Eritropoietik hücre farklılaşması süresince gözlenen membran abnormalitelerinin SDS_PAGE yöntemi kullanılarak belirlenmesi
Determination of the membrane abnormalities occured during the differentation of erythropoietic cell by SDS-Page method
- Tez No: 70572
- Danışmanlar: PROF. DR. HÜSEYİN BAĞCI
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Tıbbi Biyoloji, Medical Biology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 1998
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Akdeniz Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 81
Özet
ÖZET Eritrosit membranının sodyum dodesilsülfat poliakrilamid jel elektroforezi (SDS-PAGE) analizi birbirinden farklı protein tiplerinin varlığını ortaya çıkartmış ve bunların büyük bir çoğunluğu tanımlanmıştır. Bugüne kadar eritrosit deformabilitesi, özellikle bir çok hemoglobinopati tipinde çalışılmıştır. Buna rağmen eritrosit membran proteinlerinin oksidasyonuna bağlı olarak ortaya çıkan membran bozuklukları ve bunların hemoglobinopatilerde gözlenen şiddetli anemi durumu ile olan klinik bağlantıları üzerine az sayıda çalışma yapılmıştır. Eritrosit membran proteinlerinin SDS-PAGE yöntemi ile elektroforetik olarak incelenmesi, bu hastalıkların klinik olarak tanımlanması ve teşhislerinde büyük önem taşımaktadır. Çalışmanın ilk aşamasında hemin ile eritroid farklılaşma için indüklenen K562 hücre hattında, insan eritrolökemia hücre hattı, farklılaşan eritroid hücrelerin membranlarında bulunan proteinlerin tanımlanabilmesi amaçlanmıştır. İkinci aşamada ise; eritroid farklılaşmanın yanı sıra, hücrelerin fenilhidrazin ile muamele edilmesi a globin zincir oksidasyonunu indüklendiği ve ? talasemi majör benzeri eritroid hücrelerin yaratılması amaçlanmış ve a globin zincir birikimi neticesinde ortaya çıkan serbest radikallerin spesifik olarak hangi tip membran proteinlerini etkilediğine bakılmıştır. K562 hücrelerinin hemin ile indüklenmesi sonrasında eritroid farklılaşmanın 2.,3.,4. ve 5. günlerinde fenilhidrazin ile muamele edilerek membran proteinleri izole edilmiştir. Farklıklılaşmanın belirtilen günlerinde fenilhidrazin ile muamele edilmemiş kontrol grubu hücrelerinden de membran proteinleri izole edilmiştir. Bu her iki gruptaki hücrelerin ve farklı günlerdeki hücrelerin membran proteinleri birbirleri ile karşılaştırıldığında bir farklılık gözlenememiştir. Sağlıklı bireylerden almış olduğumuz eritrositlerin fenilhidrazin ile muamele edilmesi sonucunda ise globin zincirinde ve protein 4.9 banımda değişimler gözlenmiştir. Hücre membran proteinlerini incelemek amacı ile kullandığımız SDS-PAGE yönteminin, çeşitli hemoglobinopatilerdeki membran protein anormalliklerini göstererek bu hastalıkların patogenezine ışık tutabilecek bir potansiyele sahip olduğu görüşündeyiz.
