Echinococcus granulosus'un sığır ve koyun izolatlarının moleküler karakterizasyonu, haplotip analizi ve miRNA ekspresyon düzeylerinin belirlenmesi
Molecular characterization of cattle and sheep isolates of echinococcus granulosus, haplotype analysis, and determination of miRNA expression levels
- Tez No: 763755
- Danışmanlar: PROF. DR. ERGÜN KÖROĞLU
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Genetik, Moleküler Tıp, Parazitoloji, Genetics, Molecular Medicine, Parasitology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2022
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Fırat Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Parazitoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 121
Özet
Kistik Ekinokokkozis (KE), Echinococcus granulosus'un larval formu tarafından oluşturulan, insanlarda ve ara konak hayvanlarda dünya çapında yaygın olarak görülen zoonotik bir helmint hastalığıdır. E. granulosus'taki genetik farklılıkların tespit edilmesi, hastalığın patojenitesi, bulaş yolu ve mücadele yöntemlerinin belirlenmesi bakımından önemlidir. E. granulosus'un konak ve parazit ilişkisindeki mekanizmaları açıklamaya çalışan yaklaşımlardan biri mikroRNA'lardır. Bu çalışmada sığır ve koyun orjinli hidatik kist izolatlarında E. granulosus s.l. genotip ve haplotip grupları belirlenerek, farklı kist yapılarında ve gruplar arasında, egr-miR-7, egr-miR-71 ve egr-miR-96 miRNA'larının ekspresyon seviyeleri karşılaştırılmıştır. Hedef miRNA'ların hastalığın tanısında biyobelirteç olarak kullanılabilme potansiyeli araştırılmıştır. Toplam 82 hidatik kist izolatından (41 sığır, 41 koyun) 81'inin genotipi, mt-CO1 gen bölgesine yönelik PCR ve sekans analizleriyle E. granulosus s.s. (G1 ve G3) olarak belirlenirken, sığır orjinli bir izolatın genotipi Echinococcus canadensis (G6/7) olarak tespit edilmiştir. Örneklerde toplam 26 nükleotid polimorfizmi ve 29 haplotip grubu belirlenmiştir. Steril kistlerde germinal membranlarda, fertil kistlerin germinal membran ve protoskolekslerinde miRNA ekspresyonları qRT-PCR ve Real Time PCR analizleri ile araştırılmıştır. E. canadensis (G6/7) örneği kontrol olarak seçilerek tüm haplotip gruplarındaki miRNA ekspresyon düzeyleri karşılaştırılmıştır. miRNA'ların 29 haplotip grubunun %79.31'inde yüksek, %10.345'inde düşük düzeyde eksprese olduğu belirlenmiştir. Koyun orjinli fertil 10 örnekte, protoskoleks yapısına kıyasla germinal membranda ortalamada egr-miR-7, egr-miR-71 ve egr-miR-96 miRNA'larının sırasıyla 44, 168 ve 351 kat yüksek düzeyde ekspresyon gösterdiği belirlenmiştir. Genotip ve haplotip grupları arasında yüksek oranda istatistiki olarak anlamlı olan ekspresyon düzeyi farklılıkları tespit edilmiştir. Sonuç olarak, egr-miR-7, egr-miR-71 ve egr-miR-96 miRNA'larının ve özellikle egr-miR-96'nın aktif KE teşhisinde biyobelirteç olarak kullanılabilme potansiyelinin olabileceği gösterilmiştir.
