Geri Dön

Probiyotik özellik gösteren bazı laktik asit bakterileri ve mayaların tümör baskılayıcı etkilerinin araştırılması

Investigation of the tumor supressive effect of some probiotic lactic acid bacteria and yeasts

PDF İndir

  1. Tez No: 651250
  2. Yazar: MÜNEVVER KAHRAMAN
  3. Danışmanlar: PROF. DR. AYNUR GÜL KARAHAN, PROF. DR. MUSTAFA ENDER TERZİOĞLU
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Gıda Mühendisliği, Mikrobiyoloji, Onkoloji, Food Engineering, Microbiology, Oncology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2020
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Süleyman Demirel Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Gıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 212

Özet

Bu çalışmada, yaşları 25-45 arasında 12 sağlıklı bireyin dışkı örnekleri izolasyon materyali olarak kullanılmıştır. 66 bakteri ve 17 maya olmak üzere toplam 83 mikroorganizma izole edilmiştir. İzole edilen bu mikroorganizmaların tanısı MALDI Biotyper (Bruker Daltonic) cihazı ile yapılmıştır. 14 Candida türü ve 3 adet Cryptococcus neoformans, ayrıca 53 laktik asit bakterisine ek olarak Methylobacterium organophilum, Filifactor villosus, Streptomyces hirsutus, Burkholderia gladioli, Paracoccus denitrificans, Shewanella algae, Rhodococcus equi, Cellulomonas gelida, Bacillus vallismortis, Gluconobacter oxydans, Staphylacoccus simulans, Pseudomonas tolaasii olarak tespit edilmiştir. Elde edilen bakteri ve mayaların tamamının gastrik asit (pH 3.5) ve safra tuzuna (0.3%) dayanıklılık, ekzopolisakkarit üretimi (EPS) ve proteoliz, antioksidan aktiviteleri belirlenmiştir. Tüm suşların antimikrobiyellere (antibiyotik, antifungal) duyarlılığı da incelenmiştir. Lactobacillus pentosus (MK7), L. curvatus (MK13), L. plantarum (MK16) ve Enterococcus faecium (MK41, MK49, MK72) suşlarının pH ve safra tuzuna dayanımları yüksek olarak belirlenmiştir. Buna ek olarak, aynı suşlar EPS üretmiş MK16 ise hem EPS üretmiş hem de proteolitik aktivite göstermiştir. Mikroorganizma süpernatantları ve sonikasyon sonucu elde edilen hücre içeriklerinden 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) yöntemi kullanılarak antioksidan aktivite tayini yapılmıştır. İncelenen antioksidan aktiviteleri hücre içeriklerinde daha yüksek olarak gözlenmiş ve MK7, MK13, MK16, MK41, MK49 ve MK72 için sırasıyla %64.4, %71.2, %62.1, %64, %66 ve %65.44 olarak belirlenmiştir. Bakteri suşlarından 40 adedi (%62.5), ampisilin, kloramfenikol, gentamisin, eritromisin, kanamisin, penisilin, streptomisin, tetrasiklin ve vankomisine dirençli olarak saptanmıştır. Maya suşlarının tamamının ketokonazole dirençli ve nistatine duyarlı oldukları görülmüştür. Flukonazol, vorikonazol, amfoterisin B ve itrakonazole duyarlılıkları değişkenlik göstermektedir. Aynı mikroorganizmalar 3-(4,5-dimethylthiazolyl-2)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) ve Trypan Blue (TB) dışlama deneyleri yoluyla kalın bağırsak kanseri hücre hattı (CT26) üzerinde test edilmiştir. MTT ve TB deneyleri ile tümör baskıladığı gözlenen suşlar (MK17, MK45, MK55, MK73) hayvan denemelerinde kullanılmak üzere belirlenmiştir. 30 adet Balb-c faresinden çeşitli gruplar oluşturulmuştur. CT26 kalın bağırsak kanseri hücre hattı ve uygun görülen suşlar bu gruplara uygulanmıştır. Deneme süresi sona erdiğinde bütün grupların doku ve kan örnekleri alınmıştır. Alınan kan örneklerinden plazma ayrılıp, ELISA yöntemi ile interferon gamma (INF-γ), tümör nekrozis faktör alfa (TNF-α) ve interlökin 10 (IL-10) sitokin değerleri belirlenmiştir. Kalın bağırsak doku örneklerinden immünofloresan yöntemi ile Ki67 boyaması ve süspansiyon haline getirilen dalak hücrelerinden akış sitometri yöntemi ile doğal öldürücü hücre (NK), CD8, CD3 ve Mac-3 boyamaları yapılmıştır. ELISA sonuçları ele alındığında, IFN-γ, TNF-α, IL-10 deneysel verileri, L. plantarum MK55 suşunun, bu sitokinlerin seviyelerinde düzelme sağlayarak sağlıklı kontrol grubunun verilerine yaklaştığını göstermektedir. Akış sitometri verileri değerlendirmesinde ise L. plantarum MK55 suşu, NK1, Mac-3, CD3 ve CD8 ölçümlerinde anlamlı bir şekilde sağlıklı kontrol grubu verilerine yakın olarak bulunmuştur (p

Özet (Çeviri)

