Geri Dön

Yağ doku matriksi desellülerizasyon tekniklerinin araştırılması

Invastigation of adipose tissue matrix decellularization methods

PDF İndir

  1. Tez No: 618228
  2. Yazar: RAVZA TOSUNBAYRAKTAR
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. ZEYNEP BURÇİN GÖNEN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Genetik, Genetics
  6. Anahtar Kelimeler: Adipoz doku, deselülerizasyon, mezenkimal kök hücre, ekstraselüler matriks, Adipose tissue, desellularization, extracellular matrix, mesenchymal stem cell
  7. Yıl: 2020
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Erciyes Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kök Hücre Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 99

Özet

Stromal vasküler fraksiyon (SVF), heterojen bir yağ hücre süspansiyonudur. Tez çalışmasının amacı; SVF sonrası geriye kalan dokuyu (SVFSD) hücresizleştirilerek bir biyomateryal haline getirmek ve diş pulpası kaynaklı mezenkimal kök hücrelerin (DPMKH) proliferasyon ve hücre canlılığı üzerine etkisini değerlendirmektir. Bu amaçla, adipoz ve SVFSD'ların fiziksel, mekanik ve enzimatik yöntem kullanılarak ex vivo deselülerizasyonu gerçekleştirildi. Desellülerizasyonun karakterizasyonu için histolojik analiz, kalıntı DNA ve mekanik test analizi gerçekleştirildi. Elde edilen hücresizleştirilmiş SVF matriks (DSVFM), hücresizleştirilmiş adipoz matriks (DAM) ve kontrol olarak adipoz doku (AD) sonuçları ile istatistiksel olarak karşılaştırıldı. DSVFM'ler üzerine DPMKH kültürü sonrası canlılık ve proliferasyon analizleri gerçekleştirildi. DAM ve DSVFM'lerin histolojik boyamalar ile deselülerizasyonu doğrulandı ve matrikslerin lifli yapısını koruduğu belirlendi. Kalıntı DNA miktarının DAM'da 4,470 ± 0,834 ng/µl, DSVFM'de 1,820 ± 1,157 ng/µl olduğu bulundu. DSVFM ve DAM, AD ile kıyaslandığında istatistiksel olarak düşük DNA içeriğine sahip bulundu (p=0,002; p=0,003). AD'nin hücresizleştirme sonrası %ağırlık kaybı 99,39 iken; SVFSD'de %98,12 idi. Çekme testi sonrası yeni üretilen DSVFM'in esnekliğini koruduğu belirlendi. DSVFM'ye uygulanan maksimum kuvvet 0,16038 N; maksimum gerilme 5,10493 N/mm2 ve maksimum uzama değeri 26,20329 mm olarak hesaplandı. DAM ve DSVFM'e DP-MKH ekimi sonrası hücrelerin canlılık yüzdesi kontrol grubunda %99,89 ± 0,30; DAM grubunda % 99,91 ± 0,19 ve DSVFM grubunda %99,79 ± 0,57 idi. MTT testi sonrası DAM ve DSVFM'in DP-MKH'ler için toksik etki göstermediği belirlendi. Hücresizleştirilmiş SVF matriks biyouyumlu bir biyomateryal olarak ileri preklinik ve klinik çalışmalarda kullanılarak araştırılmalıdır. Gelecekte bu materyal, klinik olarak yumuşak doku mühendisliğinde kullanılmaya adaydır.

