Geri Dön

Primer uveal melanom hücre serisinde radyoterapi, bevacizumab, kalsidiol ve kalsitriolün terapotik etkinliğinin karşılaştırmalı olarak incelenmesi

Comparative investigation of the therapeutic effectiveness of radiotherapy, bevacizumab, calcidiol, and calcitriol in primary uveal melanoma cell series

PDF İndir

  1. Tez No: 839854
  2. Yazar: ZEYNEP AKGÜN
  3. Danışmanlar: PROF. DR. MELİS PALAMAR ONAY
  4. Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
  5. Konular: Göz Hastalıkları, Eye Diseases
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2023
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Ege Üniversitesi
  10. Enstitü: Tıp Fakültesi
  11. Ana Bilim Dalı: Göz Hastalıkları Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 101

Özet

AMAÇ: Primer uveal melanom (UM) hücre serisinde radyoterapi (RT), 25-Hidroksivitamin D3, 1a,25- Dihidroksivitamin D3 ve bevacizumabın terapötik etkilerini karşılaştırmalı olarak incelemektir. GEREÇ VE YÖNTEM: Çalışma, Ege Üniversitesi Tıp Fakültesi Tıbbi Biyoloji Anabilim Dalı ve Radyasyon Onkolojisi Anabilim Dalı'nda Göz Hastalıkları Anabilim Dalı'nın katkılarıyla gerçekleştirildi. UM hücre serisi MP41, %1 penisilin-streptomisin ve %10 fetal bovine serum içeren RPMI-1640 besiyeri kullanılarak kültüre edildi, 37°C'de %5 CO2 içeren etüvde çoğaltıldı. Çalışmada RT, 25-Hidroksivitamin D3, 1a,25- Dihidroksivitamin D3, bevacizumab etken maddeleri ve bu etken maddelerin RT ile kombinasyonlarının MP41 hücreleri üzerindeki etkileri incelendi. Deney süresince canlı kalabilecek hücre sayısını belirlemek amacıyla proliferasyon deneyi ve etken maddelerin sitotoksik etkilerini ve hücrelerin %50'sini öldüren konsantrasyonlarını belirlemek amacı ile sitotoksisite analizlerinin yapılmasının ardından 10 ve 100 nM 25-Hidroksivitamin D3 ve1a,25- Dihidroksivitamin D3, 2,5-7,5mg/ml bevacizumab tek başına ve RT ile kombine şekilde hücrelere uygulandı. Radyasyonun MP41 hücreleri üzerindeki koloni oluşum etkisi, etken maddelerin tek başına ve RT ile kombine uygulandığında hücre döngüsü, apoptoz ve proliferasyonda meydana getirdiği etkiler incelendi. BULGULAR: 25- Hidroksivitamin D3 ve 1a,25- Dihidroksivitamin D3'ün sitotoksik etki göstermediği, bevacizumabın ise doz ve süre bağımlı olarak sitotoksik olduğu saptanmıştır. Koloni oluşum deneyinde 3 Gy radyasyonun koloni sayısını %50 oranında azaldığı belirlenmiştir. Hücre proliferasyonunu ve ikilenme zamanını 25- Hidroksivitamin D3'ün etkilemediği, 1a,25-Dihidroksivitamin D3'ün ılımlı arttığı görülmüştür. Bevacizumabın konsantrasyon bağımlı olarak hücre prolifeasyonunun azaldığı saptanmıştır.RT ile kombine uygulanan 25-Hidroksivitamin D3'ün radyasyonun antiproliferatif etkinliğini azalttığı saptanmıştır. RT ile kombine 1a-25-Dihidroksivitamin D3 uygulanmasında 100 nM konsantrasyonunda, ikilenme zamanının (26,44±2,12) tedavisiz bırakılan kontrol grubuna kıyasla (27,86±1,75) arttığı saptanmıştır. RT ile kombine bevacizumab uygulanmasında ikilenme zamanının doz bağımlı olarak tek başına RT ve tek başına bevacizumab uygulanan gruplara göre kısaldığı saptanmıştır. Annexin V/PI boyaması ile yapılan apoptoz analizlerinde 10 nM konsantrasyonunda 25- Hidroksivitamin D3 ve 1a,25- Dihidroksivitamin D3'ün etkisinin olmadığı saptanmıştır.100 nM konsantrasyonunda ise canlı hücre oranında 25- Hidroksivitamin D3'te daha bariz olmak üzere (canlı hücre oranı kontrol grubu/25- Hidroksivitamin D3 1a,25- Dihidroksivitamin D3:%90,2 / %77,9 / %86,9) ılımlı düşüş izlenmiştir. Bevacizumab 2,5 mg/ml ve 7,5 mg/ml konsantrasyonlarında kontrol grubuna (%87,1) kıyasla canlı hücre oranını azaltır iken, 5 mg/ml dozunda uygulandığında canlı hücre oranı %88,0 saptanmıştır. RT ile kombine uygulamada 25- Hidroksivitamin D3 ve 1a,25-Dihidroksivitamin D3'ün radyasyonun apoptotik etkisini (canlı hücre %64,1) azalttığı izlenirken bevacizumabın ise doz bağımlı olmayan katkı sağladığı saptanmıştır. Hücre döngüsü analizlerinde 25- Hidroksivitamin D3 ve 1a,25- Dihidroksivitamin D3'ün dağılımı değiştirmediği saptanmıştır. SONUÇ: Bu çalışma, bahsedilen etken maddelerin UM hücre serisi üzerinde araştırıldığı ilk çalışmadır. Bevacizumab UM MP41 hücre serisi üzerinde proliferasyonu inhibe etmede etkilidir, ayrıca klasik tedavi olan RT ile uygulandığında aditif etkisi mevcuttur. Elde edilen bulgular uygulanacak RT dozunu azaltmada bevacizumabın adjuvan kullanılması ile ilgili klinik çalışmalara ışık tutabilir. D vitaminin UM tedavisinde etkinliklerini inceleyen preklinik çalışmalarda ise sonuçlar çelişkili olup daha çok çalışmaya ihtiyaç duyulmaktadır. ANAHTAR KELİMELER: 25-Hidroksivitamin D3, 1a,25- Dihidroksivitamin D3, Bevacizumab, Radyoterapi, Apoptoz, Hücre döngüsü, Sitotoksisite

