Geri Dön

Transgenik patateste farklı promotörlerin aktivitesinin karşılaştırılması

Comparison of different promoter activities in transgenic potato

PDF İndir

  1. Tez No: 577168
  2. Yazar: ILHOM RAHAMKULOV
  3. Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ ALLAH BAKHSH
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoteknoloji, Genetik, Ziraat, Biotechnology, Genetics, Agriculture
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2019
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Niğde Ömer Halisdemir Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Tarımsal Genetik Mühendisliği Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 110

Özet

Bu tez çalışmasında patatesten elde edilen yeşil dokuya özgü pRCA promotörü ile Arabidopsis thaliana bitkisinden elde edilen ve stres koşullarında uyarılabilen pRD29A promotörünün Lady Olympia patates (Solanum tuberosum L.) çeşidinde gen ifade seviyelerine bakılmıştır. Çalışmada konstitütif -35S CaMV promotörü kontrol olarak kullanılmıştır. Seçilen promotörler GUS-INT genini kontrol edecek şekilde pCAMBIA-1301 plazmidine yerleştirilmiştir. Bitki transformasyonu Agrobacterium tumefasiens bakterisinin LBA4404 suşu aracılığıyla sağlanmıştır. Eksplant olarak yaprak ve boğum araları kullanılmıştır. Elde edilen transgenik hatlar histokimyasal GUS analizi, PCR, gen ifadesini belirlemek için qRT-PCR ve fluorogenik assay analizi kullanılarak doğrulanmıştır. Laboratuvar koşullarında transgenik bitkilerin taranması için higromisin fosfotransferaz (hptII), en uygun konsantrasyonda (5 mg/l) kullanılmıştır. Transformasyon etkinliği % 0,98 olarak hesaplanmıştır. pRD29A içeren transgenik patateslerde GUS gen ifadesinin kontrol koşullara göre farklı abiyotik stresler altında 10 kattan fazla arttığı gözlemlenmiştir. pRCA promotöründe kök/yumru kısımlarına göre yapraklarda GUS gen ifadesi 4 kat artmıştır. Bu promotörlerin aktivitelerine bakılarak, ileride farklı genler ile beraber kullanılmaları durumunda patateste transgenik teknolojinin risklerini minimuma indirmek ve olumsuz çevre koşullarına dayanıklı patates hatları geliştirmek mümkün olabilir.

Özet (Çeviri)

In this thesis, the efficiency of green tissue specific (pRCA, isolated from potato) and stress inducible promoter (pRD29A, isolated from Arabidopsis thaliana) was compared in transgenic potato (Solanum tuberosum L.) plants in comparison with constitutive promoter (35S CaMV). The promoter fragments were cloned upstream to a reporter gene (GUS-INT) in pCAMBIA-1301 binary vector. Agrobacterium tumefaciens strain LBA4404 harboring recombinant binary vector was used to infect leaf discs and internodal explant of Lady Olympia cultivar. Transgenic lines were verified by GUS histochemical analysis, PCR, gene expression via RT-qPCR and fluorogenic GUS assay techniques. Hygromycin phosphotransferase (hptII) was used at optimal concentration (5 mg/l) for the screening of in vitro cultured putative transgenic plants. Overall transformation efficiacy was calculated as 0,98%. As a result of the validation methods, pRD29A transgenic potatoes were observed to increase GUS gene expression more than 10 times in different abiotic conditions compared to controls. In pRCA promoter, GUS gene expression was increased 4-fold in leaves compared to root / tuber parts. The results of this study encourage the appropriate use of promoter to drive the expression of foreign gene(s) for the development of potato lines resistant/tolerant against biotic and abiotic stresses. Thus, minimizing the risks of transgenic technology can be possible in potatoes using different genes under suitable promoters in the future.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    386429

    Yaralanmayla aktif olan AoPR1 promotörünün kontrolü altındaki CRY genlerinin protein üretimlerinin patateste sınırlandırılması

    Restriction of CRY gene protein production under the control of wound-induced AoPR1 promoter in potato

    HÜSEYİN ABDULLAH AHMED AHMED

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    BiyoteknolojiAnkara Üniversitesi

    Tarla Bitkileri Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. SEBAHATTİN ÖZCAN

  2. Tez No

    539588

    Pyramiding of insecticidal genes in potato to encode resistance against colorado potato beetle, leptinotarsa decemlineata (Say), (Chrysomelidae: Coleoptera)

    Patateste gen piramit tekniği kullanarak patates böceğinin, leptınotarsa decemlıneata (Say), (Chrysomelidae: Coleoptera), direnç yönetimi

    MUHAMMAD SALIM

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2019

    ZiraatNiğde Ömer Halisdemir Üniversitesi

    Bitkisel Üretim ve Teknolojileri Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AYHAN GÖKÇE

  3. Tez No

    93333

    Agrobacterium-mediated genetic transformation and microtuberization of potato (solanum tuberosum L.)

    Patateste (solanum tuberosum L.) agrobacterium aracılığıyla genetik transformasyon ve mikroyumru üretimi

    İREM KARAMOLLAOĞLU

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2000

    BiyoteknolojiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HÜSEYİN AVNİ ÖKTEM

    PROF. DR. ŞEBNEM ELLİALTIOĞLU

  4. Tez No

    738344

    Agrobacterium-mediated transformation of Turkish sweetpotato cultivar using a marker gene

    Türk tatlı patates çeşidinde Agrobacterium aracılığı ile markör gen transferi

    SENA DAMLA OKTAY

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    BiyoteknolojiYeditepe Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ BAHAR SOĞUTMAZ ÖZDEMİR

  5. Tez No

    490431

    Herbisite direnç geni CP4-EPSPS'nin Agrobacterium tumefaciens aracılığıyla patatese aktarılması

    Agrobacterium tumefaciens mediated genetic transformation of potato with CP4-EPSPS herbicidal gene

    SAFA SÜMER

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    ZiraatNiğde Ömer Halisdemir Üniversitesi

    Tarımsal Genetik Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. ALLAH BAKHSH

Geri Dön