Geri Dön

Investigation of the effect of B. spergulifolius extracts on insulin-resistant 3T3-L1 adipocytes

B. spergulifolius ekstraktlarının insüline dayanıklı 3T3-L1 adipositler üzerindeki etkisinin araştırılması

PDF İndir

  1. Tez No: 666265
  2. Yazar: GİZEM ECE DERİCİ
  3. Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ SİBEL ÖZDAŞ
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyomühendislik, Moleküler Tıp, Bioengineering, Molecular Medicine
  6. Anahtar Kelimeler: Bolanthus spergulifolius, diyabet, insulin dinci, 3T3-L1 adipositler, glikoz taşıyıcı tip 4, anti-diyabetik, Bolanthus spergulifolius, diabetes mellitus, insulin-resistant, 3T3-L1 adipocytes, Glucose transporter-4, anti-diabetic
  7. Yıl: 2021
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Adana Alparslan Türkeş Bilim Ve Teknoloji Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyomühendislik Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 114

Özet

Diabetes mellitus (DM), yetersiz insülin sekresyonu ve / veya insülin etkisi kusuru nedeniyle metabolik sonuçlar, kronik hiperglisemi ile karakterize metabolik bir hastalıktır. DM sıklıkla kardiyovasküler hastalıklara, göz, böbrek ve sinir sisteminde çeşitli komplikasyonlara neden olur. Tip 2 DM (T2DM), toplam DM'nin yaklaşık % 90'ını oluşturur. Bu nedenle, T2DM için yeni terapötik yaklaşımların ve potansiyel sinyal yolaklarındaki molekülleri hedefleyen alternatif, doğal ajanların araştırılması çok önemlidir. Tıbbi bitkiler, alternatif yeni ilaç etken maddelerinin araştırılmasında çok önemli kaynaklardır. Bolanthus spergulifolius (B. spergulifolius), Caryophyllaceae ailesinin cinslerinden biridir. Bu çalışmada B. spergulifolius ekstraktlarının 3T3-L1 adipositler üzerindeki potansiyel anti-diyabetik etkilerinin in-vitro olarak araştırılması amaçlanmıştır. B. spergulifolius, metanol (MeOH), etilasetat (EA) ve su ile ekstrakte edildi ve toplam fenolik içerikleri (TPC) Folin-Ciocalteu yöntemi ile değerlendirildi. Yüksek TPC (sulu< MeOH< EA) gösteren B.spergulifolius ekstraktlarının olgun 3T3-L1 adipositlerideki sitotoksik etkisi MTT asay ile değerlendirildi ve hücre canlılığında %50 azalmaya neden olan ekstrakt konsantrasyonları (IC50) belirlendi. MeOH, EA ve Sulu ekstraktlarının IC50 konsantrasyonları sırasıyla 305.7 ± 5.583 µg/mL, 567.4 ± 3.008 µg/mL ve 418.3 ± 4.390 µg/mL olarak gözlendi ve ileri deneylerde kullanılmak üzere seçildi için. Ölü/canlı hücre asay ile MeOH, EA ve Sulu ekstrelerinin sitotoksik etkisi doğrulanmıştır (sıırasıyla, %69.75 ± 1.70, %61.75 ± 1.70, %70 ± 4.24 ve hepsi için P< 0.05). Ayrıca, ekstrelerin olgun 3T3-L1 adipositlerinde lipid birikimi üzerindeki etkileri Oil-Red-O boyama testi ile değerlendirildi. Tedavi edilmemiş olgun adipositlere kıyasla ekstraktlar ile tedavi edilmiş olgun adipositlerde lipid birikimi etkili bir şekilde azalmıştır (tümü için P< 0.05). Ayrıca ekstraktların Bax ve Bcl-2 tarafından düzenlenen apoptoz üzerindeki etkisi qRT-PCR ile araştırılmıştır. Tedavi edilmemiş adipositlere kıyasla ekstraktlar, pro-apoptotik Bax ekspresyonunu artırarak, anti-apoptotik Bcl-2 gen ekspresyonunu azaltarak apoptozu önemli ölçüde indükledi (hepsi için P< 0.05). İnsülin direnci ile bağlantılı Glut-4 ekspresyonu, qRT-PCR, Western-blot ve Immunofluorescence boyama ile değerlendirildi. Buna paralel olarak, tedavi edilmemiş olgun adipositlere kıyasla ekstraktlarla tedavi edilen adipositlerde Glut-4 ekspresyonu, önemli ölçüde daha yüksekti (hepsi için P< 0.05). Ekstraktlar, çizik yara asay uygulamasından 30 saat sonra hücre göçünü önemli ölçüde baskıladı (hepsi için P< 0.05). Hücre morfolojisi ve hücre-çapı faz-kontrast mikroskobu, taramalı elektron mikroskobu (SEM), İmmünofloresans (anti-F-aktin ile) ve Giemsa boyaması ile değerlendirildi. Ekstraktlarla tedavi edilen adipositler kısmen küresel morfolojiyi kaybetti ve tedavi edilmemiş adipositlere kıyasla daha küçük hücre çapı gösterdi (hepsi için P< 0.05). Sonuç olarak, çalışmamız B. spergulifolius ekstraktlarının apoptozu indüklediğini, lipid birikimini azalttığını, yarayı iyileşmesini geciktirdiğini, Glut-4 seviyesini arttırdığını ve bu yolla DM'de insülin direncinin azalmasına katkıda bulunabileceğini göstermektedir.