Özet (Çeviri)

PURPOSE: To compare the therapeutic effects of radiotherapy (RT), 25-Hydroxyvitamin D3, 1a,25-Dihydroxyvitamin D3 and bevacizumab in primary uveal melanoma (UM) cell line. METHOD: The study was conducted at Ege University Faculty of Medicine, Department of Medical Biology and Radiation Oncology, with the contributions of the Department of Ophthalmology. The UM cell line MP41 was cultured using RPMI-1640 medium containing 1% penicillin-streptomycin and 10% fetal bovine serum and maintained at 37°C in an incubator containing 5% CO 2 . The effects of RT, 25-Hydroxyvitamin D3, 1a,25-Dihydroxyvitamin D3, bevacizumab and their combinations with RT on MP41 cells were investigated. Proliferation assay and cytotoxicity analyzes were performed. After the procedure, 10 and 100 nM 25-Hydroxyvitamin D3 and 1a,25-Dihydroxyvitamin D3, 2.5-7.5mg/ml bevacizumab alone and in combination with RT were treated. Colony formation effect of radiation on MP41 cells, effects of active substances alone or in combination with RT on cell cycle, apoptosis and proliferation were investigated. RESULTS: 25- Hydroxyvitamin D3 and 1a,25-Dihydroxyvitamin D3 were found to be non-cytotoxic, while bevacizumab was found to be dose- and time-dependent cytotoxic. In the colony assay, it was determined that 3 Gy radiation reduced the number of colonies by 50%. It was observed that 25-Hydroxyvitamin D3 did not affect cell proliferation and doubling time, and 1a,25-Dihydroxyvitamin D3 increased moderately. Bevacizumab has been found to decrease concentration-dependent cell proliferation. It has been obseerved that 25-Hydroxyvitamin D3 combined with RT reduces the antiproliferative effect of radiation. In the application of 1a-25-Dihydroxyvitamin D3 combined with RT, at 100 nM concentration, the doubling time (26.44±2.12) was increased compared to the untreated control group (27.86±1.75). It was determined that bevacizumab combined with RT shortened the doubling time in a dose-dependent manner, compared to the groups treated with RT alone and bevacizumab alone. In apoptosis analyzes performed with Annexin V/PI staining, it was determined that 25-Hydroxyvitamin D3 and 1a,25-Dihydroxyvitamin D3 had no effect at 10 nM concentration. At 100 nM concentration, a moderate decrease was observed in cell viability, more clearly at 25-Hydroxyvitamin D3. While bevacizumab reduces cell viability at 2.5 mg/ml and 7.5 mg/ml concentrations compared to the control group (87.1%), it does not affect it at 5 mg/ml. In combination with RT, 25-Hydroxyvitamin D3 and 1a,25-Dihydroxyvitamin D3 were observed to reduce the apoptotic effect of radiation, while bevacizumab provided a dose-independent effect. 25-Hydroxyvitamin D3 and 1a,25-Dihydroxyvitamin D3 have no effect on cell cycle analyzes. CONCLUSION: The presented study is the first to investigate the effects of 25-Hydroxyvitamin D3, 1a,25-Dihydroxyvitamin D3 and bevacizumab in UM cell line in comparison with RT. Bevacizumab is effective in inhibiting proliferation on the UM MP41 cell line, and has an additive effect when combined with RT. The findings may shed light on clinical studies on the adjuvant use of bevacizumab in reducing the dose of RT. In preclinical studies investigating the effects of vitamin D on UM, the results are inconsistent and more studies are needed. KEYWORDS: 25-Hydroxyvitamin D3, 1a,25-Dihydroxyvitamin D3, Bevacizumab, Radiotherapy, Apoptosis, Cell cycle, Cytotoxicity

