Geri Dön

Effect of oxidative stress on lipid peroxidation and DNA-pinding activities of transcription factors, NF-kB and AP-1, in j774A-1 cell line

Başlık çevirisi mevcut değil.

  1. Tez No: 65152
  2. Yazar: MELEK CANAN ARKAN
  3. Danışmanlar: PROF. DR. S. HÜVEYDA BAŞAĞA
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoloji, Biology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 1997
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Boğaziçi Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 113

Özet

VI ÖZET Hücrenin oksidan veya antiokidan dununu, transkripsyonel proteinler nüklear faktör, NF-kB ve aktivatör protein, AP-l'in aktivasyonu yoluyla gen expresyonunu etkiler. Bu çalışmada oksidatif stresin etkisi J774A-1 hücrelerinde incelenmiştir. Hücrelere 1 mM-150 uM askorbat/demir, Asc/Fe2+ ilave edildiğinde tiyobarbitürik asit reaktif maddelerinin (TBAR) 0.23 nmol MDA/mg protein değerinden 0.44 nmol/mg protein değerine yükseldiği bulunmuştur. Aynı deneyler arakidonik asit (AA) ile muamele edilmiş hücrelerde yapıldığmda ise TBAR madde miktarı 1.9 nmol/mg protein olarak bulunmuştur. Asc/Fe3', 1 mM-500uM olarak ilave edildiğinde TBAR madde miktarı 0.19 nmol/mg proteinden 0.49 nmol/mg proteine, AA ile muamele edildiğinde ise 2.4 nmol/mg proteine yükseldiği bulunmuştur. Elde edilen neticelerle uyumlu olarak, hidroksinonenal/malonaldehid- (HNE/MDA) protein bileşikleri de floresans değerlerinde artış göstermiştir. Asc/Fe3+ ile muamele edilmiş hücrelerin toplam tiyol miktarı 77 mmol/ml değerinden 40 mmol/ml değerine düştüğü saptanmıştır. Lipid peroksidasyon (LP) ve tiyol seviyeleri hücrenin redox durumunu etkilediği bilindiğinden NF-kB ve AP-l'in DNA bağlanma aktiviteleri elektroforetik hareketi geciktirme metodu (EMSA) ile irdelenmiştir. Asc/Fe2+, Asc/Fe2+ artı AA ve Asc/Fe3+ ilave edildiğinde her iki transkripsiyon faktörünün de DNA bağlanma aktivitelerinde bir düşüş görülmüştür. Antioksidan bir molekül olan difenilfenilendiamin (DPPD) de bağlanma aktiviteleri üzerine bir etki göstermemiştir. Hücrelerin oksidan bileşikler ile birlikte forbolmiristat asetat (PMA) ile muamele edilmesi durumunda her iki transkripsiyon faktörü bağlanmalarında artış görülmüştür. LP ürünü olan HNE da NF-kB' nin nukleusa taşınmasında ve AP -1' in DNA' ya bağlanmasını arttırmıştır. Elde edilen bulgular hücrenin redox duyarlılığı ve bunu etkileyen faktörlerden olan reaktif oksijen türleri (ROS) ve hücre spesifishesi önüyle tartışılmıştır.

Özet (Çeviri)

ABSTRACT Oxidant or antioxidant status of the cell can control gene activation through activator proteins such as nuclear factor kB (NF-kB) and activator protein (AP-1). In our studies we have evaluated the extend of oxidative stress on J774A-1 cell line. When cells were treated with ascorbate/iron, Asc/Fe2+, (1 mM-150 uM) the amount of thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) were increased to 0.44 nmol MDA/mg protein compared to that of 0.23 nmol MDA/mg protein for control. However, supplementation of the cells with arachidonic acid (AA) significantly increased the level of TBARS to 1.9 nmol MDA/mg protein. The amount of TBARS for Asc/Fe^ (1 mM-500 uM) treated cells were 0.49 nmol MDA/mg protein and 0. 19 nmol MDA/mg protein for the control and 2.4 nmol MDA/mg protein for the AA-supplemented. Consistent with the above, fluorescence detection of the hydroxynonenal/malondialdehyde- (HNE/MDA) protein adducts gave similar results. Total thiols were decreased from 77 mmol/ml to 40 mmol/ml when cells were treated with Asc/ Fe3*. As lipid peroxidation (LP) and thiol levels are known to effect the redox status of the cells, DNA-binding activities of NF-kB and AP-1 were checked by electrophoretic mobility shift assay (EMSA). In cells treated with Asc/Fe2+, a reduced DNA binding activity of AP-1 was observed as well as NF-kB nuclear translocation both in AA supplemented and unsupplemented cells. High and low concentrations of Asc/Fe3* exerted a decreased binding activity of both transcription factors. However, the antioxidant diphenylphenylendiamine (DPPD) did not exert any effect on the binding activities. Co-treatment of phorbol myristate acetate (PMA) with the oxidants clearly increased the binding of both transcription factors, NF-kB and AP-1. The lipid peroxidation end-product, HNE, increased the nuclear translocation of NF-kB and the binding of AP-1. The results are discussed in the light of redox sensitivity of the cell effected by reactive oxygen species (ROS) and cell specificity.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    242708

    Paraquat ile oluşturulmuş oksidatif stresin HepG2 hücrelerinde apoptozis üzerine etkisinin araştırılması

    The Effect of Oxidative Stress Induced by Paraquat on Apoptosis in Hep G2 Cells

    GÖRKEM KISMALI

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2009

    BiyokimyaAnkara Üniversitesi

    Biyokimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. TEVHİDE SEL

  2. Tez No

    396298

    Tütün dumanına maruz kalan ratlarda ellajik asidin testis dokusundaki antioksidan etkisinin incelenmesi

    Examination of antioxidant effect of ellagic acid on testicular tissue in rats that were exposed to tobacco smoke

    NALAN KAYA

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    Histoloji ve EmbriyolojiFırat Üniversitesi

    Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. İBRAHİM ENVER OZAN

  3. Tez No

    412022

    Ratlarda tioasetamid ile oluşturulan toksik hepatit modelinde l-karnitin ve melatonininkoruyucu rolü

    Protective Role of l-carnitine and melatonin in thioacetamide induced toxic hepatits models in rats

    FATMA EBRU AKIN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2003

    GastroenterolojiBaşkent Üniversitesi

    İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. GÜRDEN GÜR

  4. Tez No

    185519

    Klorprifos ve deltamethrin'in kan ve beyin lipid peroksidasyon ve anyioksidan enzim aktivitelerine etkisi

    Effect of chlorpyriphos and deltamethrin on blood and brain lipid peroxidation and antioxidant enzyme activities

    EREN KAYA

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2006

    KimyaSüleyman Demirel Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. HİLAL YÜCEL

    YRD. DOÇ. DR. NALAN TÜZMEN

  5. Tez No

    595923

    Deltametrin ve thiakloprid insektisit karışımının insan akciğer fibroblastlarında oksidatif stes potansiyelinin ve hücre canlılığına etkisinin belirlenmesi

    Determining of oxidative stress potential and effect on cell viability of deltamethri̇n and thi̇aclopri̇d insecticides in human lung fibroblasts

    ALPEREN KARABIYIK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    BiyolojiOrdu Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. VEDAT ŞEKEROĞLU

Geri Dön