Eritrosit içi okside, redükte ve toplam glutatyon miktarını ölçen yeni kolorimetrik bir yöntem geliştirilmesi
Development of a new colorimetric method to measure oxidized, reduced and total glutathione levels of intraerythrocyte
- Tez No: 597423
- Danışmanlar: PROF. DR. ÖZCAN EREL
- Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2017
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Sağlık Bakanlığı
- Enstitü: Ankara Atatürk Eğitim ve Araştırma Hastanesi
- Ana Bilim Dalı: Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 134
Özet
Oksijen taşıyan hücreler olması ve hemoglobin içermeleri nedeniyle eritrositler diğer somatik hücrelere kıyasla daha fazla oksidatif strese maruz kalırlar. Bunun yanında eritrositler güçlü antioksidan sistemle donatılmıştır. Eritrosit içinin en önemli antioksidanı bir tripeptit olan glutatyondur ve yapısında bulunan sistein aminoasidi sayesinde tiyol grubu içerir. Okside glutatyon seviyesi oksidatif durumu gösterirken, redükte glutatyon seviyesi antioksidan kapasiteyi göstermektedir. Okside ve redükte glutatyon düzeylerini belirlemek için günümüze kadar birçok yöntem tariflenmiştir. Tariflenmiş spektrofotometrik yöntemler reaktiflerinde enzim ve koenzim kullanan pahalı yöntemlerdir. Bu tez çalışmasında eritrosit içi okside ve redükte glutatyon düzeylerini ölçen, yeni, ucuz, kolay uygulanabilir, yüksek doğruluğu, tekrarlanabilirliği ve kesinliği olan bir spektrofotometrik yöntem geliştirilmiştir. Yeni geliştirilen yöntem iki aşamadan oluşmaktadır. İlk aşamada ortamdaki redükte glutatyon düzeyleri belirlenmiş ve nativ glutatyon olarak ifade edilmiştir. Sonrasında ise okside glutatyonlar sodyum borohidrat ile GSH'a indirgenerek toplam glutatyon düzeyi belirlenmiştir. Toplam glutatyon ile nativ glutatyonun farkının yarısı okside glutatyon olarak verilmiştir. Yeni geliştirilen yöntemin 0 ile 3000 µmol/L arasında doğrusal olduğu görüldü (r2=0,999). Geliştirilen yöntemde bulunan parametrelerin geri kazanım yüzdeleri %93,1 ile 105,9 arasındaydı. Toplam presizyonlar toplam glutatyon, nativ glutatyon ve okside glutatyon için sırasıyla %2,70, %1,02 ve %6,65'ti. Ticari spektrofotometrik yöntem ile yeni geliştirilen yöntemdeki toplam glutatyon, nativ glutatyon ve okside glutatyon parametreleri için korelasyonlar sırası ile 0,901 (p
Özet (Çeviri)
Due to the its oxygen carrying function and hemoglobin ingredient, erythrocytes are exposed to oxidative stress more than other somatic cells. However, erythrocytes are covered with a powerful antioxidant system. The most important antioxidant for erythrocytes is glutathione, which is a tripeptide containing thiol group comes from its cysteine moiety. While oxidized glutathione levels show oxidative state, reduced glutathione levels present antioxidant capacity. So far, various methods have been described to determine the levels of oxidized and reduced glutathione. All of the described spectrophotometric methods are using enzymes and coenzymes, and they are expensive methods. In this thesis; a new, inexpensive, easily applicable, spectrophotometric method with high accuracy, reproducibility and precision was developed to measure intra-erythrocyte oxidized and reduced glutathione levels. The newly developed method consists of two steps. In the first step, the levels of reduced glutathione in the sample were determined and expressed as native glutathione. Subsequently, the total glutathione levels were determined by reducing the oxidized glutathione with sodium borohydride. Half of the difference between total glutathione and native glutathione is given as an oxidized glutathione. New method was linear between 0 and 3000 μmol/L (r2 = 0.999). The percentages of recovery of the parameters of developed method were between 93.1% and 105.9%. The total precisions of the total glutathione, native glutathione and oxidized glutathione were 2.70%, 1.02%, and 6.65%; respectively. The correlations of total glutatione, native glutathione and oxidized glutathione between commercial spectrophotometric method and the newly developed method were 0.901 (p
Benzer Tezler
- Çocuklarda demir eksikliği anemisi tedavisinde kullanılan farklı demir preparatlarının plazmada oksidan stres ve eritrositlerde antioksidan sistem üzerine olan etkilerinin araştırılması
Başlık çevirisi yok
BİLİN ÇETİNKAYA
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2002
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıEge ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
DOÇ.DR. KAAN KAVAKLI
- Bazı antibiyotiklerin asetilkolin esteraz ve glutatyon S-transferaz enzim aktiviteleri üzerine in vitro etkilerinin araştırılması
Investigation of the in vitro effects of some antibiotics on acetylcholine esterase and glutathione S-transferase enzyme activities
GURBET ÇELİK
- Yeni sekonder sülfonamidlerin sentezi ve in vitro karbonik anhidraz izoenzimleri üzerine inhibisyon aktivitelerinin incelenmesi
Synthesis of novel secondary sulfonamides and their in vitro carbonic anhydrase isozymes inhibition effects
TANER GÖKÇEN
Doktora
Türkçe
2017
Biyokimyaİstanbul Teknik ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. TURAN ÖZTÜRK
DOÇ. DR. AHMET C. GÖREN
- Eritrosit içi folik asit alt grupları ve tek karbon metabolizmasının nöropsikiyatrik hastalıklarda incelenmesi
The evaluation of erythrocyte folat subgroups and one carbon metabolism in neuropsychiatric diseases
ALPASLAN COŞAR
- Sigara tiryakilerinde eritrosit içi süperoksid dismutaz, katalaz ve glutatyon peroksidaz aktivite düzeyleri
Başlık çevirisi yok
YILMAZ ÇİĞREMİŞ