Geri Dön

İnsan retina epitel hücrelerinde prilokaine bağlı inflamasyonun araştırılması

Research of prilocaine-induced inflammation in human retinal pigment epithelial cells

  1. Tez No: 773462
  2. Yazar: ALEYNA ÖZTÜZÜN
  3. Danışmanlar: PROF. MUTAY AYDIN ASLAN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2022
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Akdeniz Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 73

Özet

Amaç: Prilokain (PRL) bölgesel anestezide sık kullanılan lokal anesteziktir. Göz içi cerrahisinde lokal anestezinin başarılı kullanımına rağmen kaza sonucu intravitreal enjeksiyon durumlarında lokal anesteziklerin retina üzerinde toksik etkileri oluşabilmektedir. Bu çalışma, PRL toksisitesi tarafından aktive edilen sinyal iletim yollarını inceledi ve insan retinal pigment epitel (ARPE-19) hücrelerinde nitrik oksit sentaz-2 (NOS2) inhibisyonunun koruyucu rolünü belirledi. Gereç ve Yöntemler: Hem PRL'nin toksik dozunu hem de bir NOS2 inhibitörü olan Asperglaucide'in (ASP) koruyucu etkinliğini belirlemek için toksisite analizi (MTT testi) yapıldı. Nükleer faktör kappa B p65 (NF–B p65), fosforile NF-B p65, fosfo AKT, NOS2, nitrotirozin, kesilmiş kaspaz-3 protein seviyeleri, immünofloresan boyama ve/veya western blot analizi ile değerlendirildi. Interlökin-6 (IL-6) ve nitrozile protein seviyeleri ELISA ile ölçülürken, kaspaz -3 aktivitesi ve nitrit/nitrat seviyeleri florometrik bir yöntemle belirlendi. Bulgular: NF-B p65, fosforile NF-B p65 ve fosforile AKT'nin PRL toksisitesinde önemli ölçüde arttığı gözlendi. Benzer şekilde, IL-6, NOS2, nitrit/nitrat ve nitrotirozin seviyeleri, kontrollere kıyasla PRL uygulanan hücrelerde önemli ölçüde daha yüksekti. ASP'nin PRL ile muamele edilmiş hücrelere uygulanması, NF-B p65, fosforile edilmiş NF-B p65 ve fosforile edilmiş AKT'yi önemli ölçüde azalttı. IL-6, NOS2, nitrit/nitrat ve nitrotirozin seviyeleri de PRL kaynaklı toksisitede ASP tedavisini takiben önemli ölçüde geriledi. Kaspaz-3'e bağlı apoptotik yolda aktivasyon gözlenmedi. Sonuç: Bu çalışma insan retinal epitel hücrelerinde PRL toksisitesine bağlı NF-B p65 aracılı sinyal yolu aktivasyonunu gösterdi ve ASP'nin koruyucu etkinliğini belirledi.

Özet (Çeviri)

Objectives: Prilocaine (PRL) is a commonly used local anesthetic. Despite the successful use of regional anaesthesia for intraocular surgery, toxic effects of local anesthetics can occur on the retina in cases of accidental intravitreal injection. This study examined signal transduction pathways activated by PRL toxicity and determined the protective role of nitric oxide synthase-2 (NOS2) inhibition in human retinal pigment epithelial (ARPE-19) cells. Materials and Methods: Toxicity analysis (MTT test) was performed to determine both the toxic dose of PRL and the protective efficacy of ASP, a NOS2 inhibitor. Nuclear factor kappa B p65 (NF–B p65), phosphorylated NF-B p65, phospho AKT, NOS2, nitrotyrosine, cleaved caspase-3 protein levels were evaluated by immunofluorescence staining and/or western blot analysis. Interleukin-6 (IL-6) and nitrated protein levels were quantified by immunoassay, while caspase -3 activity and nitrite/nitrate levels were measured via a fluorometric method. Results: It was observed that NF-B p65, phosphorylated NF-B p65 and phosphorylated AKT were significantly increased in PRL toxicity. Likewise, IL-6, NOS2, nitrite/nitrate and nitrotyrosine levels were significantly higher in PRL-treated cells compared to controls. Application of ASP to PRL treated cells significantly reduced NF-B p65, phosphorylated NF-B p65 and phosphorylated AKT to basal levels. IL-6, NOS2, nitrite/nitrate and nitrotyrosine levels were also considerably decreased following ASP treatment in PRL-induced toxicity. No activation was observed in the caspase-3-dependent apoptotic pathway. Conclusions: NF-B p65-mediated signal transduction pathway is activated due to PRL toxicity and can be down regulated by ASP. Supported by a grant from TUBİTAK #121S194 and BAP# TYL-2022-5989.

Benzer Tezler

  1. Yaşa bağlı makula dejenerasyonunda sirküle mikroRNA'larınpotansiyel biyobelirteç olarak tanımlanması ve adaybiyobelirteç olarak Hsa-mir-626'nın yolak araştırması

    Identification of circulating microRNAs as biomarkers in amdand investigation pathway analysis of Hsa-mir-626 as a potentialbiomarker

    ÇİLEM UZUNBACAK

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    BiyolojiYıldız Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NEHİR ÖZDEMİR ÖZGENTÜRK

  2. Doku plazminojen aktivatörlerinin retina pigment epitel hücreleri üzerindeki sitotoksik, genotoksik ve apoptotik etkilerinin araştırılması

    Investigation of cytotoxic, genotoxic and apoptotic effects of tissue plasminogen activators on retina pigment epithelial cells

    HAVVANUR BAYRAKTAR

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2020

    Göz HastalıklarıBezm-i Alem Vakıf Üniversitesi

    Göz Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. İBRAHİM ARİF KOYTAK

  3. Normal ve yüksek glukoz ile indüklenmiş diyabetik retinal pigment epitel (ARPE-19) hücrelerinde gemsitabin ve 5-FU kombinasyonunun oksidatif stres ve mitokondriyal apoptoz yolağı üzerine etkisi

    The effect of gemcitabine and 5-fu combination on oxidative stress and mitochondrial apoptosis pathway in normal and high glucose-induced diabetic retinal pigment epithelium (ARPE-19) cells

    ESMA SEBEN OK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    Tıbbi BiyolojiTrakya Üniversitesi

    Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ZEYNEP BANU DOĞANLAR

  4. Proliferatif vitreoretinopati tedavisinde doğal molekül hispidulin kullanımının in vitro modelde araştırılması

    Investigation of the use of natural molecule hi̇spi̇duli̇n i̇n the treatment of proliferative vitreoretinopathy i̇n an i̇n vi̇tro model

    SULTAN KAYA

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    Göz HastalıklarıTrakya Üniversitesi

    Göz Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ RÜVEYDE GARİP

  5. Metforminin invitro retina pigment epiteli hücrelerinde fibrogenezise olan etkisinin incelenmesi

    Investigation of the effect of metformin on fibrogenesis in invitro retina pi̇gment epi̇theli̇al cells

    RUKİYE ÇETİNKAYA

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    Göz HastalıklarıBezm-i Alem Vakıf Üniversitesi

    Göz Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. JÜLİDE CANAN UMURHAN AKKAN