTB model in mice. Possible roles of CHD1L in BTB regualtion/dysregulation which may lead to germ cell loss and male infertility needs further investigation.
Benzer Tezler
- Plasenta sferoid (mikro doku) modelinde vortioksetin etkisinin araştırılması
Investigation of the effect of vortioxetine on placental spheroid (micro tissue) model
SELEN SANİN
Yüksek Lisans
Türkçe
2021
BiyolojiHacettepe ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. AYSUN KILIÇ SÜLOĞLU
- Piroglutamil peptidlerin farelerde skopolaminle oluşturulmuş öğrenme-bellek bozukluğu üzerine etkisi
Effects of pyroglutamyl peptides on scopolamine induced learning-memory impairment in mice
İBRAHİM UYGUN
Yüksek Lisans
Türkçe
2022
Eczacılık ve FarmakolojiKocaeli ÜniversitesiFarmakoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. OĞUZ MUTLU
- Propiyonik asit ile deneysel olarak oluşturulan rat otizm modelinde mikroglia aktivasyonu, nöroenflamasyon ve nöronal kayıp varlıklarının değerlendirilmesi
Evaluation of microglia activation neuroinflammation and neuronal loss presence in experimentally generated rat autism model with propionic acid
SÜMEYYE BAŞER
Yüksek Lisans
Türkçe
2020
MikrobiyolojiSelçuk ÜniversitesiTıbbi Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. RECEP KEŞLİ
- Diyabetin fare sertoli hücreleri arasındaki sıkı bağlantı kompleksleri üzerine etkisinin immünohistokimyasal ve elektron mikroskobik olarak incelenmesi
Immunohistochemical and ultrastructural examination of the effects of diabetes on tight junctional complexes between the sertoli cells of mice
MİKAİL SAUTOĞLU
Yüksek Lisans
Türkçe
2015
Histoloji ve EmbriyolojiMersin ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ŞAKİR NECAT YILMAZ
- Ratlarda kronik stres modeli ile oluşturulan testis hasarına karşı nobiletinin etkisinin incelenmesi
Investigation of the effect of nobiletin against testicular damage caused by chronic water avoidance stress
SEDA KIRMIZIKAN
Doktora
Türkçe
2024
Histoloji ve EmbriyolojiSağlık Bilimleri ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ESRA ÇİKLER