Fare embriyolarının dondurulmasında melatoninin embriyo canlılığı ve gelişmesi üzerindeki etkilerinin incelenmesi
Examination of the effects of melatonin on embryo viability and development in freezing mouse embryos
- Tez No: 575181
- Danışmanlar: PROF. DR. SEZEN ARAT, DR. ALİ CİHAN TAŞKIN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoteknoloji, Biotechnology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2019
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Tekirdağ Namık Kemal Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Tarımsal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 86
Özet
Sunulan bu tez çalışmasının amacı, fare embriyolarının katı yüzey vitrifikasyon (SSV) yöntemi ile dondurulması sonrası, embriyo kültür medyumuna melatonin ilavesinin in vitro gelişim üzerine etkilerinin araştırılmasıdır. Melatonin oosit olgunlaşması ve embriyo gelişimini desteklediği bilinmektedir. Sunulan çalışmada sekiz hücreli fare embriyolarının katı yüzey vitrifikasyon yöntemi ile dondurulması sonrası melatonin ilaveli kültür medyumlarında in vitro gelişimi ve kalitesi araştırılmıştır. Bu amaçla B6CBAF1 ırk fareler, 10 IU PMSG ve 48 saat sonra 10 IU hCG'nin intraperitonal (IP) enjeksiyonu ile süperovule edilmiş ve pronüklear aşamadaki embriyolar elde edilmiştir. KSOM embriyo kültür medyumu + 4mg BSA medyumunda 37°C ve %5 CO₂ 'de sekiz hücreli aşamaya kadar inkübe edilmiştir. Sekiz hücreli embriyolar; 37°C, ekilibrasyon solüsyonunda 12 dakika bekletildikten sonra dondurma solüsyonunda yıkanarak 20 saniye içerisinde, sıvı azot içerisinde bulunan alimünyum yüzeye damla halinde bırakılarak (SSV) katı yüzey vitrifikasyon yöntemi ile dondurulmuştur. Çözündürme sonrası elde edilen embriyolar, KSOM medyumu + 4mg BSA medyumunda 37°C ve %5 CO₂ 'de blastosist aşamaya kadar inkübe edilmiştir. Deneyde toplam üç grup kullanılmıştır; kontrol, SSV grubu ve SSV + 10 ¯¹² M melatonin, sırasıyla kullanılan embriyo sayıları; 35, 74 ve 70'dir. Embriyoların in vitro gelişim oranları sırasıyla, %97,14, %86,49 ve %92,86 olarak tespit edilmiştir. Diferansiyel boyama sonucu toplam hücre sayıları sırasıyla; 64, 48 ve 33 olarak belirlenmiştir. Elde edilen sonuçlara göre; melatoninin, SSV vitrifikasyon yöntemi ile dondurulan embriyoların in vitro gelişimini desteklediği ilk kez bu çalışmada gösterilmiştir.
Özet (Çeviri)
The aim of this thesis is to investigate the effects of melatonin addition on embryo culture medium in vitro development after freezing mouse embryos by solid surface vitrification (SSV). It is known that melatonin supports oocyte maturation and embryo development. The purpose of this study is to investigate the in vitro growth and quality of melatonin-supplemented culture medium after freezing the eight-cell mouse embryos by solid surface vitrification. For this purpose, B6CBAF1 mice were superovulated with 10 IU PMSG and intra-peritoneal (IP) injection of 10 IU hCG after 48 hours to obtain embryos in the pronuclear stage (PN) embryos. Afterwards, they were incubated up to eight The aim of the thesis study cell steps under the conditions of 37°C and 5% CO₂ in KSOM medium + 4mg BSA medium. Eight-cell embryos were kept frozen in solid surface vitrification method (SSV) by first keeping them 12 minutes at 37°C in the equilibration solution (then washing them in freezing solution) and then dropping them to aluminum surface in liquid nitrogen with in 20 seconds. Embryos obtained after distillation were incubated in KSOM + 4mg BSA medium to 37°Cand 5% CO₂ to blastocyst stage. A total of three groups were used in the experiment: control, SSV group and SSV + 10 ¯¹² M melatonin. Number of embryos used were 35, 74 and 70 respectively. The growth rates of in vitro development were 97,14%, 86,49% and 92,86%, respectively. According to differential staining total cell counts were 64, 48 and 33 respectively. According to the results obtained; this study demonstrates the first time that melatonin supports in vitro development of embryos frozen by SSV vitrification.
Benzer Tezler
- Değişik gelişim dönemlerinde bulunan hibrit fare embriyolarının vitrifikasyon yöntemiyle dondurulması
Cryopreservation of hybrid mouse embryos at different developmental stages by vitrification method
HAKAN SAĞIRKAYA
Doktora
Türkçe
2001
Veteriner HekimliğiUludağ ÜniversitesiDölerme ve Suni Tohumlama Ana Bilim Dalı
DR. HAYDAR BAĞIŞ
Y.DOÇ.DR. İBRAHİM DOĞAN
- Fare embriyolarının in vitro kültüründe farklı BSA oranlarının gelişime etkisi
Effect of various BSA levels on development of mouse embryos in vitro culture
MİTHAT EVECEN
Doktora
Türkçe
1999
Veteriner Hekimliğiİstanbul ÜniversitesiDölerme ve Suni Tohumlama Ana Bilim Dalı
PROF. DR. İ. KAMURAN İLERİ
- Fare embriyolarının tip III antifreeze protein ve human heat shock protein 70 ile vitrifikasyonu ve çözdürülmesi sonrası in vitro gelişim oranlarına etkisi
The effect of TYPE III antifreeze protein and human heat shock protein 70 added to freezing vitrification mediums of mouse embryos on in vitro development rates
MUSTAFA BODU
Doktora
Türkçe
2021
Veteriner HekimliğiSelçuk ÜniversitesiDölerme ve Suni Tohumlama Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MEHMET BOZKURT ATAMAN
DR. ALİ CİHAN TAŞKIN
- DNA metilasyonunun fare embriyolarının iç hücre kitlesinde pluripotensi üzerindeki etkisinin araştırılması
Investigation of the effect of dna methylation on pluripotency in the inner cell mass of mice embryos
MEHMET DOĞAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2020
Histoloji ve EmbriyolojiAkdeniz ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GÖKHAN AKKOYUNLU
- N- ve O- glikozilasyonu engellenmiş BALB/C fare embriyolarının gelişen karaciğer dokusunda apoptozisin ve sialik asitle ilişkisinin mikroskobik, stereolojik ve analitik yöntemlerle belirlenmesi
Determination of apoptosis and apoptosis-sialic acid relation during developing liver tissue in inhibited N- and O- glycosylation in embriyonic BALB/C mouse by microscopic, stereologic and analytic methods
HÜSEYİN ÖZAYDIN
Yüksek Lisans
Türkçe
2011
BiyoteknolojiEge ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. REMZİYE DEVECİ