Geri Dön

Suistimali artan pregabalinin idrarda analizine yönelik bir yöntem geliştirilmesi

Development of analytical method for analysis of pregabalin increasing abuse in urine

PDF İndir

  1. Tez No: 693661
  2. Yazar: EZGİ BENGİ
  3. Danışmanlar: PROF. DR. SERAP ANNETTE AKGÜR
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Adli Tıp, Eczacılık ve Farmakoloji, Kimya, Forensic Medicine, Pharmacy and Pharmacology, Chemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2021
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Ege Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Bağımlılık Toksikolojisi Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 52

Özet

Bir gabapentinoid olan pregabalin; epilepsi, fibromiyalji, nöropatik ağrı, yaygın anksiyete bozukluğu gibi terapötik endikasyonlarında, 150-600 mg/gün dozunda kullanımı onaylanmış ilaç etken maddesidir. Ülkemizde ve dünyada pregabalinin suistimal, zehirlenme, yoksunluk vaka raporları giderek artmaktadır. Suistimal amaçlı kullanım terapötik dozlardan daha yüksek olup yayınlanmış vaka raporlarında dozajlar 800-7500 mg/gün arasında değişmektedir. Pregabalin içeren ilaçlardan en çok ticari ismi bilinen Lyrica ve eşdeğerleri, ülkemizde 01.04.2019 tarihiyle“Yeşil Reçete ile Verilmesi Gereken İlaçlar”listesine alınmıştır. Pregabalin suistimalinin saptanabilmesi için biyolojik materyallerden doğru, güvenilir, hassas olarak analizi yapılmalıdır. Literatür araştırıldığında kromatografik analizinde kullanılan yöntemlerin sınırlı sayıda, mevcut olanların da verimliliğinin düşük olduğu saptanmıştır. Bu nedenle, suistimali artan pregabalinin analizine yönelik literature katkı sağlayacak bir yöntem geliştirmek önemlidir. Tez çalışmasının amacı; pregabalinin idrarda kromatografik analizine yönelik hızlı, güvenilir, hassas, maliyeti düşük, adli toksikolojide faydalanılabilecek bir yöntem geliştirmektir. Çalışmada, etik kurul onayıyla beraber gönüllülerden alınarak oluşturulan idrar havuzuyla pregabalin kapsülleri kullanıldı. Sıvı kromatografisi-ardışık kütle spektrometresi cihazında üç farklı ekstraksiyon yöntemi denenip analite ait alan değeri en yüksek olan yöntem seçildi. Bu yöntemde; 100 μl idrar örneği eppendorfa konuldu, 500 μl soğuk asetonitril eklenip 30 saniye vortekslendi. 10 dk -18 °C'de inkübe edildi. 10 dk 4100 rpm'de santrifüjlendi. Üst fazdan 500 μl başka cam tübe alındı. Üzerine 50 μl 0.2 M HCL (MeOH'da) eklenip 30 saniye vortekslendi. 550 μl örnek, azot altında uçuruldu. 