Investigation of MRNA expression levels of AMPA receptor genes in mice exposed to maternal stress
Maternal strese maruz kalmış farelerde AMPA reseptör genlerinin MRNA ifade düzeylerinin araştırılması
- Tez No: 808836
- Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ KEZİBAN KORKMAZ BAYRAM, DR. ÖĞR. ÜYESİ FARUK MERT
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Genetik, Genetics
- Anahtar Kelimeler: Amino asitler, Gen ifadesi, Genler, Glutamat, Hayvan deneyleri, Hipokampus, Mikro RNA, RNA, Reseptörler, Stres, Amino acids, Gene expression, Genes, Glutamates, Animal experimentation, Hippocampus, Micro RNA, RNA, Receptors, Stress
- Yıl: 2023
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Ankara Yıldırım Beyazıt Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Translasyonel Tıp Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Neonatal dönemde maruz kalınan stres, yaşam boyu devam eden antisosyal davranışlar ve kişilik bozuklukları gibi psikopatolojik sorunlara yatkınlık oluşturabilmektedir. Amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole propionic asit (AMPA) reseptörleri glutamat ile bağlanarak aktifleşmektedir. Tahmin algoritmalarına göre yüksek skor ile miR-124-3p'nin hedefleri arasında yer alan Gria2-4'e ve Gria1 (hedef olmayan) genleri AMPA reseptörlerinin alt birimlerini kodlamaktadır. miR-124-3p ifade düzeyinin, maternal stresli farelerin plazma ve hipokampusunda arttığını tespit ettiğimiz çalışmadan ilham alarak maternal stres varlığında Gria1-4 genlerinin mRNA düzeylerini hipokampus ve kan örneklerinde araştırmayı amaçladık. Çalışma, kontrol, maternal ayrılık (MS) ve maternal ayrılık ve öngörülemeyen maternal stres (MSUS) gruplarından oluşmaktadır. Postnatal (PND) 1-14 günlerinde MS grubu öngörülemeyen maternal ayrılmaya maruz bırakılırken, MSUS grubuna öngörülemeyen maternal ayrılma ve maternal stres uygulanmıştır (kısıtlama ve zorla yüzme). PND35'de sakrifiye edilen farelerin hipokampus ve kan örneklerinden Fenol-Kloroform tekniği ile total RNA izole edilerek QuantiTect Reverse Transcription Kit ile cDNA sentezlenmiştir. QuantNova SYBR Green PCR Kit kullanılarak Gria1-4 genlerinin mRNA ifade düzeyleri qPCR tekniği ile ölçülmüştür. Elde edilen veriler GraphPad Prism'de One-Way ANOVA testleri kullanılarak analiz edilmiştir. Hipokampusta sırasıyla Gria2 ve Gria3 mRNA ifade düzeylerinin kontrole kıyasla hem dişi hem erkeklerde MS (sırasıyla p=0.0071, p=0.0001) ve MSUS (sırasıyla p<0.0001, p<0.0001) gruplarında azaldığı, Gria4 mRNA ifadesinin ise dişilerde MS ve MSUS gruplarında azaldığı MSUS erkeklerde (p=0.0094) ise arttığı tespit edilmiştir. Ancak kontrole kıyasla Gria1 mRNA ifade düzeyi dişilerde MS (p=0.0021) ve MSUS grubunda azaldığı, Gria1 ve Gria4 mRNA ifade düzeyinin MS ve MSUS gruplarının erkeklerinde ise arttığı tespit edilmiştir. Kan örneklerinde kontrole kıyasla dişilerde Gria2 mRNA ifade düzeyi değişmezken Gria3 MS ve MSUS grubunda artmıştır ayrıca Gria2-3 MS erkeklerde de artmıştır. Kontrole kıyasla hem erkek hem dişilerde Gria1 mRNA ifade düzeyinin MSUS grubunda artarken (p<0.0001), Gria4'ün ise azaldığı (p=0.0161) tespit edilmiştir. Öngörülen şekilde, miR-124-3p ifade düzeyi artışı ile olası hedeflerinin hipokampusda mRNA ifade düzeylerinin azaldığı, ancak bu profilin kanda sergilenmediği gözlenmiştir. Ancak ilginç şekilde, annelerine stres uygulanan yavruların kanında anlamlı şekilde mRNA ifade düzeyinin Gria4 için azalırken Gria1 için arttığı tespit edilmiştir. Bu çalışma, neonatal dönemde maruz kalınan maternal stresin kanda saptanabilmesi açısından Gria1 ve Gria4 genlerinin birer biyobelirteç olma potansiyelini ortaya koyması sebebiyle orijinaldir ve gelecek çalışmalar için umut vadedicidir.
