Sibirya Mersin Balığı Acipenser Baerii (Brandt,1869)'un solungaç dokusu glukoz 6 fosfat dehidrojenazının (EC.1.1.1.49) saflaştırılması ve kinetik karakterizasyonu
Purification and kinetic characterization of gill tissue glucose 6 phosphate dehydrogenase (EC.1.1.1.49) from siberian sturgeon Acipenser Baerii (Brandt, 1869)
- Tez No: 882164
- Danışmanlar: PROF. DR. SALİH GÖRGÜN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Glukoz 6-fosfat dehidrojenaz, Acipenser baerii (Brandt, 1869), 2′ 5′ -ADP Sefaroz 4B afinite kromatografisi, kinetik karakterizasyon, saflaştırma, Glucose 6-phosphate dehydrogenase, A. baerii (Brandt, 1869), 5'-ADP Sepharose 4B affinity chromatography, kinetic characterization, purification
- Yıl: 2024
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Sivas Cumhuriyet Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 69
Özet
SİBİRYA MERSİN BALIĞI ACİPENSER BAERİİ (BRANDT,1869)'UN SOLUNGAÇ DOKUSU GLUKOZ 6 FOSFAT DEHİDROJENAZININ (EC.1.1.1.49) SAFLAŞTIRILMASI VE KİNETİK KARAKTERİZASYONU Beyza Gül KOÇAK Yüksek Lisans Tezi Biyokimya Anabilim Dalı Danışman: Prof. Dr. Salih GÖRGÜN 2024, 70+xiv sayfa Bu çalışmada, Sibirya Mersin Balığı Acipenser baerii (Brandt,1869) solungacından glukoz 6-fosfat dehidrogenaz (EC.1.1.1.49) (G6PD), 2′ 5′ ADP Sefaroz 4B afinite kromatografisi ile saflaştırılmıştır. Elde edilen enzim preparatının saflaştırma parametrelerinin 114.4 kat saflık, % 68.51 verim ve 1.144 EU/mg.protein spesifik aktivite olduğu belirlenmiştir. Saflaştırmanın başarısını kontrol etmek için yerine getirilen SDS-PAGE analizlerinin sonucu olarak, yaklaşık olarak 63 kDa ve 55 kDa molekül kütleli iki protein bandının varlığı belirlenmiştir. Elde edilen enzim preparatı için optimum sıcaklık ve pH sırasıyla, 40 °C ve 8.0 olarak belirlenmiştir. Enzimin kinetik davranışı gerek glukoz 6-fosfat (G6P) gerekse NADP+ substratları için değerlendirilmiştir. Km ve Vmax değerleri G6P için 8.13 mM ve 0.12 EU/mL olarak belirlenirken, bu değerler NADP+ için 9.17 mM ve 0.13 EU/mL olarak belirlenmiştir. Bu veriler değerlendirildiğinde, A. baerii solungaç G6PD enziminin gerek G6P gerekse NADP+' ya ilgisinin benzer olduğu görülmektedir. Cd2+ ve Cu2+ metal iyonlarının araştırılan konsantrasyonları enzim üzerinde inhibisyon etkisi göstermiştir. Cd2+ ve Cu2+ için IC50 değerleri 1,108- 0,249 mM, Kİ değerleri ise sırasıyla 0,214 ± 0,092 mM ve 0,213 ± 0,121 mM olarak belirlenmiştir. Her iki metal iyonunun A. baerii solungaç G6PD enzimi üzerinde kompetitif (yarışmalı) inhibisyon sergilediği bulunmuştur.
