Geri Dön

Generation of pancreatic beta cell-like insulin-producing cells from induced pluripotent stem cells

Başlık çevirisi mevcut değil.

PDF İndir

  1. Tez No: 707401
  2. Yazar: BÜŞRA ÇETİN
  3. Danışmanlar: PROF. DR. AHTER DİLŞAD ŞANLIOĞLU
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Genetik, Genetics
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2022
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Akdeniz Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Gen ve Hücre Tedavisi Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 50

Özet

Amaç: Uyarılmış pluripotent kök hücrelerden (uPKHler) pankreatik beta hücresi benzeri insülin üreten hücre (İÜH) oluşturulmasını hedefleyen çalışmalar, diyabette beta hücre yıkımının/disfonksiyonunun telafisini amaçlamaktadır. Pankreas veya adacık transplantasyonları, yetersiz donör sayısı ve immun baskılama gerekliliği gibi dezavantajlarla ilişkilendirilmektedir. Ekzojen insülin uygulamasının da, hayat kurtarıcı nitelikte olmasına rağmen optimal düzelme sağlayamadığı, ve muhtemel uzun dönem komplikasyonları engelleyemediği bilinmektedir. Bireylerin kendi hücrelerinden elde edilen uPKHlerden oluşturulan İÜHlerden sınırsız beta hücre kaynağı elde edilebilme olasılığı ve immun baskılama gerekliliğinin ortadan kalkma/azalma potansiyeli heyecan yaratmaktadır; ancak optimum düzeyde etkin ve daha güvenli yaklaşımların gerekliliği de bilinmektedir. Çalışmamızda, iyileştirilmiş bir protokolle uPKHlerden beta hücre-benzeri İÜHler elde edebilmeyi hedefledik. Yöntem: İÜH eldesinde, beta hücre oluşum sürecinde anahtar sinyal yollarını aktive ettiği bilinen spesifik küçük moleküller ve diyabette koruyucu etkisi gösterilmiş olan TNF-Related Apoptosis-Inducing Ligand (TRAIL) molekülünü kullandık. uPKHlerin karakterizasyonları, morfolojik kriterlerin ve pluripotensinin doğrulanması ve mikoplazma analizi ile gerçekleştirildi. İÜH eldesindeki üç farklı aşama (definitif endoderm, pankreatik farklılaşma, ve beta hücresi benzeri İÜHlere farklılaşma), spesifik belirteçler için immunositokimyasal boyamalar ve insülin salınımının belirlenmesi için insülin ELISA analizi ile doğrulandı. Bulgular: Spesifik küçük moleküllerin ve sTRAIL'ın kullanıldığı bir protokolle insan uPKHlerinden İÜHler elde ettik. İÜH oluşumundaki farklı aşamalar, Sox17 ve FoxA2 (definitif endoderm); PDX-1 ve insülin (pankreatik farklılaşma); ve PDX-1, insülin, NeuroD1, Pax6 ve Islet-1 (İÜHlere farklılaşma) ekspresyonları ile doğrulandı. sTRAIL uygulaması ile insülin salınımında önemli artış gözlendi. Sonuç: Çalışmamızda kullandığımız kombine protokol, insülin salınımının sTRAIL ile artırıldığı güçlendirilmiş bir yaklaşım olarak yararlı olabilir.

Özet (Çeviri)

Objective: Studies on generation of pancreatic beta cell-like insulin-producing cells (IPCs) from induced pluripotent stem cells (iPSCs) aim to compensate for beta cell destruction/dysfunction in diabetes. Pancreas or islet transplantations are frequently associated with disadvantages such as insufficient number of donors and requirement for immunosuppression. Although exogenous insulin administration is life-saving, it is still not considered optimal, with possible long-term complications. IPCs generated from iPSCs originating from individuals' own cells have a great potential to provide an infinite beta cell source and eliminate/reduce requirement for immunosuppression; however, optimally efficient and safer strategies are still needed. In our study, we aimed to generate beta cell-like IPCs from IPSCs via an improved approach. Method: We used small molecules activating key signaling pathways throughout beta cell development and the TNF-Related Apoptosis-Inducing Ligand (TRAIL) molecule, the protective effect of which is frequently reported in diabetes. iPSC characterization was done via confirmation of morphological criteria and pluripotency, along with mycoplasma analysis. We identified three different stages (definitive endoderm, pancreatic differentiation, and differentiation into beta cell-like IPCs) via immunocytochemical stainings for specific markers and insulin ELISA assay for detection of the insulin release. Results: We obtained IPCs from human iPSCs via use of specific small molecules and sTRAIL. Differentiation into three distinct stages of beta cell-like IPCs were confirmed by expression of Sox17 and FoxA2 (definitive endoderm); PDX-1 and insulin (pancreatic differentiation); and PDX-1, insulin, NeuroD1, Pax6, and Islet-1 (differentiation into IPCs). Significantly increased insulin secretion was evident by sTRAIL application. Conclusion: The combined approach of IPC generation used in our study may be useful as an improved strategy, with enhanced insulin secretion in cells in response to different doses of sTRAIL stimulation.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    3079

    Streptozotosin ile deneysel diabet oluşturulan hayvanlarda bazı kan parametrelerinin incelenmesi

    Başlık çevirisi yok

    BELKİS ÜNVER

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1986

    BiyokimyaMarmara Üniversitesi

    Biyokimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. NESRİN EMEKLİ

  2. Tez No

    664719

    Talasemi major hastalarında sürekli kan transfüzyonuna bağlı diyabetes mellitus ve bozulmuş glukoz toleransı gelişme sıklığı ve risklerinin değerlendirilmesi

    .

    ŞERİFE GÜL KARADAĞ

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıSağlık Bakanlığı

    Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    DR. M. GÖNÜL AYDOĞAN

  3. Tez No

    682211

    Endokrin pankreas organoid yaşlanma modelinde mitokondri hasarının incelenmesi

    Investigation of mitochondrial damage in endocrine pancreatic organoid aging model

    DEREN ASLAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    BiyolojiKocaeli Üniversitesi

    Kök Hücre ve (Rejeneratif) Yenileyici Tıp Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. GÖKHAN DURUKSU

  4. Tez No

    150889

    Diabetes mellituslu vakalarda hücresel immün cevabın durumu

    Cellular immunity in Diabetes mellitus

    LÜTFİ GÖKMEN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    1985

    Endokrinoloji ve Metabolizma HastalıklarıAtatürk Üniversitesi

    İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı

  5. Tez No

    389744

    Kemik iliği kaynaklı mezenkimal kök hücre tabakası ile birlikte 3-boyutlu adacık dokusunun subkutan naklinin diyabetik sıçan modelinde etkinliğinin araştırılması

    Studying the efficiency of subcutaneous transplantation of bone marrow-derived mesenchymal stem cell sheet with 3-D islet tissue in diabetic rat model

    BÜŞRA ÖNCEL DUMAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    BiyomühendislikKocaeli Üniversitesi

    Kök Hücre Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. AYLA EKER SARIBOYACI

Geri Dön