Ratlarda beyin hipoksi reperfüzyon yaralanmasında kalsiyum dobesilatın etkilerinin araştırılması
Investigation of the effects of calcium dobesilate on brain hypoxia reperfusion injury in rats
- Tez No: 738042
- Danışmanlar: DOÇ. DR. MUSTAFA ÖĞDEN
- Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
- Konular: Nöroşirürji, Neurosurgery
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2022
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Kırıkkale Üniversitesi
- Enstitü: Tıp Fakültesi
- Ana Bilim Dalı: Beyin ve Sinir Cerrahisi Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 115
Özet
Serebral iskemi (inme) arteryel kan damarlarının daralması, tıkanması veya hipotansiyon sonrası beyne kan akışının yetersiz kaldığı ciddi bir klinik durum olup dünya çapında önemli bir ölüm ve maluliyet sebebidir. Hipoksi/reperfüzyon hasarında oksidatif stres, inflamasyon, nekroz, apoptoz ve otofaji önemli rol oynamaktadır. Literatürde serebral hipoksi/reperfüzyon hasarını azaltabilmeye yönelik birçok farmakolojik ajan hem deneysel hem de klinik çalışmalarda araştırılmış ancak etkinliği ispatlanmış bir farmakolojik ajan henüz tarif edilememiştir. Kalsiyum dobesilatın anti-trombotik, anti-inflamatuar, anti-oksidan, anti-otofajik ve anti-apoptotik etkilerinin olduğu bildirilmiştir. Ancak literatürde kalsiyum dobesilatın serebral hipoksi/reperfüzyon hasarındaki etkilerine yönelik herhangi bir çalışma bulunamamıştır. Bu çalışmada serebral hipoksi/reperfüzyon hasarının birçok basamağına etki edebileceği düşünülen kalsiyum dobesilatın oluşan hasar sonrasındaki nöroprotektif ve iyileştirici etkilerini araştırmak amaçlandı. Çalışmada 40 adet, 300-350 gr ağırlığında, Wistar albino erkek rat Kontrol grubu (cerrahi girişim uygulanmadı ve hiçbir farmakolojik ajan verilmedi, n=6+2); SHAM-A grubu (sadece cerrahi girişim uygulandı; n=6+2); DBL-A grubu (cerrahi girişim uygulandı ve 3 gün intraperitoneal 100 mg/kg/gün kalsiyum dobesilat verildi; n=6+2); SHAM-K grubu (sadece cerrahi girişim uygulandı; n=6+2); DBL-K grubu (cerrahi girişim uygulandı ve 10 gün intraperitoneal 100 mg/kg/gün kalsiyum dobesilat verildi; n=6+2) şeklinde gruplara ayrıldı Kontrol grubu dışındaki tüm ratlara sedasyon anestezisi sonrası ön boyun bölgelerine orta hattan vertikal insizyonla girildi ve her iki ana karotid arter ortaya konulup nervus vagustan ayrıldı. Daha sonra her iki ana karotid artere 30 dakika süreyle geçici anevrizma klibi yerleştirildi ve takiben anevrizma klipleri çıkarılıp reperfüzyon sağlandı. Cerrahi işlemden dört saat sonra ilgili gruplara kalsiyum dobesilat planlanan sürelerde verildi. Daha sonra belirlenen süreler sonunda tüm deneklere ötenazi uygulandı ve beyinleri tamamen çıkarılıp sol beyin hemisferleri histopatolojik (hemotoksilen ve eosin boyama) ve immünohistokimyasal (Beclin-1, anti-MHC class II ve anti-CD-68 boyama) inceleme için ve sağ hemisferleri biyokimyasal (“Enzyme Linked Immunoabsorbent Assay”,“Western Blot”ve spektrofotometri teknikleri) incelemeler için uygun şartlarda saklandı. Patolojik preparatlarda hipokampal kornu ammonis (CA1, CA2, CA3) bölgelerinde ve komşu paryetal korteks tabakasında nekrotik ve piknotik nöronlar sayıldı. Ayrıca immünohistokimyasal boyamalarla mikrogliaların M1 fenotip sayıları ve apopitoz düzeyleri belirlendi. Biyokimyasal incelemelerle TNF-α, IL-1β, IL-6, kaspaz-3, GSH/GSSG, malondialdehit, protein karbonil, LC3II/LC3I ve beclin-1 düzeyleri ölçüldü. Elde edilen verilere istatistiksel analizler uygulandı. Normal dağılan veriler ortalama±standart sapma ve normal dağılmayan veriler medyan (minimum-maksimum) olarak sunuldu. Akut ve kronik dönem grupları arasında normal dağılım gösteren bulgular One Way-Analysis of Variance (ANOVA) testi kullanılarak karşılaştırıldı ve post hoc değerlendirmede Tukey Multiple Comparisons testi kullanıldı. Normal dağılım göstermeyen veriler Krusskal-Wallis testi kullanılarak karşılaştırıldı ve ikili grup karşılaştırmalarında Mann-Whitney U testi kullanıldı. p
Özet (Çeviri)
