Diklofenak sodyum'un kolorektal kanser hücrelerinde adezyon molekülleri ve apopitozise etkisi
Effect of diclofenac sodium on adhesion molecules and apoptosis in colorectal cancer cells
- Tez No: 682021
- Danışmanlar: PROF. DR. MUTAY AYDIN ASLAN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2021
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Akdeniz Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 83
Özet
Amaç: Siklooksijenaz-2 (COX-2), çeşitli insan kolorektal kanser hücrelerinde yapılır ve karsinojeneze katkıda bulunabilir. Bu çalışmada, selektif bir COX-2 inhibitörü olan diklofenak'ın insan kolon adenokarsinom hücrelerinde hücre adezyon molekülleri ve apoptoz üzerindeki etkilerinin araştırılması amaçlanmıştır. Yöntem: CD44, hücreler arası adezyon molekülü-1 (ICAM-1, CD54), vasküler hücre adezyon molekülü-1 (VCAM-1, CD106) ve epitel hücre adezyon molekülü (EpCAM, CD326) seviyeleri, yüksek seviyede COX-2 ifade eden (HT29) veya COX-2 ifade etmeyen (HCT116) kanser hücrelerinde değerlendirildi. Hücre canlılığı, MTT testi ile belirlendi, COX-2 protein seviyeleri ve aktivitesi, sırasıyla immünofloresan ve florometrik analiz ile değerlendirildi. Endojen çoklu doymamış yağ asitlerinin (PUFA) seviyeleri sıvı kromatografi-tandem kütle spektrometresi (LC-MS/MS) ile ölçülürken hücre adezyon moleküllerinin ekspresyonu akış sitometrisi ile analiz edildi. Apoptoz seviyelerini belirlemek için Annexin V–FITC/propidyum iyodür etiketleme ve florometrik kaspaz-3 aktivite ölçümleri yapıldı. Bulgular: Akış sitometrisi analizi, HCT116 hücrelerinde CD44 ve ICAM-1 boyama yüzdesinin HT29 hücrelerine kıyasla önemli ölçüde daha düşük olduğunu ortaya çıkardı. HT29 hücrelerinde COX-2 ekspresyonu ve aktivitesi forbol-12-miristat 13-asetat (PMA) ile indüklendiğinde, CD44 ve ICAM-1 seviyelerinde belirgin bir artış görüldü. HT29 hücrelerinde PMA yoluyla indüklenen COX-2 aktivitesi diklofenak tarafından inhibe edildiğinde CD44 ve ICAM-1 seviyelerinde belirgin bir azalma görüldü. HT29 hücrelerinin diklofenak ile muamele edilmesi sonucunda PUFA seviyelerinde anlamlı bir artış görüldü. HT29 hücrelerinde COX-2 aktivitesi PMA ile uyarıldığında diklofenakla ilişkili PUFA artış anlamlı ölçüde azaldı. Diklofenak ve PMA'nın beraber uygulanması, kontrol gruplarına kıyasla kolon adenokarsinom hücrelerinde apoptotik hücre sayısını ve kaspaz-3 aktivitesini önemli ölçüde artırdı. Sonuç: Diklofenak'ın koruyucu etkisi, yüksek seviyede COX-2 eksprese eden kolon kanseri hücrelerinde görülmektedir. Bu koruyucu etki, apoptozun indüklenmesi, CD44 ve ICAM-1 ekspresyonunun azalmasıyla meydana gelmektedir.
Özet (Çeviri)
Objective: Cyclooxygenase-2 (COX-2) is expressed in a variety of human colorectal cancer cells and can contribute to carcinogenesis. This study aimed to investigate the effect of diclofenac, a selective COX-2 inhibitor, on cell adhesion molecules and apoptosis in human colon adenocarcinoma cells. Method: Levels of CD44, intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1, CD54), vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1, CD106) and epithelial cell adhesion molecule (EpCAM, CD326) were evaluated in cancer cells overexpressing (HT29) or not expressing (HCT116) COX-2. Cell viability was determined by MTT assay, COX-2 protein levels and activity were assessed by immunofluorescence and fluorometric analysis, respectively. Endogenous levels of polyunsaturated fatty acids (PUFA) were measured by liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) while expression of cell adhesion molecules were analyzed by flow cytometry. Annexin V–FITC/propidium iodide-labelling and fluorometric caspase-3 activity measurements were carried out to determine apoptosis. Results: Flow cytometry analysis revealed that the percentage of CD44 and ICAM-1 staining in HCT116 cells were significantly lower compared to HT29 cells. Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA)-induced COX-2 expression and activity in HT29 cells caused a marked increase in CD44 and ICAM-1 levels which were down regulated by diclofenac. Stimulation of COX-2 activity in HT29 cells via PMA significantly decreased diclofenac associated increase in PUFA levels. Treatment of both diclofenac and PMA significantly increased the number of apoptotic cells and caspase-3 activity in colon adenocarcinoma cells compared to control groups. Conclusion: In conclusion, chemopreventive effect of diclofenac occurs in COX-2 overexpressing colon cancer cells by increased apoptosis and decreased expression of CD44 and ICAM-1.
Benzer Tezler
- Diklofenak sodyum'un akut unilateral subdural hematomlu sıçan hipokampusu üzerine etkilerinin histolojik, stereolojik, biyokimyasal yöntemlerle değerlendirilmesi
Potential effects of acute subdural hematoma (asdh) and diclofenac sodium therapy following asdh on the rat hippocampus by histopathological, stereological and biochemical methods
AYSIN PINAR TÜRKMEN
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2013
Histoloji ve EmbriyolojiOndokuz Mayıs ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SÜLEYMAN KAPLAN
- Diklofenak sodyum'un genotoksik aktivitesinin insan lenfosit hücrelerinde in vitro yöntemlerle araştırılması
Investigation of the genotoxic activity of diclofenac sodium in human lymphocyte cells by in vitro methods
NURAY GÖNCÜ
Yüksek Lisans
Türkçe
2023
BiyolojiEskişehir Teknik ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. BERRİN TÜYLÜ
- Diklofenak Sodyum'un plazmada analiz yönteminin geliştirilmesi ve konsantrasyon değişimlerinin izlenmesi
Analytic method development and monitoring the concentration changes of diclofenac sodium in plasma
GÜLSÜM GÜL
Yüksek Lisans
Türkçe
2009
Adli TıpAnkara ÜniversitesiDisiplinlerarası Adli Tıp Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GÜLİN GÜVENDİK
- Prenatal dönemde farklı dozlarda uygulanan diklofenak sodyumun merkezi sinir sistemi gelişimi üzerine toksik etkisinin araştırılması
The toxic effects of different doses of diclofenac sodium on the development of the central nervous system exposed during prenatal period
EBRU ELİBOL
Doktora
Türkçe
2014
Histoloji ve EmbriyolojiOndokuz Mayıs ÜniversitesiAnatomi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SÜLEYMAN KAPLAN
- Diklofenak ve metamizol sodyum'un siyatik sinir üzerine etkisinin histopatolojik olarak değerlendirilmesi
Rffect of histopathological evaluation of diclofenac AND metamizole sodium onsciatic nerve
HABİB BOSTAN