Geri Dön

Köpeklerde nano-ozon solüsyonunun in vitro nükleer oosit maturasyonu üzerine etkisi

Effect of nano-ozone solution on in vitro nuclear oocyte maturation in dogs

PDF İndir

  1. Tez No: 842400
  2. Yazar: ÖZGE BARİ
  3. Danışmanlar: PROF. DR. RABİA GÖZDE ÖZALP
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Veteriner Hekimliği, Biyoteknoloji, Veterinary Medicine, Biotechnology
  6. Anahtar Kelimeler: Antioksidanlar, Gen ifadesi, Köpekler, Nanopartiküller, Oositler, Ozon, Ozon tedavisi, Siklin, Veteriner hekimlik, İn vitro, Antioxidants, Gene expression, Dogs, Nanoparticles, Oocytes, Ozone, Ozone therapy, Cyclin, Veterinary medicine, In vitro
  7. Yıl: 2023
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Bursa Uludağ Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Veterinerlik Doğum ve Jinekolojisi Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Köpek oositlerinin in vitro maturasyon (IVM) oranları diğer türlere göre oldukça düşüktür. IVM'deki önemli problem, reaktif oksijen türlerinin (ROS) oluşumu olup, bunun önlenmesinde en basit yaklaşım, medyumların antioksidan madde ile hazırlanmasıdır. Bu çalışmada, hem oksidan hem de antioksidan özelliğe sahip nano-ozon solüsyonu kullanıldı. Nano-ozon solüsyonunun köpek oositlerinde nükleer morfolojiye etkisi, kültür medyumunun oksidan/antioksidan durumu ve maturasyon ilişkili genlerin (Siklin bağımlı kinaz 1 (CDK1) ve Siklin B1) ekspresyon seviyeleri değerlendirildi. Ek olarak, antioksidan kapasitenin değerlendirilmesi için demir iyonu indirgeyici antioksidan güç (FRAP) testi kullanıldı. Kumulus-oosit kompleksi (COCs) 130 köpekten toplandı. COCs farklı konsantrasyonlarda nano-ozon solüsyonu eklenen maturasyon medyumunda inkübe edildi (0, 0,5, 1, 2, ve 5 µg/ml). Kültür medyumları toplanarak Malondialdehit (MDA), Glutatyon (GSH), Süperoksit-dismutaz (SOD) ve FRAP ölçümü için saklandı. Partenogenetik aktivite sonrasında, nükleer morfolojiler mikroskop altında germinal vezikül (GV), germinal vezikül parçalanması (GVBD), metafaz I (MI), metafaz II (MII), ve dejenere (DEG) oosit olarak değerlendirildi. Aktivasyon sonrası toplanan oositlerde, CDK1 ve Siklin B1 gen ekspresyonları Real-Time PCR ile değerlendirildi. Nükleer morfoloji oranları gruplar arasında farklı bulundu (p<0,05). Mayotik süreci tamamlayan oosit oranı (MI+MII) en yüksek Grup B ve C'de bulunurken, MII aşamasına ulaşan en yüksek oosit sayısı Grup C'de gözlendi. MDA ve SOD konsantrasyonları arasında fark bulunamadı (p>0,05) ancak GSH ve FRAP düzeyleri istatistiksel olarak farklı bulundu (p<0,05). Bunun ötesinde CDK1 ve Siklin B1 gen ekspresyonları gruplar arasında farklı bulundu (p<0,05). En yüksek oran Grup B ve C'de belirlendi. Sonuçlarımız nano-ozon'un IVM'de oksidatif stres parametrelerini hafifleterek MII aşamasına gelişimi indüklemiş ve maturasyon-ilişkili gen ekspresyonunu artırmıştır. En uygun doz olarak 0,5 µg/ml, 1 µg/ml nano-ozon katkısının IVM'de kullanılması önerilebilir.