Özet (Çeviri)

Diabetes mellitus (DM) is a metabolic disease with chronic hyperglycemia characterized by metabolic outcomes due to insufficient insulin secretion and/or insulin effect defect. DM often causes cardiovascular diseases and various complications on the eye, kidney and nervous system. Type 2 DM (T2DM) accounts for approximately 90% of the total DM. Therefore, it is very important to investigate new therapeutic approaches for T2DM and alternative, natural agents that target molecules in potential signal pathways. Medicinal plants are very significant resources in the research of alternative new drug active ingredients. Bolanthus spergulifolius (B. spergulifolius) is one of the genera of the family Caryophyllaceae. In the present study, it was aimed to investigate the potential anti-diabetic effects in-vitro of B. spergulifolius extracts on 3T3-L1 adipocytes. B. spergulifolius were extracted with methanol (MeOH), ethylacetate (EA) and Aqueous and evaluated for their total phenolic content (TPC) by Folin-Ciocalteu method. B. spergulifolius extracts showing highly TPC (Aqueous< MeOH< EA) and their different concentrations were caried out on preadipocytes differentiated in to mature 3T3-L1 adipocytes to investigate their half-maximal (50%) inhibitory concentration (IC50) by using MTT assay. The IC50 concentrations of MeOH, EA and Aqueous extracts were observed as 305.7 ± 5.583 µg/mL, 567.4 ± 3.008 µg/mL and 418.3 ± 4.390 µg/mL and were used for further experiments. A live/dead assay further confirmed the cytotoxic effect of MeOH, EA and Aqueous extracts (respectively, 69.75 ± 1.70%, 61.75 ± 1.70%, 70 ± 4.24% and for all P< 0.05). Also, effects of extracts on lipid accumulation in mature 3T3-L1 adipocytes were evaluated by Oil-Red O staining assay. The extracts effectively decreased lipid-accumulation compared to untreated adipocytes (for all P< 0.05). Morever, effect of extracts on apoptosis regulated by the Bax and Bcl-2 was investegated by qRT-PCR. The extracts significantly induced apoptosis by up-regulating pro-apoptotic Bax expression but down-regulating anti-apoptotic Bcl-2 gene expression compared to untreated adipocytes (for all P< 0.05). The Glut-4 expression linked with insulin resistance was determined by qRT-PCR, Western-blot and Immunofluorescence staining. In parallel, expression of Glut-4 in adipocytes treated with extracts was significantly lower compared to untreated adipocytes (for all P< 0.05). Extracts significantly supressed cell migration after 30 h of wounding in a scratch-assay (for all P< 0.05). Cell morphology and diameter were further evaluated by phase-contrast microscopy, Scanning electron microscope (SEM), Immunofluorescence (with F-Actin) and Giemsa staining. The adipocytes treated with extracts partially lost spherical morphology and showed smaller cell-diameter compared to untreated adipocytes (for all P< 0.05). In conclusion, these results suggest that extracts of B. spergulifolius causes to an induce apoptosis, a decrease lipid-accumulation, wound healing, Glut-4 level and migth contribute to the reducing of insulin-resistance in DM.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    899047

    Golgi stresinin foliküler T ve B hücre yüzeyinde HLA-G ekspresyonuna etkisinin araştırılması

    Investigation of the effect of Golgi stress on HLA-G expression on follicular T and B cell surface

    MİRAY KAVUZLU

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    Tıbbi BiyolojiBaşkent Üniversitesi

    Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. BİLKAY BAŞTÜRK

  2. Tez No

    775034

    ATP11C'nin pre-B hücrelerinin IgM+ B hücrelerine farklılaşması üzerine etkisinin araştırılması

    Investigation of the effect of ATP11C on differentiation of pre-B cells into IgM+ B cells

    SEDA ARAL

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    Allerji ve İmmünolojiTrakya Üniversitesi

    Biyoteknoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ MEHMET YABAŞ

  3. Tez No

    458354

    Meme kanseri radyoterapisinde hasta solunum hareketlerinin doz dağılımına etkisinin araştırılması

    Investigation of the effect of patient respiratory motion on the dose distribution in breast cancer radiotherapy

    NAZMİYE DÖNMEZ KESEN

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2016

    Fizik ve Fizik Mühendisliğiİstanbul Üniversitesi

    Temel Onkoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HATİCE BİLGE BECERİR

  4. Tez No

    596692

    Bazı kimyasal maddelerin kefir üretimi üzerine etkilerinin incelenmesi

    Investigation of the effect of chemicals on kefir productions

    SÜMEYYE NUR CİHANGİR

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    Gıda MühendisliğiKafkas Üniversitesi

    Gıda Hijyeni ve Üretimi Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. UFUK KAMBER

  5. Tez No

    270320

    Farklı depolama koşullarının zenginleştirilmiş makarnanın vitamin içeriği üzerine etkisinin incelenmesi

    Investigation of the effect of different storage conditions on vitamin content of fortified pasta product

    DİLAY KÜTÜK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2010

    Gıda MühendisliğiHacettepe Üniversitesi

    Gıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HAMİT KÖKSEL

Geri Dön