Β-amiloid peptid varlığında nöronal kalsiyum/kalmodulin-bağımlı Protein Kinaz 2 (CaMK-II) değişimlerinin nörodejenerasyon sürecine etkisi
Effects of neuronal calcium / calmodulin-dependent Protein Kinase 2 (CaMK-II) changes on the neurodegeneration process in the presence of β-amyloid peptide
- Tez No: 613451
- Danışmanlar: PROF. DR. PINAR AKAN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Amiloid, Hücre ölümü, Kalmodulin, Kalsiyum, Protein kinazlar, Amyloid, Cell death, Calmodulin, Calcium, Protein kinases
- Yıl: 2019
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Dokuz Eylül Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Demansın en yaygın şekli olarak karşımıza çıkan Alzheimer hastalığı (AH) bilişsel fonksiyon azalmasının görüldüğü ilerleyici bir nörodejenerasyon durumudur. Hafızanın oluşturulmasında CaMK-II kilit bir enzim olup hem geçmiş hem de şimdiki hücresel aktiviteyi temsil eden“sürekli”bir kalsiyum sinyallemesinin dinamik doğasına özgü, geçici bilgileri entegre ettiği ileri sürülmektedir. Ancak, dört izoformu olan CaMK-II enzim sinyalinin yokluğunda veya değişiminde hücresel aktivite/fizyolojinin nasıl etkilendiği henüz net olarak tanımlanamamıştır. Bu tez projesinde, in vitro Alzheimer modeli oluşturularak, ekstraselüler Aβ1-42 varlığının, nöronal CaMK-II izoform değişimleri ve hücre canlılığı üzerine etkisinin değerlendirilmesi amaçlanmıştır. SH-SY5Y hücrelerine, önceden agrege edilmiş Aβ1-42 peptidi 72 saat süresince uygulandı. CaMK-II enzim inhibitörü KN93 varlığı ve yokluğunda MTT ve LDH testi ile hücre canlılığı ve hücre kültür ortamındaki kalsiyum düzeyi fotometrik olarak değerlendirildi. CaMK-II enzimi alfa, beta, gama ve delta izoformlarının m-RNA ekspresyon değişimleri RT-PCR yöntemi kullanılarak belirlendi. Hücresel beta ve alfa izoformlarının değişimi ELISA yöntemi ve immünfloresan mikroskopi ile değerlendirildi. 10 µM Aβ1-42 uygulaması hücre canlılığını %50 oranında azaltırken LDH salınımını benzer oranda arttırdı (p<0,05). KN93 uygulaması ise Aβ1-42 toksisitesine karşı koruyucu etki göstermedi. Aβ1-42 uygulamasının, CaMK-II enzimi mRNA ekspresyonlarını kontrol grubuna göre belirgin azalttığı (p<0,05), alfa izoformunun hücresel birikimine neden olduğu belirlendi. Bu tez çalışması ile literatür taramamıza göre ilk kez, Alzheimer hastalığının temel patolojik bulgularından olan amiloid plakları oluşturan Aβ peptidlerin toksik konsantrasyonlarda CaMK-II enziminin izoformlarının ifadesini ve düzeyini değiştirebildiği gösterildi. Nöronal CaMK-II enzim izoform değişimlerinin hücre sağ kalımında kritik bir basamak olduğu ve hücrenin kendisini koruması için tetiklendiği düşünülebilir.