550 μl mobil fazda çözüldü, vialler içerisine alınarak kromatografik ölçümlere uygun hale getirildi. Geliştirilen yöntem seçimlilik, doğrusallık, kesinlik, tekrarlanabilirlik, LOD, LOQ, matriks etkisi, stabilite, taşınma validasyon parametrelerince incelendi. Elde edilen verilerle yöntem pregabalin için oldukça seçimli bir yöntemdir. Cihazda yapılan ölçümler sonucunda 6 noktalı, 3 tekrarlı bir kalibrasyon eğrisi oluşturuldu. Kalibrasyon eğrisi doğrusal olup korelasyon katsayısı R2=0.9984'tür. Gün-içi tekrarlanabilirlik 500 ng/ml, 2500 ng/ml, 5000 ng/ml olmak üzere üç farklı derişimde 3 tekrarlı; günler-arası tekrarlanabilirlikte 500 ng/ml, 2500 ng/ml, 5000 ng/ml derişimlerindeki 3 derişim 3 tekrarlı 5 gün boyunca çalışıldı. Çalışmada elde edilen bağıl standart sapma değerleri %1.15-8.99 aralığındadır. Yöntemin 500 ng/ml, 2500 ng/ml, 5000 ng/ml derişimlerde yapılan pregabalin geri kazanım değerleri %53.17 ve %113.47 arasındadır. Yöntemde stabilite etkisi 1000 ng/ml derişimde pregabalinin olduğu idrar örnekleri -18°C'de bekletilerek 0. 1. ve 10. gün çalışılarak analizleri yapıldı, pregabalinin stabil olduğu belirlendi. Yöntemin LOD ve LOQ'sunda 500 ng/ml derişimde elde edilen kromatogramdan pik yüksekliği ve gürültü ölçülerek S/N oranı elde edildi, formüle göre yöntemin LOD'si 4.77 ve LOQ'su 15.92 olarak hesaplandı. Yöntemde matriks etkisi, 1000 ng/ml derişimde pregabalinin idrarda ve metanoldeki analizinden elde edilen alanları karşılaştırılarak matriks etkisi olmadığı saptandı. Yöntemde taşınma etkisi, 1000 ng/ml derişimdeki enjeksiyon sonrasında çözgen enjeksiyonu yapılarak sonraki enjeksiyona taşınma olup olmadığı bakıldı, taşınma olmadığı saptandı. Valide edilen yöntem pregabalin pozitif gerçek örneklere başarı ile uygulandı. Pregabalin reçetesi ve temininde, özellikle doktor ve eczacılar olmak üzere sağlık çalışanlarına yönelik, suistimal eden kişiler tarafından fiziksel ve psikolojik şiddet uygulandığı göz önüne alındığında gerekli yeni düzenlemelerin yapılmasının önemi artmaktadır. Pregabalin Türkiye'de ve dünyada suistimali artan bir madde olup hukuki olaylarda pregabalin analizine yönelik geçerli bir yöntemin olması önemlidir. Çalışma ile idrardan pregabalin analizi başarıyla gerçekleşmiştir. Geliştirilen yöntem etkili bir şekilde toksikoloji laboratuvarlarında rutin hizmette kullanılabilecek niteliktedir. Anahtar Kelimeler; Adli toksikoloji; gabapentinoidler; pregabalin; Lyrica; idrar; sıvı kromatografisi-ardışık kütle spektrometresi

