Geri Dön

Meme kanseri tedavisinde miR-145-5p uygulamasının SMAD-3 ve SMAD-4 hedef genlerin ifadesine etkilerinin validasyonu

Validation of the effects of miR-145-5p application on the expression of SMAD-3 and smad-4 target genes in breast cancer

PDF İndir

  1. Tez No: 588075
  2. Yazar: AYNURA ALIYEVA
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. EMEL ERGENE
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoloji, Biology
  6. Anahtar Kelimeler: Meme kanseri, miRNA Yerine Koyma (Replacement) Tedavi, miRNA, miR-145-5p, TGF-β, SMAD-3, SMAD-4, RT-qPCR, Western Blot, mimik transfeksiyonu, Göç testi, Breast cancer, miRNA Replacement Therapy, miRNA, miR-145-5p, TGF-β, SMAD-3, SMAD-4, RT-qPCR, Western Blot, mimic transfection, Migration test
  7. Yıl: 2019
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Anadolu Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 84

Özet

Bu çalışmada, meme kanserinde baskılandığı Meta-analizle belirlenmiş olan, miR-145-5p tümör baskılayıcı miRNA özgül sentetik mimiği, meme kanserinde metastaz mekanizmasının önlenmesi veya geciktirilmesi amacıyla, transfeksiyonu gerçekleştirilmiştir.“Hi-Perfect Reagent Transfection Agent”yardımıyla hedef hücrenin içine in-vitro olarak transfekte edilmiştir (miRNA replecement therapy). Transfekte edilen miRNA'nın hücre çoğalmasını, farklaşmasını ve hücre ölümünü kontrol eden TGF-β sinyal yolağında etkili SMAD-3 ve SMAD-4 gen ürünlerinin (mRNA) ekspresyonlarındaki değişiklik gerçek zamanlı kantitatif PCR (RT-qPCR) analizi ile belirlenmiştir. Ardından, bu 2 adet hedef genin protein seviyesindeki değişiklikleri görmek için Western Blot analizi yapılmıştır. Ayrıca, uygulanan mimiğin hücresel metastaz üzerindeki etkisini göstermek amaçlı göç testi gerçekleştirilmiştir. Mimik uygulama sonrasında hücrelerde kontrole göre göçün durduğu görülmüştür. Aynı zamanda RT-qPCR analizinde mimik uygulanan hücrelerde kontrole göre SMAD-3 ve SMAD-4 gen ürünlerinin ekspresyonlarında azalma saptanmıştır. Son olarak, Western Blot analizinde SMAD-3 protein seviyesinin kontrolle kıyasta mimik uygulanan hücrelerde %86 azaldığı, SMAD-4 proteininin ise %100 azaldığı elde edilen bant yoğunluğu analiziyle tespit edilmiştir. Bu da RT-qPCR analizinin sonuçlarını desteklemektedir.

Özet (Çeviri)

In this study, miR-145-5p tumor suppressor miRNA specific synthetic mimic, which was determined by Meta-analysis in breast cancer, was transfected to prevent or delay the metastasis mechanism in breast cancer. In-vitro transfected into the target cell by“Hi-Perfect Reagent Transfection Agent”(miRNA replecement therapy). The change in expression of SMAD-3 and SMAD-4 gene products (mRNA) in the TGF-β signaling pathway that control cell proliferation, differentiation and cell death of transfected miRNA was determined by real-time quantitative PCR (RT-qPCR) analysis. Western Blot analysis was then performed to see changes in the protein level of these target genes. In addition, migration test was performed to show the effect of mimic on cellular metastasis. After the mimic application, migration was stopped according to the control in the cells. Also in the RT-qPCR analysis, the expression of SMAD-3 and SMAD-4 gene products decreased compared to control in mimic transfected cells. Finally, in Western blot analysis, the SMAD-3 protein level was determined by the control band and the SMAD-4 protein was reduced by 86% and the SMAD-4 protein was reduced by 100%. This supports the results of the RT-qPCR analysis.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    632546

    Effect of doxorubicin and microrna-140-3p on pd-L1 expression in colon cancer

    Kolon kanserinde doxorubıcın ve mıcrorna-140-3p'nin pd-L1 ifadesine olan etkisi

    NOEL MOPOUGUINI NABA

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2020

    Allerji ve İmmünolojiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    Assoc. Prof. Dr. AYÇA SAYI YAZGAN

  2. Tez No

    587888

    Identification and investigation of metastasis specific miRNAs in breast cancer cells for miRNA replacement therapy

    Meme kanser hücrelerınde miRNA replasman tedavisinde kullanılabilecek metastaik spesifik miRNA'ların belirlenmesi ve araştırılması

    EMİLİA EKENEL

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2019

    BiyolojiEskişehir Teknik Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. EMEL ERGENE

    DOÇ. DR. YEŞİM AYDIN SON

  3. Tez No

    612599

    Meme kanserinin prognozunu etkileyen miRNA'lar

    miRNAS that affect the prognosis of breast cancer

    AÇELYA GÖKDENİZ YILDIRIM

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    OnkolojiPamukkale Üniversitesi

    İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ARZU YAREN

  4. Tez No

    911108

    Radyoterapide kullanılan yüksek enerjili X-ışınlarının meme kanseri üzerine olan etkilerinin mikroRNA ifade düzeyinde incelenmesi

    Investigation of the effects of high energy X-rays used in radiotherapy on breast cancer at the level of microRNA expression

    MERVE GİRGİN

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    Radyasyon OnkolojisiYıldız Teknik Üniversitesi

    Biyomühendislik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. DİLEK BALIK

  5. Tez No

    577174

    Meme kanseri tedavisinde miR-185-5p''nin etkinliğinin proteomikyaklaşımla belirlenmesi

    The Determination of miR-185-5p Efficiency in Breast Cancer Treatment by Proteomic Approach

    VİLDAN TORUN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    BiyoteknolojiAnkara Üniversitesi

    Temel Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. DEMET CANSARAN DUMAN

Geri Dön