Evaluation of the early neutrophil response to candida albicans bloodstream infection
Kandidemi etkeni candida albicans'a karşı nötrofil yanıtının erken dönemde incelenmesi
- Tez No: 681732
- Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ ÖZLEM DOĞAN, PROF. DR. FÜSUN CAN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Mikrobiyoloji, Microbiology
- Anahtar Kelimeler: Candida albicans, Kandida, Morfoloji, Nötrofiller, Candida albicans, Candida, Morphology, Neutrophils
- Yıl: 2021
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Koç Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Tıbbi Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Candida albicans, insanlarda kan dolaşımı enfeksiyonuna (kandidemi) sebep olan başlıca mantar ajanıdır. Normal mikrobiyota elementi olarak C. albicans, sağlıklı insanların %30'undan %70%'ine kadar deri, ürogenital bölge veya bağırsak mucozasında görülmektedir. Risk faktörlerinin ortamda bulunmasıyla ve C. albicans virülans faktörlerinin katkısıyla C. albicans, komensal halden fırsatçı patojen fazına geçmektedir. C. albicans'ın en önemli patojenez özelliklerinden biri de morfoloji değişikliğine gidebilmesidir. Nötrofiller ise kankidemiye karşı en etkili ve önemli savunma hücrelerimizdendir. Nötrofillerin, C. albicans'ın sebep olduğu enfeksiyonun değişen aşamalarına verdiği cevaplar henüz tam olarak aydınlatılamamıştır. Bu çalışma, nötrofillerin C. albicans'ın farklı fenotiplerine karşı erken dönemdeki yanıtını, moleküler ve hücresel bakış açılarıyla araştırmayı amaçlamaktadır. Nötrofiller, sağlıklı gönüllülerden toplanmıştır ve MO1:1 oranında, opsonize C. albicans'ın maya ve hif formlarının her biriyle 30 dakika, 1 saat ve 4 saat olarak inkübe edilmiştir. Tüm deney setleri Gram (+) (S. aureus) ve Gram (-) (E. coli) kontroller de içermektedir. Mikroorganizmalar ile, ilgili sürelerde uyarılmadan sonra nötrofil aktivasyonu birçok metot ile ölçülmüştür. Örneğin, qRT-PCR ile myeloperoksidaz (MPO) ve nötrofil elastaz (ELANE) ekspresyonu, akış sitometrisi ile CD66b ve CD11b yüzey reseptörleri, ELISA metodu ile farklı sitokin salınımları, konfokal mikroskop ile nötrofil-C. albicans etkileşimi gösterilirken nötrofillerin C. albicans üzerindeki öldürme etkisi de koloni sayma metodu ile analiz edilmiştir. MPO (10.97 kat) ve ELANE (7.49 kat) ekpresyon analizlerinde, tüm inkübasyon zamanlarında en yüksek aktivasyon diğer mikroorganzimalara kıyasla C. albicans hif formuna karşı gözlemlenmiştir (p<0.05). Yüzey aktivasyon belirteci analizinde, ilk 1 saat etkileşim sonrası nötrofillerin CD66b seviyesi C. albicans maya formuna (39%) kıyasla, hif formuna (69%) karşı daha çok artmıştır (p:0.007). ELISA sonuçlarına göre, C. albicans hif formuna karşı anlamlı olarak sentezlenmese de, nötrofiller 4 saat etkileşim sonrası C. albicans maya formuna karşı IL-17A salgılamaktadır (p<0.05). Ayrıca, nötrofiller ve canlı, opsonize-C. albicans arasındaki etkili ve öldürücü fagositik etkileşim konfokal görüntülenme ile gözlemlenmiştir. Sonuç olarak, bu çalışma ile nötrofillerin C. albicans'ın farklı morfotiplerine, belirli zaman aralıklarında verdiği yanıtı aydınlatılmaya çalışılmıştır. Bütün deney setlerimiz desteklemektedir ki, nötrofiller primer olarak oksidatif mekanizmalarını, granüler enzimlerini ve fagositik etkilerini kullanarak C. albicans hif formunu elimine etmeye çalışmaktadır. Birden fazla aşamalara ayrılan bu enfeksiyonda, nötrofiller ilk 1 saat içinde patojene karşı maksimum yanıtı göstermektedir.
