Aspir (Carthamus tinctorius L.) tohumundan lipaz enziminin saflaştırılması ve karakterizasyonu
Characterization and purification of lipase enzyme from aspir (Carthamus tinctorius L.) seed
- Tez No: 819385
- Danışmanlar: PROF. DR. METİN BÜLBÜL
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Aspir tohumu, Enzim, Karakterizasyon, Lipaz, Saflaştırma, Safflower seed, Enzyme, Characterization, Lipase, Purification
- Yıl: 2023
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Kütahya Dumlupınar Üniversitesi
- Enstitü: Lisansüstü Eğitim Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Biyokimya Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 70
Özet
Lipaz, triaçilgliserollerin, gliserol ve yağ asitlerlerine hidrolizinde katalizör olarak görev alan bir enzimdir. Günümüzde biyoteknolojik gelişmelerin hız kazanması, lipaz enziminin kullanım alanlarını arttırmaktadır. Bu çalışma ile ilk kez aspir (Carthamus tinctorius L.) tohumundan lipaz saflaştırılması ve karakterizasyonu yapılarak literatüre katkı sağlamak amaçlanmıştır. Aspir tohumu proteinlerinin yağsızlaştırılması basamaklarında sırasıyla; yağların uzaklaştırılması, amonyum sülfat çöktürmesi, diyaliz, jel filtrasyon kromotografisi yöntemleri kullanılarak lipazın saflaştırılması yapılmıştır. Saflaştırma aşamalarında Lowry metoduna uygun olarak protein tayini yapılmıştır ve titrematik işlemler, aktivite tayinleri için gerçekleştirilmiştir. Yapılan işlemler sonucunda aspir tohumunun 8,47 kat saflaştığı tespit edilmiştir. İşlemler sonucunda spesifik aktivite değerleri de hesaplanmıştır. Lipaz enziminin saflaştırılma işleminin ardından SDS-PAGE ile karakterizasyon işlemi yapılmıştır. Yapılan işlemler sonucunda elde edilen bulgularda en iyi aktivite enzimde pH: 10,4 ve sıcaklıkta 60℃ olarak değerler not edilmiştir. Bununla beraber, stabil pH değeri 13,2 ve stabil sıcaklık seviyesi 50℃ olarak bulunmuştur. Lipaz enzimi depo kararlılığı da tespit edilmiş ve 5 gün üst üste yapılan ölçümlerde (60℃, pH:10,4) enzim aktivitesinde % 70 oranında bir azalma gözlenmiştir. Zeytinyağının ve triolein substratlığında yapılan Km= 25,49 mM ve Vmax değeri ise yaklaşık 5,6 U/dk.mg enzim olarak bulunmuştur.
Özet (Çeviri)
Lipase is an enzyme that acts as a catalyst in the hydrolysis of triacylglycerols to glycerol and fatty acids. Today, the acceleration of biotechnological developments increases the usage areas of lipase enzyme. In this study, it was aimed to contribute to the literature by purifying and characterizing lipase from safflower (Carthamus tinctorius L.) seed for the first time. In the steps of defatting of safflower seed proteins, lipase purification was carried out using oil removal, ammonium sulfate precipitation, dialysis, gel filtration chromatography methods, respectively. In the purification steps, protein determination was performed in accordance with the Lowry method and titrematic procedures were performed for activity determinations. As a result of the procedures, it was determined that safflower seed was purified 8,47 times. Specific activity values were also calculated as a result of the procedures. After purification of the lipase enzyme, characterization was performed by SDS-PAGE. The results obtained as a result of the procedures showed that the best activity enzyme pH: 10.4 and temperature 60℃ were noted as the values. However, the stable pH value was found to be 13.2 and the stable temperature level was 50℃. The storage stability of the lipase enzyme was also determined and a 70% decrease in enzyme activity was observed in measurements made for 5 consecutive days (60℃, pH: 10.4). The Km= 25.49 mM and Vmax value was found to be approximately 5.6 U/min.mg of enzyme in olive oil and triolein substrate.
Benzer Tezler
- Aspir (Carthamus tinctorius L.) tohumu yağının çözücü ekstraksiyonu ve karakterizasyonu
Solvent extraction and characterization of safflower seed oil (Carthamus tinctorius L.)
ALEV AKPINAR
Yüksek Lisans
Türkçe
1999
Kimya MühendisliğiAnadolu ÜniversitesiKimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
Y.DOÇ.DR. ZAKİR POYRAZ
- Sağlıklı beslenmede kullanılan bazı tohumların sabit yağlarının mukayeseli fitokimyasal analizi
Comparative phytochemical oil analysis of some seeds used in healty nutrition
ZUHAL GÜLER ÇELİK
Yüksek Lisans
Türkçe
2017
Eczacılık ve FarmakolojiBezm-i Alem Vakıf ÜniversitesiFarmakognozi ve Doğal Ürünler Kimyası Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GÜLAÇTI TOPÇU
YRD. DOÇ. DR. ECE SEVGİ
- Aspir (Carthamus tinctorius L.) tohumunun süperkritik CO2 ekstraksiyonu
Supercritical fluid extraction of safflower (Carthamus tinctorius L.) seed
ÖZLEM YILMAZ
Yüksek Lisans
Türkçe
2009
Kimya MühendisliğiAnadolu ÜniversitesiKimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. NEZİHE AZCAN
- Aspir çiçeği hasat makinası tasarımı ve prototip imalatı
Design and prototype manufacture of safflower petal harvesting machine
AKİF KÖKTAŞ
Doktora
Türkçe
2024
ZiraatAnkara ÜniversitesiTarım Makineleri ve Teknolojileri Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. METİN GÜNER
- Aspir (carthamus tinctorius L.) ve içeriğindeki erüsik asitin gıda güvenliği ve toksikolojik açıdan değerlendirilmesi
Examination of safflower (carthamustinctorius L.) and erucic acid content in the aspect of food safety and toxicology
BİLGE GEÇİOĞLU
Yüksek Lisans
Türkçe
2016
Adli TıpAnkara ÜniversitesiDisiplinlerarası Adli Bilimler Ana Bilim Dalı
PROF. DR. NEVZAT ARTIK