In this study, feces samples of 12 healthy individuals aged 25-45 were used as isolation material. A total of 83 microorganisms, 66 bacteria and 17 yeast, were isolated. 14 Candida species and 3 Cryptococcus neoformans species, as well as 53 lactic acid bacteria were isolated. MALDI Biotyper (Bruker Daltonic) was used to diagnose these isolated microorganisms. In addition, bacteria such as Methylobacterium organophilum, Filifactor villosus, Streptomyces hirsutus, Burkholderia gladioli, Paracoccus denitrificans, Shewanella algae, Rhodococcus equi, Cellulomonas gelida, Bacillus vallismortis, Gluconobacter oxydans, Staphylacoccus simulans, Pseudomonas tolaasii have been identified. Resistance to gastric acid (pH 3,5) and bile salt (0,3%), exopolysaccharide production (EPS) and proteolysis, antioxidant activities of all the bacteria and yeasts obtained were determined. The susceptibility of all strains to antimicrobials (antibiotics, antifungals) has also been studied. The pH and bile resistance of L. pentosus (MK7), L. curvatus (MK13), L. plantarum (MK16) and Enterococcus faecium (MK41, MK49, MK72) strains were determined to be high. In addition, the same strains produced EPS, MK16 produced both EPS and proteolytic activity. Antioxidant activity was determined from the microorganism supernatants and cell contents obtained by sonication using the 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) method. The antioxidant activities observed were higher in cell contents and were determined as 64,4%, 71,2%, 62,1%, 64%, 66% and 65,44% for MK7, MK13, MK16, MK41, MK49 and MK72, respectively. 40 of bacteria strains (62.5%) were resistant to ampicillin, chloramphenicol, gentamicin, erythromycin, kanamycin, penicillin, streptomycin, tetracycline and vancomycin. All yeast strains were found to be resistant to ketoconazole and sensitive to nystatin. Sensitivity to fluconazole, voriconazole, amphotericin B and itraconazole varies. The same microorganisms were tested on the colon cancer cell line (CT26) through 3- (4,5-dimethylthiazolyl-2) -2, 5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) and Trypan Blue (TB) exclusion experiments. The strains (MK17, MK45, MK55, MK73) observed to be tumor suppressing with MTT and TB experiments were determined for use in animal experiments. Various groups were formed from 30 Balb-c mice. The CT26 colon cancer cell line and appropriate strains were administered to these groups. At the end of the experiment period, tissue and blood samples of all groups were taken. Plasma was separated from blood samples and interferon gamma (INF-γ), tumor necrosis factor alpha (TNF-α) and interleukin 10 (IL-10) cytokine values were determined by ELISA method. Natural killer cell (NK), CD8, CD3 and Mac-3 stains were made from the suspended spleen cells by flow cytometry method, followed by Ki67 staining from the large intestine tissue samples by immunofluorescence method. Considering the ELISA results, the experimental data of IFN-γ, TNF-α, IL-10 show that L. plantarum MK55 strain approached the data of the healthy control group by improving the levels of these cytokines. In the evaluation of flow cytometry data, L. plantarum MK55 strain was found to be significantly close to healthy control group data in NK1, Mac-3, CD3 and CD8 measurements (p

Benzer Tezler

  1. Tez No

    472378

    Probiyotik özellik gösteren bazı maya suşları ve laktik asit bakterilerinin etkileşimlerinin araştırılması

    Investigation of the interaction between probiotic yeasts and lactic acid bacteria

    HATİCE YILDIRAN

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2017

    Gıda MühendisliğiSüleyman Demirel Üniversitesi

    Gıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AYNUR GÜL KARAHAN

    DOÇ. DR. GÜLDEN BAŞYİĞİT KILIÇ

  2. Tez No

    338086

    Probiyotik özellik gösteren bazı laktik asit bakterileri tarafından üretilen ekzopolisakkaritlerin immunomodülatör etkilerinin belirlenmesi

    Determination of immunomodulatory potentials of exopolysaccharides produced by some probiotic lactic acid bacteria

    KÜBRA ALMACIOĞLU

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2013

    BiyolojiAnkara Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ÖZLEM OSMANAĞAOĞLU

    DOÇ. DR. İHSAN GÜRSEL

  3. Tez No

    250985

    Bazı laktik asit bakterilerinin probiyotik özelliklerinin incelenmesi

    Investigation of probiotic properties some lactic acid bacteria

    ERDEM AKMAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2009

    Beslenme ve Diyetetikİstanbul Ticaret Üniversitesi

    Gıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NECLA ARAN

  4. Tez No

    398713

    Anne sütünden laktik asit bakterilerinin izolasyonu, karakterizasyonu ve bazı probiyotik ve starter özelliklerinin araştırılması

    Isolation, characterization and investigation of some probiotic and starter features of lactic acid bacteria from human breast milk

    PINAR ÖNGÜN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    BiyoteknolojiAksaray Üniversitesi

    Biyoteknoloji ve Moleküler Biyoloji Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. MELTEM AŞAN ÖZÜSAĞLAM

  5. Tez No

    301038

    Vajinal sekresyondan izole edilen laktik asit bakterilerine ait bazı suşların potansiyel probiyotik özelliklerin belirlenmesi

    Identification of potential probiotic properties of some lactic acid bacterial genera which is isolated from vaginal secretion

    FERİBA TURHAN ERYILMAZ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2011

    BiyolojiAnkara Üniversitesi

    Temel Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ÖZLEM OSMANAĞAOĞLU

Geri Dön