Geri Dön

Investıgatıng the effects of 5,10 methylenetetrahydrofolate reductase C677T polymorphısm on dıfferentıatıon of human mesenchymal stem cells

İnsan mezenkimal kök hücrelerinde 5,10-metilentetrahidrofolat redüktaz C677T polizmorfizm etkisinin farklılaşma üzerine etkisinin incelenmesi

PDF İndir

  1. Tez No: 684481
  2. Yazar: RENGİM VURAL
  3. Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ ZEYNEP TOKCAER KESKİN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Moleküler Tıp, Molecular Medicine
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2021
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Acıbadem Mehmet Ali Aydınlar Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Moleküler ve Translasyonel Biyotıp Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 75

Özet

İnsan metilentetrahidrofolat redüktaz, folat metabolizmasında rol alan, metionin ve homosistein konsantrasyonlarının düzenlenmesinde önemli yere sahip bir enzimdir. Türk toplumunda da sıkça görülen MTHFR C677T polimorfizmi, literatürde de sıkça bahsedildiği üzere birçok farklı hastalığın genetik arka planında bulunur, Mezenkimal kök hücreler kemik, kıkırdak ve yağ dokusu rejenarasyonunun ana kaynağı olduğu bilinmektedir. Kemik yoğunluğunu azaltan, kemik iliği kaynaklı mezenkimal kök hücrelerin (Kİ-MKH) apoptozuna sebep olan osteoklastların oluşumu tetikleyen MTHFR C677T polimorfizminin MKH farklılaşma kapasitesiyle arasında bir bağlantı olabileceği düşünülmüştür. Bunun için de MTHFR C677T polimorfizminin Kİ-MKHların morfolojisi, canlılığı, fizyolojisi ve farklılaşma kapasitesi üzerine etkisi araştırılmıştır. Etik kurul ve donor onamı alınan Kİ-MKHlar Acıbadem Labcell'den, RFLP ve dizileme yöntemi ile genotipleri (yabanıl tip, WT, C/C; heterozigot, HTZ, C/T; homozigot, HMZ, T/T) belirlenmek üzere temin edilmiştir. Klonalite özelliğini test etmek için CFU-F, proliferasyon farklılılarını belirlemek için MTT testi yapılmıştır. Farklılaşma potansiyellerini araştırmak için adipojenik, osteojenik ve kondrojenik farklılaşma protokolleri uygulanmıştır. Sonuçlar Graphpad Prism ile tek yönlü ANOVA testi kullanılarak istatiksel olarak analiz edilmiştir. Adipojenik farklılaşma analizi, HMZ genotipine sahip hücrelerin WT genotipine sahip hücrelerden anlamlı olarak daha fazla olduğunu göstermiştir. Osteojenik ve kondrojenik farklılaşma analizleri anlamlı bir sonuç vermemiştir. Fakat, WT ve HTZ genotipli hücreler kondrojenik farklılaşmaya yanıt verirken, HMZ genotipli hücreler farklılaşmamıştır. Sonuç olarak adipojenik farklılaşmanın MTHFR geniyle bağlantılı olduğu gösterilmiş oldu.

Özet (Çeviri)

The human 5,10-methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) enzyme has the key role in folate metabolism, regulation of methionine and homocysteine concentrations. MTHFR C677T polymorphism, which is frequently seen in Turkish society, is found in the genetic background of many different diseases, as it is frequently mentioned in the literature. Since mesenchymal stem cells (MSCs) are known to be the main source of bone, cartilage and adipose tissue regeneration, it was thought that there is maybe a link between MTHFR C677T polymorphism and MSC differentiation capacity. Bone-related diseases are also reported in association with MTHFR C677T polymorphism, which triggers formation of osteoclasts that cause apoptosis in bone marrow-derived mesenchymal stem cells (BM-MSCs) by causing a decrease in bone density. Therefore, the effect of MTHFR C677T polymorphism on morphology, viability, physiology and differentiation capacity of BM-MSCs have been investigated. For this purpose, wild-type (WT, C/C), heterozygous (HTZ, C/T) and homozygous (HMZ, T/T) primary human BM-MSCs were obtained from Acıbadem Labcell with ethics committee approval and donor consent. Mutation determination was performed by RFLP and sequencing methods. CFU-F and MTT assays were performed for colonization properties and proliferative differences, respectively. Adipogenic, osteogenic and chondrogenic differentiation was induced to investigate differentiation potential and results were statistically analyzed using one-way ANOVA with Graphpad Prism. It was found that adipogenic differentiation was significantly more in HMZ cells than WT cells. Osteogenic and chondrogenic differentiation results weren't statistically significant but it was observed that HMZ genotype cells didn't respond to induction of chondrogenic differentiation while there were responses from WT and HTZ genotypes. On the contrary, adipogenic differentiation potential was significantly linked to MTHFR genotype.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    594405

    Investigating the effects of 5,10-methylenetetrahydrofolate reductase C677T polymorphism on human mesenchymal stem cells by using CRISPR/CAS9 system as A gene editing tool

    İnsan mezenkimal kök hücrelerinde CRISPR/CAS9 genom düzenleme yöntemi ile 5,10- metilentetrahidrofolat redüktaz C677T zpolimorfizm etkisinin araştirilmasi

    BURCU TALUĞ

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2019

    BiyolojiAcıbadem Mehmet Ali Aydınlar Üniversitesi

    Medikal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ ZEYNEP TOKCAER KESKİN

    DR. ÖĞR. ÜYESİ EMRE DENİZ

  2. Tez No

    275471

    Antikoagülan kullanım endikasyonu olan hastalarda VKORC1 C1173T ve G-1639A gen polimorfizmlerinin farmakogenetik etkisinin araştırılması

    Investigation of pharmacogenetic effects of VKORC1 C1173T and G-1639A gene polymorphisms in patients with indications for the use of anticoagulant drugs

    FİLİZ ÇETİNKAYA

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2010

    BiyoteknolojiAnkara Üniversitesi

    Temel Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. AHMET RÜÇHAN AKAR

  3. Tez No

    541440

    Hipertansiyon hastalarında MTHFR gen varyasyonları ve homosistein düzeylerinin karotid-intima-media kalınlaşması üzerine etkilerinin incelenmesi

    Investigation of effects on carotid intima media thickness of mthfr gene variations and homocysteine levels in patients with hypertension

    SİBEL KURAŞ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    Moleküler Tıpİstanbul Üniversitesi

    Moleküler Tıp Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. SADRETTİN PENÇE

  4. Tez No

    307152

    Çocuk ve ergende dikkat eksikliği hiperaktivite bozukluğu'ndaki metilentetrahidrofolat redüktaz geni polimorfizminin moleküler genetik yöntemle araştırılması

    Molecular genetic investigation of methylenetetrahydropholate reductase gene polymorphism in children and adolescents with attention deficit hyperactivity disorder

    ALGUN TÜFEKÇİ

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2009

    Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıUludağ Üniversitesi

    Çocuk Ruh Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. YEŞİM TANELİ

  5. Tez No

    201107

    Karyotipi normal olarak belirlenen gebelik kayıplarının etiyolojisinde faktör II, faktör V, metilentetrahidrofolat redüktaz gen mutasyonlarının etkisi

    The effect of factor II, factor V, methylenetetrahydrofolate reductase gene mutations on the etiology of spontaneous abortions which have normal karyotype

    ELİF PALA

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2007

    Moleküler TıpGazi Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. BARBAROS BALABANLI

Geri Dön