Özet (Çeviri)
PURIFICATION AND KINETIC CHARACTERIZATION OF GILL TISSUE GLUCOSE 6 PHOSPHATE DEHYDROGENASE (EC.1.1.1.49) FROM SIBERIAN STURGEON ACIPENSER BAERII (BRANDT, 1869) Beyza Gül KOÇAK Master of Science Thesis, Department of Biochemistry Supervisor : Prof. Dr. Salih GÖRGÜN 2024, 70+xiv pages In this study, glucose 6 phospahate dehydrogenase (EC. 1.1.1.49) (G6PD) from the gills of Siberian strugeon Acipenser baerii (Brandt, 1869) was purified by 2′ 5′ ADP Sepharose 4B affinity chromatography. Purification parameters of the enzyme preparation obtained was defined to be 114.4 fold purity, % 68.51 yield and 1.444 EU/mg.protein specific activity. As a result of SDS-PAGE analyses carried out for checking the succes of the purification, the presence of two protein bands with approximately 63 kDa and 55 kDa molecular masses were determined. Optimum temperature and pH values for the enzyme preparation obtained was defined as 40 °C and 8.0, respectively. The kinetic behavior of the enzyme was evaluated for both glucose 6-phosphate (G6P) and NADP+ substrates. While Km and Vmax values were determined as 8.13 mM and 0.12 EU/mL for G6P, this values were determined as 9.17 mM and 0.13 EU/mL for NADP+. When assessed these data, it has seen that G6PD enzyme from the gills of A. baerii has similar affinities both G6P and NADP+. Investigated concentrations of the matal ions of Cd2+ ve Cu2+ showed inhibition effect on the enzyme. IC50 values for Cd2+ ve Cu2+ were determined as 1,108 mM and 0,249 mM while Ki values were determined as 0,214 ± 0,092 mM and 0,213 ± 0,121 mM, respectively. It was found that both metal ions exhibited competitive inhibition on A. baerii's gill G6PD enzyme.
Benzer Tezler
- Sibirya Mersin Balığı Acipenser Baerii (Brandt, 1869)'un karaciğer ve kas dokusundan karbonik anhidraz'ın (EC.4.2.1.1) saflaştırılması ve metal iyonlarının inhibisyon etkilerinin incelenmesi
Purufi̇cation of carboic anhydrase (EC. 4.2.1.1) from the liver and muscle tissue of sturgeon Acipenser Baerii (Brandt, 1869) and investigation of the inhibitoin effects of metal ions
HATİCE ŞAHİN AYIK
Yüksek Lisans
Türkçe
2024
BiyokimyaSivas Cumhuriyet ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SALİH GÖRGÜN
DOÇ. DR. ÜMİT MUHAMMET KOÇYİĞİT
- Sibirya mersin (Acipenser baerii Brandt, 1869) ve Karaca Mersin (Acipenser gueldenstaedtii Brant & Ratzeburg, 1833) balıklarında mide boşaltımı
Gastric evacuation in Siberian sturgeon (Acipenser baerii Brandt, 1869) and Russian sturgeon (Acipenser gueldenstaedtii Brant & Ratzeburg, 1833)
ALHABEEB ALABDULLAH
Doktora
Türkçe
2022
Su ÜrünleriRecep Tayyip Erdoğan ÜniversitesiSu Ürünleri Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. RAHŞAN EVREN MAZLUM
- Sibirya mersin balığı (Acipenser baerii ) naklinde balık refahının değişimi
Fish welfare under the transportation of Siberian sturgeon fish (Acipenser baerii)
SONGÜL GENÇ
Yüksek Lisans
Türkçe
2017
Su ÜrünleriRecep Tayyip Erdoğan ÜniversitesiSu Ürünleri Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. İLKER ZEKİ KURTOĞLU
- Sibirya Mersin balığı (Acipenser baerii) yeminde fındık küspesi kullanımının büyüme performansına etkisi
Effect on growth performance of using hazelnut meal in Siberian Sturgeon (Acipenser baerii) diet
YUNUS EMRE KIRTAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2015
Su ÜrünleriRecep Tayyip Erdoğan ÜniversitesiSu Ürünleri Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. HURİYE ARIMAN KARABULUT
- Doğu Karadeniz şartlarında Sibirya (Acipenser baerii) ve karaca (A. gueldenstaedtii) mersin balıklarının gamet gelişimlerinin belirlenmesi
Determination of gamete development of Siberian (A. baerii) and diamond (A. gueldenstaedtii) sturgeon in Eastern Black Sea conditions
KÜBRA AK
Doktora
Türkçe
2017
Su ÜrünleriRecep Tayyip Erdoğan ÜniversitesiSu Ürünleri Yetiştiriciliği Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. İLKER ZEKİ KURTOĞLU