Özet (Çeviri)

Stromal vascular fraction (SVF), is heterogenous fat cell suspension. The aim of this thesis study is to produce a decellulerized SVF matrix (DSVFM) which can be a biomaterial and to evaluate the effect on dental pulp mesenchymal stem cells (DPMSCs) in terms of cell proliferation and cell viability. Ex vivo decellularization of adipose tissues (AT) and post SVF isolation tissues (pSVF) were performed using physical, mechanical and enzymatical methods. Histological analysis, residual DNA analysis and mechanical test analysis were performed for the characterization of protocols. The obtained decellularized SVF matrix (DSVFM) was statistically compared with the decellularized adipose matrix (DAM) and AT as a control. Cell viability and proliferation analyzes were performed after DPMKH culture on DSVFMs. Histological stainings results were confirmed the decellularization of matrices and they preserved the fibrous structures. The residual DNA amount was found to be 4,470±0,83 ng /µl in DAM and 1,820±1,15 ng/µl in DSVFM. DSVFM and DAM were found to have statistically lower DNA content compared to AD (p=0.00). While AT has lost 99.39% of weigh after decellularization, pSVF has lost 98.12%. After the tensile test, it was determined that DSVFM preserves its flexibility. The maximum force that can be applied to the DSVFM was 0.16 N; the maximum stress was 5,10 N/mm2 and the maximum elongation was calculated as 26,20 mm. Percent viability of cultured DP-MSCs on DAM was 99.89 ± 0.30%, and 99.79 ± 0.57% in the DSVFM group and it was found 99.91± 0.19% in the control group. After MTT test, it was determined that DAM and DSVFM did not show any cytotoxic effects for DP-MSCs. The decellularized SVF matrix should be investigated as a biocompatible biomaterial in advanced preclinical and clinical studies. In the future, the decellularized SVF matrix may be a candidate as a biomaterial in soft tissue engineering.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    705102

    Stromal vasküler fraksiyon ile takviye edilmiş enjekte edilebilir yağ, dermis ve kıkırdak matrikslerin rejeneratif potansiyellerinin immün baskılanmış sıçan modelinde araştırılması

    Investigation of the regenerative potentials of injectable fat, dermis and cartilage matrixes supplemented with stromal vascular fraction in an immune suppressed rat model

    ERKAN KEREM KAYA

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    Plastik ve Rekonstrüktif CerrahiSüleyman Demirel Üniversitesi

    Plastik Rekonstrüktif ve Estetik Cerrahi Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ FUAT USLUSOY

  2. Tez No

    416552

    Development of vascularized adipose tissue construct based on adipose tissue extracellular matrix and silk fibroin

    Yağ dokusu hücredışı matriksi ve ipek fibroininden damarlı adipoz doku konstrüktü geliştirilmesi

    ALİŞAN KAYABÖLEN

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2015

    BiyomühendislikOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyomedikal Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. AYŞEN TEZCANER

    DOÇ. DR. FATİH ZOR

  3. Tez No

    438700

    Preparation of a gold nanoparticle containing electrospun poly (ɛ-caprolactone) Scaffold for stem cell differentiation

    Kök hücre farklılaşması için altın nanoparcacık içeren electrospun poly (ɛ-caprolactone) Scaffold hazırlanışı

    HAMİDE ÖZAYDIN

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2015

    BiyoteknolojiYeditepe Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MUSTAFA ÇULHA

  4. Tez No

    547893

    Effect of silanization agent on the development of nanohybrid systems

    Nanohibrit sistemlerinin geliştirilmesinde silanlama ajanının etkisi

    MELTEM AKKULAK

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2019

    Biyoteknolojiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. FATOŞ YÜKSEL GÜVENİLİR

  5. Tez No

    192306

    Mobil telefon kullanımına bağlı oluşan 900-1800 mhz radyo frekans dalgalarının meydana getirdiği elektromanyetik alanın iliak kanat kemik mineral yoğunluğuna etkisi

    The effect of electromagnetic fields on bone mineral density of iliac bone produced by 900-1800 mhz radio frequency waves dependent on cellular phone usage

    BEŞİR ANDAÇ AKSOY

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2006

    Ortopedi ve TravmatolojiSüleyman Demirel Üniversitesi

    Ortopedi ve Travmatoloji Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. NEVRES HÜRRİYET AYDOĞAN

Geri Dön