Özet (Çeviri)

Pregabalin, a gabapentinoid; It is an active drug substance approved for use at a dose of 150-600 mg/day in therapeutic indications such as epilepsy, fibromyalgia, neuropathic pain, generalized anxiety disorder. Case reports of abuse, poisoning and withdrawal of pregabalin are increasing in our country and in the world. Abusive use is higher than therapeutic doses, with dosages ranging from 800-7500 mg/day in published case reports. Among the drugs containing pregabalin, Lyrica and its equivalents, whose trade name is known the most, were included in the list of“Green Drugs to be Given by Prescription”on 01.04.2019 in our country. In order to detect pregabalin abuse, an accurate, reliable and sensitive analysis of biological materials should be made. When the literature was searched, it was determined that the methods used in chromatographic analysis were limited in number and the efficiency of the existing ones was low. Therefore, it is important to develop a method that will contribute to the literature for the analysis of increased abuse of pregabalin. The aim of the thesis study; Our aim is to develop a fast, reliable, sensitive, cost-effective method for the chromatographic analysis of pregabalin in urine that can be used in forensic toxicology. In the study, pregabalin capsules were used with the urine pool created from the volunteers with the approval of the ethics committee. Three different extraction methods were tried in a liquid chromatography-sequential mass spectrometry device and the method with the highest area value of the analyte was selected. In this method; 100 μl of urine sample was placed in eppendorf, 500 μl of cold acetonitrile was added and vortexed for 30 seconds. It was incubated for 10 min at -18 °C. It was centrifuged at 4100 rpm for 10 min. 500 μl of the supernatant was taken into another glass tube. 50 μl of 0.2 M HCL (in MeOH) was added and vortexed for 30 seconds. 550 μl of sample was evaporated under nitrogen. 550 μl was dissolved in the mobile phase, taken into vials and made suitable for chromatographic measurements. The developed method was examined in terms of selectivity, linearity, precision, reproducibility, LOD, LOQ, matrix effect, stability, transport validation parameters. With the data obtained, the method is a highly selective method for pregabalin. As a result of the measurements made on the device, a calibration curve with 6 points and 3 repetitions was created. The calibration curve is linear and the correlation coefficient is R2=0.9984. Intra-day reproducibility 500 ng/ml, 2500 ng/ml, 5000 ng/ml in 3 different concentrations; 3 concentrations of 500 ng/ml, 2500 ng/ml, 5000 ng/ml concentrations were studied in 3 repetitions for 5 days with inter-day reproducibility. The relative standard deviation values obtained in the study are in the range of 1.15%-8.99%. Pregabalin recovery values of the method made at 500 ng/ml, 2500 ng/ml and 5000 ng/ml concentrations are between 53.17% and 113.47%. Stability effect in the method: Urine samples containing pregabalin at a concentration of 1000 ng/ml were kept at -18°C and analyzed on the 0, 1 and 10 days, and it was determined that pregabalin was stable. The S/N ratio was obtained by measuring the peak height and noise from the chromatogram obtained at 500 ng/ml concentration in the LOD and LOQ of the method, and the LOD of the method was calculated as 4.77 and the LOQ of 15.92 according to the formula. In the method, it was determined that there was no matrix effect by comparing the areas obtained from the analysis of pregabalin in urine and methanol at a concentration of 1000 ng/ml. In the method, the effect of transport, after the injection at a concentration of 1000 ng/ml, the solvent injection was performed to see if there was any transport to the next injection, and it was determined that there was no transport. The validated method was successfully applied to pregabalin positive real samples. Considering that physical and psychological violence is practiced by abusers, especially doctors and pharmacists, in the prescription and supply of pregabalin, the importance of making the necessary new regulations increases. Pregabalin is a substance with increasing abuse in Turkey and in the world, and it is important to have a valid method for pregabalin analysis in legal cases. The analysis of pregabalin from the urine was successfully performed with the study. The developed method can be effectively used in routine service in toxicology laboratories. Keywords; Forensic toxicology; gabapentinoids; pregabalin; urine; Lyrica; liquid chromatography-tandem mass spectrometry

Benzer Tezler

  1. Tez No

    638007

    Adli vakalarda pregabalin kullanımı ve suistimalinin toksikolojik değerlendirilmesi

    Toxicological assessment of pregabalin use and abuse in criminal cases

    CEYDA TEKER

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2020

    Adli TıpEge Üniversitesi

    Bağımlılık Toksikolojisi Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. SERAP ANNETTE AKGÜR

  2. Tez No

    450045

    Mühimme Defterlerine göre Osmanlı Devleti'nde eşkıyalık hareketleri (1626-1631)

    Brigandage incidences in the Ottoman Empire according to Mühimme Books (1626-1631)

    MİHRİBAN ARTAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2016

    TarihMardin Artuklu Üniversitesi

    Tarih Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. İBRAHİM ÖZCOŞAR

  3. Tez No

    426049

    İdrarda UR-144 ve metabolitlerinin LC-MS/MS ile tayinleri

    Determination of UR-144 and metabolites in urine with LC-MS/MS

    ERGÜN KARAOĞLU

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2016

    Adli TıpUludağ Üniversitesi

    Kriminalistik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. BELGİN İZGİ

  4. Tez No

    705864

    Sigorta sektöründe suistimaller ve önlenebilirliği üzerine bir araştırma

    A research on frauds and their preventability in the insurance industry

    SEVDA VURAL

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    SigortacılıkMarmara Üniversitesi

    Sigortacılık Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. NECLA TUNAY

  5. Tez No

    469554

    Parasal birim örneklemesi: İç denetimde kullanılması ve bir üretim işletmesi örneği

    Monetary unit sampling: Application in internal audit and a case of production company

    HASAN ÖZBAY

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2017

    İşletmeİstanbul Ticaret Üniversitesi

    Muhasebe Denetim Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. ALİ ALTUĞ BİÇER

Geri Dön