Özet (Çeviri)
Alzheimer's disease (AH), which is the most common form of dementia, is a progressive neurodegeneration condition in which cognitive dysfunction is observed. CaMK-II is a key enzyme in the creation of memory, and it is claimed to integrate temporary information specific to the dynamic nature of a“continuous”calcium signaling representing both past and present cellular activity. However, how the cellular activity / physiology was affected in the absence or exchange of the CaMK-II enzyme signal with its four isoforms has not yet been clearly defined. In this thesis, it was aimed to evaluate the effect of extracellular Aβ1-42 presence on neuronal CaMK-II isoform changes and cell viability by creating an in vitro Alzheimer model. The pre-aggregated Aβ1-42 peptide was applied to SH-SY5Y cells for 72 hours. In the presence and absence of CaMK-II enzyme inhibitor KN93, cell viability and calcium level in the cell culture medium were evaluated photometrically by MTT and LDH test. The m-RNA expression changes of CaMK-II enzyme alpha, beta, gamma and delta isoforms were determined using RT-PCR method. The changes of cellular beta and alpha isoforms were evaluated by ELISA method and immunofluorescence microscopy. Application of 10 µM Aβ1-42 decreased cell viability by 50% while increasing LDH release similarly (p <0.05). KN93 application did not have a protective effect against Aβ1-42 toxicity. Application of Aβ1-42 was found to significantly reduce CaMK-II enzyme mRNA expressions compared to the control group (p <0.05), causing alpha cellular accumulation of alpha isoform. According to our literature review, for the first time, it was shown that Aβ peptides can change the expression and level of isoforms of the enzyme CaMK-II at toxic concentrations. It can be thought that neuronal CaMK-II enzyme isoform changes are a critical step in cell survival and triggered to protect the cell itself.
Benzer Tezler
- Biberde kökboğazı yanıklığı (Phytophthora capsici Leonian)'na karşı mikorizal funguslar, salisilik asit ve DL-β-amino-n-buturik asit ile dayanıklılığın teşvik edilmesi
Induced resistance against phytophthora blight of pepper (Phytophthora capsici Leonian) with mycorrhizal fungi, salicyclic acid and DL-β-amino-n-butyric acid
HÜLYA ÖZGÖNEN
- Adapazarı ve civarında likit limit deneyinde kullanılacak β katsayısının bulunması
Determination of β value which is used in liquid limit tests for Adapazarı and its region
ALPER UYSAL
Yüksek Lisans
Türkçe
2004
İnşaat MühendisliğiSakarya Üniversitesiİnşaat Mühendisliği Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. ERSİN AREL
- DBM (demineralize kemik matriksli) ve β-trikalsiyum fosfatın deneysel kemik defektlerinde ayrı ayrı ve birlikte kullanıldıklarında iyileşme üzerine olan etkilerinin karşılaştırmalı olarak değerlendirilmesi
A comparative study on the effects of separate and combined use of DBM (demineralized bone matrix) and β-tricalcium phosphate on the healing of experimental tibial defects of wistar-albino rats
KEREM DEDEOĞLU
Doktora
Türkçe
2004
Diş Hekimliğiİstanbul ÜniversitesiAğız, Diş ve Çene Cerrahisi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. CENGİZHAN KESKİN
- İnsan meme kanserlerinde β-catenin stabilitesi, frizzled ve cyclin-D1 proteinlerinin ekspresyonu ve prognoz ile ilişkisi
β-catenin stability, frizzled and cyclin D1 proteins expression in human breast cancer and its relation with their prognosis
BAHA ZENGEL
Doktora
Türkçe
2004
OnkolojiDokuz Eylül ÜniversitesiTemel Onkoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MERAL SAKIZLI
- Diyabetik annelrin 3-β-hidroksibütirat düzeyleri ile bebeklerindeki hematolojik sorunların ilişkisi
Başlık çevirisi yok
HASAN ÇETİN
Tıpta Yan Dal Uzmanlık
Türkçe
2004
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıEge ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. METE AKISÜ
- Allerjik astım bronşiyalesi olan Türk hastalarda yüksek affiniteli immunglobulin E reseptörünün (FcεRI - β) izolösin 181 lösin / valin183 lösin veya isolösin 181 lösin polimorfizm görülme sıklığı ve bu polimorfizmin klinik parametrelerle ilişki
Başlık çevirisi yok
FATİH YILDIRIM
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2005
Göğüs HastalıklarıMarmara Üniversitesiİç Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. BERRİN CEYHAN