Cerebral stroke, still an important cause of death and morbidity/disability worldwide is a serious clinical condition and oxidative stress, inflammation, necrosis, apoptosis, and autophagy play important roles in its pathogenesis. To reduce the destructive effects of stroke, many pharmacological agents have been investigated in many studies, but any pharmacological agent with proven efficacy has not yet been described in literature. Although calcium dobesilate (CD) has anti-thrombotic, anti-inflammatory, anti-oxidant, anti-autophagic, and anti-apoptotic effects, no investigation of its impact on cerebral stroke was found in literature. This study aimed to investigate the possible neuroprotective and healing effects of CD on cerebral hypoxia/reperfusion injury in rats. In this study, 40 Wistar albino male rats weighing 300-350 g were divided into Control group (no surgery was performed and no pharmacological agent was given, n=6+2); SHAM-A group (only surgery was performed; n=6+2); DBL-A group (surgery was performed and CD 100 mg/kg/day was administered intraperitoneally for 3 days; n=6+2); SHAM-K group (only surgery was performed; n=6+2); and DBL-K group (surgery was performed and 100 mg/kg/day CD was administered intraperitoneally for 10 days; n=6+2). After sedation anesthesia, both common carotid arteries of all rats except control group were exposed through a vertical midline anterior neck incision, and then, temporary aneurysm clips were placed on them for 30 minutes, and then, clips were removed and reperfusion was achieved. Four hours later, CD was given to the relevant groups at the scheduled times. Then, at the end of the specified periods, all subjects were euthanized and their brains were completely removed and stored for histopathological, immunohistochemical, and biochemical investigations. Necrotic and pycnotic neurons were counted in the hippocampal cornu ammonis (CA1, CA2, CA3) regions and adjacent parietal cortex layer histopathologically (hematoxylin and eosin staining). In addition, M1 phenotype numbers of microglia and apoptosis levels were determined immunohistochemically (Beclin-1, anti-MHC class II and anti-CD-68 staining). TNF-α, IL-1β, IL-6, caspase-3, GSH/GSSG, malondialdehyde, protein carbonyl, LC3II/LC3I, and beclin-1 levels were measured biochemically (“Enzyme-Linked Immunoabsorbent Assay”,“Western Blot”and spectrophotometry techniques). Parametric study findings between acute and chronic period groups were compared using One Way-Analysis of Variance (ANOVA) test, and post hoc evaluation was done using Tukey Multiple Comparisons test. Non-parametric data were compared using Kruskal-Wallis test, and Mann-Whitney U test was used for pairwise group comparisons. p
Benzer Tezler
- Deneysel serebral iskemi-reperfüzyon oluşturulmuş ratlarda memantin kullanımının koruyucu etkilerinin incelenmesi
Protective effect of memantin induced by cerebral ischemia and reperfusion injury in rats
HASAN HÜSEYİN ÖZDEMİR
- Hipoksik-iskemik serebral hasar oluşturulan yenidoğan rat modelinde allopürinolün kaspaz 3 ve kaspaz 8 aktivitesi ile nöroprotektif etkisinin değerlendirilmesi
Allopurinol's effect on caspase-3 and caspase-8 in hypoxic-ischemic newborn rats
KENAN ÖZCAN
Tıpta Yan Dal Uzmanlık
Türkçe
2009
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıÇukurova ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MEHMET SATAR
- Hipoksik iskemik beyin hasarı oluşturulan ve growth hormon uygulanan yeni doğan ratlarda beyin dokusunda piruvat kinaz aktivitesi, antioksidan sistem ve lipit peroksidasyonu
Pyruvate kinase activity, antioxidant system and lipid peroxidation in broin tissues of newborn rast with hypoxic ischemic encephalopathy treated with with growth hormone
HACER YAPICIOĞLU YILDIZDAŞ
Tıpta Yan Dal Uzmanlık
Türkçe
2003
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıÇukurova ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MEHMET SATAR
- Hipoksik iskemik serebral hasar oluşturulan yenidoğan ratlarda indometazin ve aminoguanidinin nöroprotektif etkileri
The neuroprotective effects of indomethacin and aminoguanidine in the newborn rats with hypoxic-ischemic cerebal damage
ERCAN TUTAK
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2003
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıÇukurova ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MEHMET SATAR
- Hipoksik iskemik beyin hasarı oluşturulmuş yeni doğan ratlarda intraperitoneal ozon uygulamasının morris su tankındaki spasyal bellek performansına etkisi
The effect of intraperitoneal ozone administration on spatial memory performance in morris water maze in newborn rats in which hypoxic ischemic brain injury was induced
BORA REŞİTOĞLU