Prostat kanserinde moleküler ve metabolik değişiklikleri hedeflemeye yönelik yeni tedavi stratejilerinin araştırılması
Investigation of new treatment strategies to target molecular and metabolic changes in prostate cancer
- Tez No: 806031
- Danışmanlar: PROF. DR. İLHAN YAYLIM
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Moleküler Tıp, Molecular Medicine
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2023
- Dil: Türkçe
- Üniversite: İstanbul Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Moleküler Tıp Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Moleküler Tıp Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 179
Özet
Kanser hücreleri biyokütle birikimi, enerji üretimi için artan talebi karşılamak ve redoks homeostazını sürdürmek için metabolik esneklik sergilemektedir. Farklı besin/nutrientlere olan bağımlılık kanser hücrelerinin tüm bu süreçlerin üstesinden gelmek için kendini adapte ettiği metabolik fenotipi belirlemektedir. Bu tez çalışması kapsamında, tip 2 diyabet tedavisinde yaygın olarak kullanılan metabolik bir ilaç olan metformin ile hazırlanan nanoformulasyonun (NPset&met) parental PC-3 ve bu hücrelerden zenginleştirilen prostat kanseri kök hücreleri (PKKH) üzerindeki olası anti-kanser etki mekanizmaları araştırılmıştır. PT hücrelerinden PKKH'ların başarılı bir şekilde zenginleştirildiği akım sitometrisi ve immunofloresans boyama yöntemleri ile gösterilmiştir. Farklı glikoz ve glutamin konsantrasyonlarının PC-3 ve PKKH'ların canlılığı üzerine olan etkisi MTT testi ve CytoTox-Glo™ sitotoksisite testi ile belirlenmiştir. Hücre içi ATP miktarı luminesans bazlı ATP kiti kullanılarak ölçülmüştür. Hücre ölümü analizleri akım sitometrisinde fosfatidilserin translokasyonu ve kaspaz 3/7 aktivitesi ölçülerek değerlendirilmiştir. Redoks homeostazı üzerine olan etkiler akım sitometrisinde süperoksit radikal ölçümü alınarak ve NAD+/NADH Glo kiti kullanılarak ölçülmüştür. Hücrelerde değişen metabolit seviyesi GC-MS ile saptanmıştır. Metastaz sürecine olan etkileri yara iyileşmesi, matrigel invazyon testi, 3B matrigel invazyon testi ve koloni formasyonu deneyleri ile değerlendirilmiştir. Metabolizma ve otofajik süreç ile ilişkili proteinler western blot yöntemi kullanılarak tespit edilmiştir. Sonuçlar, glikoz ve glutaminin prostat tümörü içerisinde yer alan farklı hücre popülasyonları için önemli metabolitleri temsil ettiğini ve metabolitlerin yoksunluğunun prostat kanser hücrelerinin çoğalmasını azalttığını göstermektedir. Ayrıca besin kısıtlamasının setuksimab hedefli metformin yüklü NP tedavisi ile kombinasyonun göstermiş olduğu güçlü sitotoksik etki, besin kısıtlaması ve hedefe yönelik tedavi kombinasyonun prostat kanseri için etkili bir terapötik fayda sağlayabileceğini göstermektedir.
Özet (Çeviri)
Cancer cells exhibit metabolic flexibility to accumulate biomass, meet increased demand for energy production, and maintain redox homeostasis. The dependence on different nutrients determines the metabolic phenotype that cancer cells adapt to overcome all these processes. Within the scope of this thesis, the possible anti-cancer effect mechanisms of nanoformulation (NPset&met) prepared with metformin, a widely used metabolic drug in the treatment of type 2 diabetes, on parental PC-3 and prostate cancer stem cells (PCSCs) enriched from these cells were investigated. Successful enrichment of PCSCs from PT cells has been demonstrated by flow cytometry and immunofluorescence staining methods. The effects of different glucose and glutamine concentrations on the viability of PC-3 and PCSCs were determined by the MTT test and the CytoTox-Glo™ cytotoxicity test. The amount of intracellular ATP was measured using the luminescence-based ATP kit. Cell death assays were evaluated by measuring phosphatidylserine translocation and caspase 3/7 activity in flow cytometry. Effects on redox homeostasis were measured by measuring the superoxide radical in flow cytometry and using the NAD+/NADH Glo kit. Altered metabolite level in cells was detected by GC-MS. The effects on the metastasis process were evaluated with wound healing, matrigel invasion test, 3D matrigel invasion test, and colony formation experiments. Proteins associated with metabolism and autophagic process were detected using western blot method. The results show that glucose and glutamine represent important metabolites for different cell populations within prostate tumor and that deprivation of metabolites reduces proliferation of prostate cancer cells. In addition, the strong cytotoxic effect of nutrient restriction in combination with cetuximab-target metformin-loaded NP therapy indicates that the combination of nutrients restriction and targeted therapy can provide an effective therapeutic benefit for prostate cancer.
Benzer Tezler
- Targeted metabolomics revealed a key metabolic reprogramming incholesterol biosynthesis pathway upon PTEN re-expression in PTEN-null, metastatic and castrationresistant prostate cancer
Hedefli metabolomiks yaklaşımı ile PTEN-noksan, metastatik ve kastrasyona-dirençli prostat kanserinde PTEN'ın yeniden ifadesi sonucu kolesterol metabolizmasındaki önemli bir metabolik yeniden programlamanın açığa çıkarılması
TAHA BUĞRA GÜNGÜL
Yüksek Lisans
İngilizce
2022
Biyolojiİhsan Doğramacı Bilkent ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ ONUR ÇİZMECİOĞLU
- Identification and targeting of deregulated metabolic pathways in metastatic prostate cancer cells
Metastatik prostat kanseri hücrelerinde deregüle edilen metabolik mekanizmaları ortaya çıkarmak ve hedeflemek
IRMAK KAYSUDU
Yüksek Lisans
İngilizce
2023
Biyolojiİhsan Doğramacı Bilkent ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ ONUR ÇİZMECİOĞLU
- Studies on the molecular mechanism of the drug metabolism in prostate cancer, PC3 cell lines
İlaç metabolizmasının prostat kanseri, pc3 hücre hattındaki, moleküler mekanizması ile ilgili çalışmalar
DERYA DİLEK KANÇAĞI
Doktora
İngilizce
2014
BiyokimyaOrta Doğu Teknik ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. NÜLÜFER TÜLÜN GÜRAY
DOÇ. DR. DİLEK TELCİ
- Farklı prostat kanseri hücre hatlarında epibrassinolidle tetiklenen apoptotik süreçte poliaminlerin rollerinin araştırılması
Investigation of the roles of polyamines in epibrasinolide-induced apoptosis in various prostate cancer cell lines
PINAR OBAKAN
- LNCaP hücrelerinde makrofaj kaynaklı enflamatuar çevresel stresle indüklenen entegre stres yanıtının tümör progresyonu ve antiandrojen terapötik yanıtları üzerindeki etkilerinin araştırılması
Investigation of the effects of M1 polarized macrophages-mediated inflammatory environmental stress induced integrated stress response on tumor progression and antiandrogen therapeutic efficacy in LNCaP cells
FATİH HUNÇ
Doktora
Türkçe
2022
BiyokimyaKocaeli ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MELTEM ÖZLEN DİLLİOĞLUGİL
DR. ÖĞR. ÜYESİ KEREM TEKE