Benzer Tezler

  1. Tez No

    809469

    Malign melanom hastalarında tümör ile ilişkili antijenlerin belirlenmesi

    Determination of tumor associated antigens in patients with malignant melanoma

    MEHMET KARAÇAY

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    Allerji ve İmmünolojiBursa Uludağ Üniversitesi

    İmmünoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HALUK BARBAROS ORAL

  2. Tez No

    365187

    Uveal melanomlarda patolojik prognostik faktörler ve braf v600e mütasyonu ile sağkalım ilişkisi

    The pathological prognostic factors and braf v600e mutation in uveal melanomas and their association with survey

    MERYEM FATOŞ ÇOŞKUN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2013

    Moleküler Tıpİstanbul Üniversitesi

    Patoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NESİMİ BÜYÜKBABANİ

  3. Tez No

    642325

    Uvea melanomu hücre dizilerinde AMPK modülasyonunun hücre proliferasyonuna etkisinin incelenmesi

    The effect of AMPK modulation on cell proliferation in uveal melanoma cell lines

    ÖZGE DELİKTAŞ

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2020

    Göz HastalıklarıHacettepe Üniversitesi

    Göz Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HAYYAM KIRATLI

  4. Tez No

    473090

    Determination of BAP1 mutaion in cancerous and immortalized cells of mesothelium

    Mezotelyumun ölümsüzleştirilmiş ve kanserli hücrelerinde BAP1 mutasyonunun belirlenmesi

    BAHAADDIN AHMED SABER

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2017

    Moleküler TıpKahramanmaraş Sütçü İmam Üniversitesi

    Biyomühendislik ve Bilimleri Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. SABAHATTİN CÖMERTPAY

  5. Tez No

    842416

    Hipofraksiyone stereotaktik radyocerrahi ile tedavi edilmiş Uveal Melanom hastalarında tedavi öncesi Manyetik Rezonans Görüntüleme'den elde edilen radyomiks parametrelerinin lokal nüks ve metastaz gelişmesini öngörmedeki başarısının araştırılması

    Investigation of the predictive value of radiomics parameters derived from pre-treatment MRI for local recurrence and metastasis development in patients with Uveal Melanoma treated with hypofractionated stereotactic radiosurgery

    YUSUF BAYTAR

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    Radyasyon OnkolojisiHacettepe Üniversitesi

    Radyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ELİF GÜNAY BULUT

Geri Dön