Özet (Çeviri)
Cystic Echinococcosis (CE) is a zoonotic helminth disease caused by the larval form of Echinococcus granulosus, which is common in humans and intermediate host animals worldwide. Detection of genetic differences in E. granulosus is important in terms of determining the pathogenicity of the disease, transmission route and control methods. One of the approaches trying to explain the mechanisms in the host-parasite relationship of E. granulosus is microRNAs. In this project, E. granulosus s.l. genotype and haplotype groups were determined in hydatid cyst isolates of cattle and sheep origin, and the expression levels of egr-miR-7, egr-miR-71 and egr-miR-96 miRNAs were compared in different cyst structures and between groups. The potential of target miRNAs to be used as a biomarker in the diagnosis of the disease was investigated. Genotypes of 81 out of 82 hydatid cyst isolates (41 cattle, 41 sheep) were determined by PCR and sequence analyzes for the mt-CO1 gene region of E. granulosus s.s. (G1 and G3), the genotype of an isolate of cattle origin was Echinococcus canadensis (G6/7). A total of 26 nucleotide polymorphisms and 29 haplotype groups were identified in the samples. miRNA expressions in germinal membranes of sterile cysts and germinal membrane and protoscoleces of fertile cysts were investigated by qRT-PCR and Real Time PCR analyses. E. canadensis (G6/7) sample was selected as control and miRNA expression levels in all haplotype groups were compared. It was determined that miRNAs were expressed at high levels in 79.31% of 29 haplotype groups and at low levels in 10.345%. In 10 fertile samples of sheep origin, egr-miR-7, egr-miR-71 and egr-miR-96 miRNAs were found to be 44, 168, and 351-fold higher in expression, respectively, in the germinal membrane compared to the protoscolex structure. High statistically significant differences in expression levels were detected between genotype and haplotype groups. In conclusion, it has been shown that egr-miR-7, egr-miR-71 and egr-miR-96 miRNAs, and especially egr-miR-96, may have the potential to be used as biomarkers in the diagnosis of active CE.
Benzer Tezler
- İnsan, koyun ve sığır kistik ekinokokozis izolatlarının nad-1 gen bölgesinin moleküler karakterizasyonu
Molecular characterization of the NAD1 gene region of human, sheep and cattle cystic echinococcosis isolates
GALİP SARISU
Doktora
Türkçe
2017
Moleküler TıpYüzüncü Yıl ÜniversitesiParazitoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ZEYNEP TAŞ CENGİZ
YRD. DOÇ. DR. YUNUS EMRE BEYHAN
- Echinococcus granulosus'un Doğu ve Güneydoğu Anadolu Bölgesi izolatlarının moleküler ayrımı
Molecular discrimination of East and Southeast Anatolian Region isolates of echinococcus granulosus
ARMAĞAN ERDEM ÜTÜK
Doktora
Türkçe
2008
ParazitolojiFırat ÜniversitesiParazitoloji (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ERGÜN KÖROĞLU
- Şanliurfa i̇li̇nde görülen e.granulosus suşlarinin PCR-RFLP yöntemi̇ i̇le genoti̇plendi̇ri̇lmesi̇
E.granulasus genotypıng by PCR-RFLP ın Şanlıurfa
CEMİLE GÜNBEGİ
Yüksek Lisans
Türkçe
2015
MikrobiyolojiHarran ÜniversitesiTıbbi Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. FADİLE YILDIZ ZEYREK
- Echinococcus granulosus'un sığır ve koyun izolatlarındaki antijen b (agb) gen polimorfizminin belirlenmesi ve serolojik tanı üzerindeki etkinliğinin araştırılması
Determination of antigen b (agb) gene polymorphism in cattle and sheep isolates of echinococcus granulosus and investigation of its effectiveness on serological diagnosis
HARUN KAYA KESİK
Doktora
Türkçe
2018
ParazitolojiFırat ÜniversitesiParazitoloji (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SAMİ ŞİMŞEK
- Echinococcus granulosus protoskolekslerinin in vitro geliştirilmesi ve antiparaziter ilaçların protoskolisidal etkilerinin araştırılması
Başlık çevirisi yok
ABDULLAH GÜVENLİ
Doktora
Türkçe
2005
MikrobiyolojiOndokuz Mayıs ÜniversitesiMikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ.DR. MURAT HÖKELEK