Özet (Çeviri)

In vitro maturation rates of canine oocytes are rather lower than other species. Long incubations and insufficient conditions of maturation culture affect negatively the success of in vitro maturation (IVM). The most important problem during the maturation process is the production of high amount of reactive oxygen species (ROS) that is the end-point of mitochondrial lipid peroxidation. The basic approach to prevent ROS production is to prepare an in vitro culture medium with antioxidant substances. In this study, a nano-ozone solution, which has both oxidant and antioxidant properties, was used. The effect of nano-ozone on the nuclear morphology of canine oocytes, oxidant and antioxidant status of maturation culture medium, and maturation-related (Cyclin Dependent Kinase 1 (CDK1) and Cyclin B1) gene expression levels were investigated. Additionally, the Ferric ion-reducing antioxidant power (FRAP) method was used to determine antioxidant capacity. The cumulus-oocytes complex (COCs) was collected from 130 dogs after the ovariohysterectomy operation. The COCs were incubated in in vitro maturation culture media, supplemented with nano-ozone solution at different concentrations (0, 0.5, 1, 2, and 5 µg/ml). After maturation of 72 hours, the culture medium was stored in Eppendorf tubes in order to determine Malondialdehyde (MDA), Glutathione (GSH), Superoxide Dismutase (SOD), and FRAP concentrations. Oocytes were parthenogenetically activated and nuclear morphology was classified as Germinal Vesicle intact (GV), Germinal Vesicle Break Down (GVBD), Metaphase I (MI), Metaphase II (MII), and degenerated (DEG) oocytes under light microscope. Additionally, cultured oocytes were collected after activation. The oocytes were used for mRNA isolation and Real-Time PCR for expression of CDK1 and Cyclin B1 genes. The rate of oocyte nuclear morphology (GVBD, MI, MII, and DEG) was statistically different between groups (p<0.05). The rate of oocytes that completed the meiotic process (MI+MII) was higher in Group B and Group C, whereas the rate of oocytes reaching the MII stage was highest in Group C. No difference was observed between the groups in terms of MDA and SOD (p>0.05). GSH and FRAP levels were statistically different between groups (p<0.05). Compared to the control group, GSH and FRAP levels were higher in nano-ozone-supplemented groups. Furthermore, CDK1 and Cyclin B1 gene expressions were also statistically different between groups (p<0.05). Expression levels of both genes were high in Group B and Group C. Our results suggested that nano-ozone solution could alleviate oxidative stress parameters during IVM, induce development to MII stage, and increase the expression levels of maturation-related genes. Low doses of nano-ozone supplementation during canine IVM studies could be advised and the most appropriate and effective doses are 0.5 µg/ml and 1 µg/ml could be suggested.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    935515

    Köpeklerde Distemper virusu hastalığında Newcastle hastalığı LaSota suşunun kullanılması

    Use of Newcastle disease LaSota strain in Distemper virus disease in dogs

    BERFU ELİBOL

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2025

    Veteriner HekimliğiAfyon Kocatepe Üniversitesi

    İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ABUZER ACAR

  2. Tez No

    894963

    Köpeklerde çay ağacı yağı ve karanfil yağının birlikte kullanımının demodektik uyuza karşı akarisidal etkinliğinin değerlendirilmesi

    Evaluation of the acaricidal efficacy of the combined use of tea tree oil and clove oil against demodectic mange in dogs

    LEMAN AYDINLIK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    Veteriner HekimliğiBurdur Mehmet Akif Ersoy Üniversitesi

    Veterinerlik Farmakoloji ve Toksikolojisi Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. HİDAYET TUTUN

  3. Tez No

    861769

    Köpeklerde parvoviral enteritis hastalığının mineral homeostazisi üzerine etkisinin araştırılması

    Investigation of the effect of parvoviral enteritis disease on mineral homeostasis in dogs

    KÜBRA BEKARER

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    Veteriner HekimliğiErciyes Üniversitesi

    Veteriner Biyokimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. EBRU ÇETİN

  4. Tez No

    192452

    Köpeklerde hipertansiyon ve antihipertansif olarak enalapril maleate'ın etkinliği

    Hypertension and the efficacy of enalapril maleate as antihypertensive in dogs

    SERKAL GAZYAĞCI

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2006

    Veteriner HekimliğiAnkara Üniversitesi

    Veterinerlik İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. MEHMET ŞAHAL

  5. Tez No

    391106

    Köpeklerde kalp yetersizliğinin sınıflandırılması, atriyo-ventriküler kapak yetersizliği sağaltımında enalapril ve pimobendan'ın etkinliği üzerine karşılaştırmalı araştırmalar

    Classification of heart failure in dogs, comparative researches on effectiveness of enalapril and pimobendan in treatment of atrioventricular valve insufficiency

    ONUR İSKEFLİ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2013

    Veteriner Hekimliğiİstanbul Üniversitesi

    İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. TARIK BİLAL

Geri Dön