Özet (Çeviri)
Early-life stress may predispose to psychopathological problems such as antisocial behaviours and personality disorders that continue throughout life. Amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole propionic acid (AMPA) receptors are activated by binding with glutamate. According to prediction algorithms, miR-124-3p encodes subunits of Gria2-4 and Gria1 (non-target) AMPA receptors among the targets of miR-124-3p with high scores. We investigated Gria1-4 gene expression in the hippocampus and blood of mice with maternal stress, inspired by our previous research showing raised miR-124-3p levels in these same mice. This study examined control, maternal separation (MS), and maternal separation with unpredictable maternal stress (MSUS). The MS and MSUS groups experienced unpredictable separation from their dams during postnatal days 1-14. The researchers analysed RNA from the hippocampus and blood samples of mice sacrificed on PND35 using qPCR and One-Way ANOVA tests in GraphPad Prism. It was found that Gria2 and Gria3 mRNA expression levels in the hippocampus decreased in the MS (p=0.0071, p=0.0001, respectively) and MSUS (p<0.0001, p<0.0001, respectively) groups in both females and males compared to the control. In contrast, Gria4 mRNA expression decreased in the MS and MSUS groups in females and increased in MSUS males (p=0.0094). However, in females, Gria1 mRNA expression level decreased in the MS (p=0.0021) and MSUS groups, while in males of the MS and MSUS groups, Gria1 and Gria4 mRNA expression levels increased compared to controls. In blood samples, Gria2 mRNA expression level did not change in females, Gria3 increased in MS and MSUS groups, and Gria2-3 MS increased in males. Gria1 mRNA expression level was increased in the MSUS group (p<0.0001), while Gria4 was decreased (p=0.0161) in both genders compared to the control. The study found that miR-124-3p increases in the hippocampus and its targets decrease, but no changes were seen in the blood. The mRNA levels of Gria4 and Gria1 in the blood were significantly different in the litter of stressed mothers, and these genes could serve as potential biomarkers for detecting maternal stress during the neonatal period.
Benzer Tezler
- Deneysel serebral iskemi modeline bağlı öğrenme ve hafıza değişikliklerine transkraniyal doğru akım stimülasyonunun etkilerinin araştırılması
Investigation of the effects of transcranial direct current stimulation on learning and memory changes based on experimental cerebral ischemia model
GÜVEN AKÇAY
- Α-sinüklein aşırı eksprese edilmiş parkinson hastalık modeli oluşturulmuş hek293 hücre soyunda TP53, MYC, ATF2 transkripsiyon faktörlerinin mRNA seviyelerinin araştırılması
Investigation of the mRNA expression levels of TP53, ATF2, MYC transcription factors in the α-synuclein overexpressed hek293 cells
BUSE ÜNLÜ
Yüksek Lisans
Türkçe
2023
Nörolojiİstanbul Üniversitesi-CerrahpaşaSinir Bilimi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ERDİNÇ DURSUN
DOÇ. DR. BEDİA SAMANCI
DR. ÖĞR. ÜYESİ MERVE ALAYLIOĞLU
- Çocukluk çağı inflamatuvar barsak hastalığında serotonerjik sistemle ilişkili mRNA, miRNA ve lncRNA'ların ekspresyon düzeylerinin araştırılması
Investigation of expression levels of mRNAs, miRNAs and lncRNAs associated with serotonergic system in childhood inflammatory bowel disease
MEHMET TUĞHAN KIZILTUĞ
Doktora
Türkçe
2020
GenetikMersin ÜniversitesiTıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MEHMET EMİN ERDAL
PROF. DR. YUSUF USTA
- Mesane kanserli vakaların tümör PER3 mRNA ifadesi veserum PER3 düzeylerinin araştırılması ve PER3'ünprognostik biyobelirteç olarak kullanılabilirliğinin değerlendirilmesi
Investigation of tumor PER3 mRNA expression and serum PER3 levels in bladder cancer patients and evaluation of PER3 as a prognostic biomarker
PARISA VADIEI
Yüksek Lisans
Türkçe
2025
Tıbbi Biyolojiİstinye ÜniversitesiTıbbi Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. MURADİYE ACAR
DR. ÖĞR. ÜYESİ TUNAY DOĞAN
- Pan-aurora kinaz inhibitörü danusertib'in pankreatik karsinoma hücrelerinde kromozomal geçiş kompleks genlerinin mrna ifade düzeylerine etkilerinin araştırılması
The investigation of the effects of pan-aurora kinase inhibitor danuserti̇b on the mrna expression levels of chromosomatransition complex genes in pancreatic carcinoma cells
CENGİZ ÇOLAK