Özet (Çeviri)
Candida albicans is the most common isolated fungal agent from bloodstream infections caused by Candida spp. (candidemia) in human. C. albicans normally colonizes at the skin, urogenital or intestinal mucosa of 30-70% of healthy individuals. With the contribution of the risk factors C. albicans could derive from commensal form to opportunistic pathogen form in the infection course which is directly associated with the induction of key virulence factors of C. albicans such as ability to change morphotype. Neutrophils are the most effective and important defence elements in candidemia. The different responses of neutrophils to commensal, colonization, and infection phases of C. albicans at the stages of infection have not yet been fully elucidated. This study aims to investigate the early response of neutrophils against C. albicans different morphologies in molecular and cellular aspects. Neutrophils were collected from healthy volunteers and incubated with yeast and hyphae form of opsonized-C. albicans for 30 min, 1 h and 4 h at MOI:1 infectious dose. All experimental sets were included one Gram (+) (S. aureus) and one Gram (-) (E. coli) bacteria as controls. After stimulation, neutrophil activation was investigated with the expression analysis of myeloperoxidase (MPO) and neutrophil elastase (ELANE) by qRT-PCR, detection of surface receptors as CD66b and CD11b by flow cytometry, determining of different cytokines release by ELISA and the activation demonstrated by confocal microscopy also the candidacidal activity of human neutrophils assay conducted with colony counting. In all time intervals, the highest expression level of MPO (10.97 folds) and ELANE (7.49 folds) were detected to C. albicans hyphae form when compared to other microorganisms (p<0.05). From the surface activation marker side, in one hour of interaction, CD66b level of neutrophils encountering with live C. albicans (69%) was stimulated more than heat-killed form of C. albicans (39%) (p:0.007). IL-17A secretion results of C. albicans heat-killed stimulated neutrophils demonstrated that significant increases at 4 hours of interaction (p<0.05) while any significant IL-17A cytokine increase was not observed against C. albicans hyphae morphotype. Also, the effective and lethally phagocytic interest of human neutrophils against opsonized-Candida is also observed with the confocal images. Overall, the unique comparisons of the C. albicans morphotypes described in this study offer a new approach on neutrophil and C. albicans interactions in the context of different time-manner of the infection. All our experiments show us neutrophils trying to defeat principally the hyphae form of C. albicans by using their oxidative mechanism, granular enzymes, and phagocytic effects. The infection between C. albicans and neutrophils occurs with the perfect timing which is the neutrophil activation peaked at the first 1 hour of interaction.
Benzer Tezler
- Sepsis ön tanısıyla yatan hastalarda hemogram alt parametrelerinin tanı açısından değerlendirilmesi
Başlık çevirisi yok
HANDE GİZEM ÖZALP
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2024
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıDicle ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MUSTAFA TAŞKESEN
- Ani sensörinöral işitme kaybı olan ve hiperbarik oksijen tedavisi alan hastalarda nötrofil-lenfosit oranı (NLO), platelet-lenfosit oranı (PLO) ve sistemik immün inflamasyon indeksinin (SII) tedavi yanıtı ile ilişkisinin değerlendirilmesi
Evaluation of the relationship between neutrophil-to-lymphocyte ratio (NLR), platelet-to-lymphocyte ratio (PLR) and systemic ımmune-ınflammation ındex (SII) and treatment response in patients with sudden sensorineural hearing loss receiving hyperbaric oxygen therapy
FATMA DİDEM KESLER
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2025
Deniz ve Sualtı HekimliğiSağlık Bilimleri ÜniversitesiSualtı Hekimliği ve Hiperbarik Tıp Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ABDULLAH ARSLAN
- Acil servise aortik acillerle başvuran hastalarda mortalite oranları ile delta nötrofil indeksi arasındakı ilişkinin değerlendirilmesi
Evaluation of the relationship between mortality rates and delta neutrophil index in patients presenting to the emergency department with aortic emergencies
MİRAÇ ÖZCAN
- Yenidoğan yoğun bakım yatış endikasyonu olan 35 hafta ve üzeri doğan yenidoğanlarda sistemik inflamatuvar respons indeks parametrelerinin araştırılması
Evaluation of systemic inflammatory response index parameters in newborns born at ≥35 weeks of gestation and admitted to the neonatal intensive care unit
MUHSİN ÖZDEMİR
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2025
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıSakarya ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. MELTEM KARABAY
- Yüksek doz steroid tedavisi verilen çocuk hastaların ve tedaviye bağlı erken dönem yan etkilerin değerlendirilmesi
Evaluation of pediatric patients that have pulse steroid treatment and early side effects due to treatment
GÜLBARAN KONCAK
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2021
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıSağlık Bilimleri ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Eğitimi Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ORKUN TOLUNAY