Investigation of BCL-2 proteins in TH17 cell functions
BCL-2 proteinlerinin TH17 hücrelerindeki fonksiyonlarının araştırılması
- Tez No: 684069
- Danışmanlar: DOÇ. DR. AYTEN NALBANT ALDANMAZ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Allerji ve İmmünoloji, Allergy and Immunology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2021
- Dil: İngilizce
- Üniversite: İzmir Yüksek Teknoloji Enstitüsü
- Enstitü: Mühendislik ve Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Interleukin 17 sitokinini üreten T yardımcı hücreleri , CD4+ T hücrelerinin özelleşmiş bir alt türüdür. T yardımcı 17 hücreleri, konak savunma mekanizmasında bağışıklık yanıtı oluşmasında önemli bir yere sahiptir. Th17 hücrelerinin disregülasyonu çeşitli otoimmün hastalıkları ve kanser türlerinin patolojilerinde rol oynamaktadır. Bcl-2 ailesi proteinleri apoptotik hücre ölümünün en iyi bilinen regülatorleridir. Th17 hücrelerinin apoptotik ve yaşamsal mekanizmaları da yeterince bilinmemektedir. Bu sebeple bu çalışmanın amaçları, Bcl-2 protein ailesinin Th17 hücrelerinin hücresel yaşamındaki fonksiyonlarının araştırılması ve Th17 hücrelerinin apoptoz mekanizmalarındaki regülasyon sisteminin anlaşılmasıdır. Bu kapsamda da sağlıklı insan kanından Ficoll ile periferik kan mononükleer hücreler elde edilmiş, naif T hücreleri bu hücrelerden ayrıştırılmış ve Th17 polarize koşullar altında kültüre konmuştur. Th17 hücreleri fenotipik akış sitometrisi ile karakterize edilmiştir. Ardından hücre lizatları, Th0 ile Th17 hücre kültürlerden farklı zamanlarda elde edilmiştir. Ardından insan RORC2 transkripsiyon faktörünün , Bcl-2 ailesinin pro-apoptotik üyeleri Bik, Bid, Bim ve Puma ile anti-apoptotik üyeleri Mcl-1 ve Bcl-xL'in hücre gruplarındaki ifadeleri Western blotlama yöntemi ile belirlenmiştir. Çalışmalar doğrultusunda artan RORC2 ve artan RORC/IL17A seviyelerindeki sitokin fenotipiyle saptanan Th17 farklılaşmasıyla birlikte orantılı şekilde anti-apoptotik Bcl-2 ailesi üyeleri Bcl-xL ve Mcl-1 proteinin ifadelerinde artış gözlemlenirken, pro-apoptotik Bcl-2 ailesi üyelerinden Puma ve Bim ifadelerinde azalış gözlemlennmiştir. Bik ifadesine her iki hücre grubunda da rastlanamamıştır. Bid proteinin de kesilmiş versiyonu olan apoptotik t-Bid ifadesi belirlenememiştir ve kesilmemiş Bid ifadesinde belirgin bir farklılık saptanamamıştır. Bu çalışmanın çıktıları Bcl-2 ailesi proteinlerinin insan Th17 hücresel yaşamındaki dinamiklerini anlamamıza olanak sağlamıştır. Bcl-2 proteinlerinin Th17 hücrelerindeki rollerini anlamak, Th17 ilişkili hastalıklarına gelecekte çeşitli terapötik yaklaşımların geliştirilmesine yardımcı olacaktır.
Özet (Çeviri)
Interleukin 17 producing T helper 17 cells are the distinct subset of CD4⁺ T cells. Th17 cells are an important part of the immune response of host defense. Dysregulation of Th17 cells plays a role in various pathologies including autoimmune diseases and cancer types. Bcl-2 family proteins are mostly known regulators of apoptotic cell death. The apoptotic and survival mechanisms of Th17 cells are not well known yet. Therefore, this study aims to investigate Bcl-2 protein family functions in Th17 cell survival and to understand the regulation network of apoptotic mechanisms of Th17 cells. To do that, Peripheral Blood Mononuclear Cells were isolated from a healthy buffy coat by Ficoll separation. Naive T cells were sorted from PBMC and cultured under Th17 polarizing conditions. Th17 cells were phenotypically characterized by flow cytometry. Afterward, cell lysates were obtained from Th0 and Th17 cells at different time points. The expressions of human transcription factor RORC2, proapoptotic Bik, Bid, Puma and Bim and, antiapoptotic Mcl-1 and Bcl-xL at cell groups were detected by Western blotting. The increased expressions of Bcl-xL and Mcl-1 were detected where the diminished expressions of Bim and Puma were detected in proportional with Th17 differentiation by increased RORC2 and elevated RORC/IL17A levels. Bik was undetectable in both cell groups while non-truncated isoform of Bid was barely decreased among cell groups. Outputs of this study allow us to understand the dynamics of Bcl-2 family proteins in human Th17 cell survival. The understanding roles of Bcl-2 proteins in Th17 cells may help to develop different therapeutics for Th17 associated diseases in the future.
Benzer Tezler
- Investigation of the effects of IL-7 on the Th17 T cell apoptosis
İnterlökin 7'nin Th17 T hücrelerinin apoptozundaki etkilerinin araştırılması
FATMAGÜL İLAYDA AYDINLI
Yüksek Lisans
İngilizce
2015
Allerji ve İmmünolojiİzmir Yüksek Teknoloji EnstitüsüMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. AYTEN NALBANT ALDANMAZ
- Bcl-2 ve Bcl-xL proteinlerinin yaşlanmaya bağımlı oksidatif strese karşı koruyucu etkilerinin maya modelinde incelenmesi
Investigation of the protective effects of Bcl-2 and Bcl-xL proteins against age-dependent oxidative stress in a yeast model
AYŞENUR GÜLER
Doktora
Türkçe
2025
BiyokimyaPamukkale ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. BERNA KAVAKCIOĞLU YARDIMCI
- Apopitozis yolak proteinleri ile infertilite arasındaki ilişkinin insan sperm hücrelerinde araştırılması
Investigation of the relationship between apopitozis pathway proteins and infertility in human sperm cells
KASIM GÜNEŞ
Yüksek Lisans
Türkçe
2017
Histoloji ve EmbriyolojiGaziosmanpaşa ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. FİKRET GEVREK
- Investigation of the effect of ellagic acid on the expression of some apoptotic proteins in lung injury-induced rats
Ellagik asitin akciğer hasarı oluşturulmuş sıçanlarda bazı apoptotik proteinlerin ifadesine etkisinin araştırılması
YOUSIF TAHA HUSSEIN
Yüksek Lisans
İngilizce
2020
BiyolojiFırat ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
Assoc. Prof. Dr. ABDULLAH ASLAN
- Alveoler kanser hücre dizilerinde apopitoz mekanizmaları üzerine bortezomibin etkilerinin araştırılması
Investigation of effects of bortezomib on apoptosis mechanisms in the alveolar cancer cell lines
ELVİN ALİYEV
Doktora
Türkçe
2015
BiyokimyaAtatürk ÜniversitesiTıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ABDULKADİR YILDIRIM