Özet (Çeviri)
ÖZET Eritrosit membranının sodyum dodesilsülfat poliakrilamid jel elektroforezi (SDS-PAGE) analizi birbirinden farklı protein tiplerinin varlığını ortaya çıkartmış ve bunların büyük bir çoğunluğu tanımlanmıştır. Bugüne kadar eritrosit deformabilitesi, özellikle bir çok hemoglobinopati tipinde çalışılmıştır. Buna rağmen eritrosit membran proteinlerinin oksidasyonuna bağlı olarak ortaya çıkan membran bozuklukları ve bunların hemoglobinopatilerde gözlenen şiddetli anemi durumu ile olan klinik bağlantıları üzerine az sayıda çalışma yapılmıştır. Eritrosit membran proteinlerinin SDS-PAGE yöntemi ile elektroforetik olarak incelenmesi, bu hastalıkların klinik olarak tanımlanması ve teşhislerinde büyük önem taşımaktadır. Çalışmanın ilk aşamasında hemin ile eritroid farklılaşma için indüklenen K562 hücre hattında, insan eritrolökemia hücre hattı, farklılaşan eritroid hücrelerin membranlarında bulunan proteinlerin tanımlanabilmesi amaçlanmıştır. İkinci aşamada ise; eritroid farklılaşmanın yanı sıra, hücrelerin fenilhidrazin ile muamele edilmesi a globin zincir oksidasyonunu indüklendiği ve ? talasemi majör benzeri eritroid hücrelerin yaratılması amaçlanmış ve a globin zincir birikimi neticesinde ortaya çıkan serbest radikallerin spesifik olarak hangi tip membran proteinlerini etkilediğine bakılmıştır. K562 hücrelerinin hemin ile indüklenmesi sonrasında eritroid farklılaşmanın 2.,3.,4. ve 5. günlerinde fenilhidrazin ile muamele edilerek membran proteinleri izole edilmiştir. Farklıklılaşmanın belirtilen günlerinde fenilhidrazin ile muamele edilmemiş kontrol grubu hücrelerinden de membran proteinleri izole edilmiştir. Bu her iki gruptaki hücrelerin ve farklı günlerdeki hücrelerin membran proteinleri birbirleri ile karşılaştırıldığında bir farklılık gözlenememiştir. Sağlıklı bireylerden almış olduğumuz eritrositlerin fenilhidrazin ile muamele edilmesi sonucunda ise globin zincirinde ve protein 4.9 banımda değişimler gözlenmiştir. Hücre membran proteinlerini incelemek amacı ile kullandığımız SDS-PAGE yönteminin, çeşitli hemoglobinopatilerdeki membran protein anormalliklerini göstererek bu hastalıkların patogenezine ışık tutabilecek bir potansiyele sahip olduğu görüşündeyiz.
Benzer Tezler
- Primer ve sekonder polistemili, esansiyel trombositozlu hastalarda matriks metalloproteinaz 2, 3, 9,10,13 düzeylerinin karşılaştırılması
Comparison of matrix metalloproteinase 2, 3, 9,10,13 levels in patients with primary and secondary polycythemia and essential thrombocytosis
SENEM MARAL
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2011
HematolojiFatih Üniversitesiİç Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ALİ KOŞAR
- Ratlarda demir yüklemesinin hematopoietik sistem, kemik iliği ve ilişkili genler üzerindeki etkisi
The effect of iron overload on hematopoietic system, bone marow and related genes in rats
ESİN GÜLEN
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2012
HematolojiAkdeniz Üniversitesiİç Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. AYŞEN TİMURAĞAOĞLU
- Astroglial hücre kültüründe eritropoietin ve interlökin-1 B'nin NGF ve nitrik oksid üretimi üzerine in vitro etkileri
In vitro effects of erythropoietin and interleukin-1 beta on production of nitric oxide and NGF in astroglial cell culture
BAŞAK BİNGÖL
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2002
BiyokimyaDokuz Eylül ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
DOÇ.DR. FİLİZ KURALAY
- Spinal füzyonda mezenşimal kök hücre ve eritropoetin kombinasyonunun etkinliği
The efficacy of mesenchymal stem cell and erythropoetin combination at spinal fusion
AHMET BURAK BİLEKLİ
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2014
Ortopedi ve TravmatolojiGATAOrtopedi ve Travmatoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ERBİL OĞUZ
- CD34 pozitif kemik iliği hücrelerinden dentritik hücre gelişiminde hepatosit growth faktörün rolü
Effects of hepatocyte growth factor on dentritic cell generation from bone marrow CD34(+) stem cells
ERCÜMENT OVALI
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
1998
Endokrinoloji ve Metabolizma HastalıklarıMarmara Üniversitesiİç Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. TEVFİK AKOĞLU