Plasental kök hücrelerin makromoleküler kalabalık ortamda kondrojenik farklılaşmasının incelenmesi
Investigation of chondrogenic differentiation of placental stem cells in macromolecular crowding environment
- Tez No: 829471
- Danışmanlar: PROF. DR. YAŞAR MURAT ELÇİN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2023
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ankara Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Disiplinlerarası Kök Hücre ve Yenileyici Tıp Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 101
Özet
Kök hücre tedavilerinin yenileyici tıbba yönelik uygulamaları gündeme geldiğinden beri büyük bir umut vadetmesine karşın hayal edilen noktaya henüz ulaşılamamıştır. Nedenleri incelendiğinde mevcut in vitro modellerin in vivo kök hücre nişine yeterli benzerliği sağlayamadığı ve hücre dışı matriksin (ECM) rolünün istenilen düzeyde ele alınmadığı görülmektedir. Bu nedenle tez çalışması kapsamında makromoleküler kalabalıklaşma yaklaşımının, yani hücre kültürü ortamının in vivo nişe benzetilmesi amacıyla büyük moleküllerin eklenmesi suretiyle kalabalıklaştırılmasının etkileri incelenmiştir. Bu etkiyi sağlamak üzere negatif yüklü sülfatlanmış bir polisakkarit olan karagenan kalabalıklaştırıcı olarak kullanılmıştır. Bir plasental kök hücre türü olan amniyotik zar mezenkimal kök hücreleri (AZ-MKH'leri) izole edildikten sonra, morfolojik inceleme, büyüme eğrisi analizi, proliferasyon analizi, CFU-f oluşturma kapasitesi, akım sitometri analizi, üçlü soya farklılaştırma yöntemleri ile kapsamlı olarak karakterize edilmiştir. Daha sonra, standart büyüme ve kondrojenik vasat şartları olmak üzere iki farklı kültür ortamında ve çeşitli MMK konsantrasyonları kullanılarak AZ-MKH'lerinin kültürleri sürdürülmüştür. Makromoleküler kalabalıklaşmanın ve kültür şartlarının etkileri faz kontrast mikroskopi analizleri, migrasyon testi, CFU-f analizi, histokimyasal boyamalar ve protein miktar analizleri gerçekleştirilerek karşılaştırılmıştır. Sonuç olarak histokimyasal analizler, AZ-MKH hücrelerinin MMK koşulları altında gelişebildiğini ve standart vasat ortamında bile kondrojenik yönde farklılaşabildiğini ortaya koydu. Ayrıca, makromoleküler kalabalık ortamın hücrelerin migrasyon ve CFU-f oluşturma kapasitesini azalttığı da bulundu. Bildiğimiz kadarıyla bu çalışma, MMK'ların AZ-MKH'lere olan etkilerinin incelendiği ilk çalışmadır.
Özet (Çeviri)
Although stem cell treatments for regenerative medicine have been promising since they were brought to the agenda, the dreamed point has not been reached yet. When the reasons are examined, it is seen that in vitro models cannot adequately mimic the in vivo stem cell niche and the role of the extracellular matrix (ECM) has not been adequately considered. For this reason, the effects of the macromolecular crowding (MMC) approach, which is the crowding of the cell culture medium by adding macromolecules to simulate the in vivo niche, were investigated within the scope of the thesis. Carrageenan, a negatively charged sulfated polysaccharide, was used as a crowding agent to achieve this effect. Amniotic membrane mesenchymal stem cells (AM-MSCs), a type of placental stem cell, were first isolated and then extensively characterized by morphological examinations, growth curve analysis, proliferation analysis, CFU-f generating capacity, flow cytometry, and trilineage differentiation analysis. Next, cultures of AM-MSCs were maintained under two different culture conditions, i.e. standard growth and chondrogenic media conditions, and using various concentrations of MMC. The effects of macromolecular crowding and culture conditions were compared by performing phase contrast microscopy analysis, migration test, CFU-f analysis, histochemical staining and protein amount analysis. In conclusion, histochemical analyses revealed that AM-MSCs were able to proliferate under MMC conditions and differentiate into chondrogenic lineage even in the standard medium conditions. In addition, it was found that the macromolecular crowding environment reduces the capacity of cells to migrate and generate CFU-f. To our knowledge, this is the first study to examine the effects of MMCs on AM-MSCs.
Benzer Tezler
- Plasental kaynaklı mezenkimal kök hücrelerinin kronik böbrek yetmezliğinde proliferasyon ve apoptoz mekanizmalarına etkisi
Effects of placental-derived mesenchymal stem cells on proliferation and apoptosis mechanisms in chronic kidney disease
BÜŞRA ÇETİNKAYA
Yüksek Lisans
Türkçe
2016
Histoloji ve EmbriyolojiAkdeniz ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. EMİN TÜRKAY KORGUN
- Endometriyoziste endometriyal kök hücrelerin endoplazmik retikulum (ER) stresinin araştırılması
Investigation of endoplasmic reticulum (ER) stress of endometrial stem cells in endometriosis
SELENAY HÜMEYRA FURAT RENÇBER
Doktora
Türkçe
2022
Histoloji ve EmbriyolojiKocaeli ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. YUSUFHAN YAZIR
- Perisitlerin farklılaşma kapasitelerinin mezenkimal kök hücrelerle karşılaştırılmalı olarak incelenmesi
Comparative analysis of differentiation capacities of pericytes and mesenchymal stem cells
SELEN POLAT
Yüksek Lisans
Türkçe
2018
Bilim ve TeknolojiKocaeli ÜniversitesiKök Hücre ve Doku Yenilenmesi Bilim Dalı
DOÇ. DR. YUSUFHAN YAZIR
- Preeklampsinin erken tanısı için mezenkimal kök hücrelerden elde edilen mirnalar'dan biyobelirteç seçimi
Biomarker selection from mirnas obtained from mesenchymal stem cells for the early diagnosis of the preeclampsia
NİLÜFER KAMALI
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
Biyolojiİstanbul ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. TUBA GÜNEL
- Plasentada ekstrasellüler matriks kompozisyonu tarafından HIF'in aktivasyonu
HİF activation in the placenta by extracellular matrix composition
GÖZDE ÜNEK
Doktora
Türkçe
2019
Histoloji ve EmbriyolojiAkdeniz ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. EMİN TÜRKAY KORGUN